【摘要】：AP-2復合體廣泛存在于真核生物中,以異源四聚體的形式在哺乳動物/植物的網(wǎng)格蛋白介導的質(zhì)膜囊泡運輸中行使生物學功能。然而,AP-2復合體在絲狀真菌病原中仍沒有被明確的報道過。在本研究中,對小麥赤霉病的病原真菌,即禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)中AP-2復合物進行了鑒定及生物學功能分析。研究表明,FgAP-2復合物在維持禾谷鐮刀菌菌絲極性中起著至關重要的作用,FgAP-2復合物任何亞基基因缺失(FgAP2~α,FgAP2~β,FgAP2~σand FgAP2~(mu))都顯著影響菌絲的營養(yǎng)生長、分生孢子形態(tài)和萌發(fā)。同時,FgAP-2復合物對于禾谷鐮刀菌的致病性非常重要,特別對于侵染寄主后定殖和擴展功能。FgAP-2復合物在病菌的各個發(fā)育階段普遍表達,但在新生菌絲的亞尖端頸環(huán)及隔膜處具有更集中的動態(tài)分布。盡管FgAP-2復合物顯示出與肌動蛋白斑點相似的動態(tài)行為,并在內(nèi)吞位點積累,但其對于常規(guī)的內(nèi)吞作用是非必需的。實驗進一步證明,FgAP-2復合物對于脂質(zhì)翻轉(zhuǎn)酶FgDnfA和FgDnfB正常的極性定位至關重要。綜上所述,FgAP-2作為貨物特異性銜接器調(diào)控禾谷鐮刀菌的極性生長和侵染寄主后的定殖能力。
【圖文】：

17圖 1AP-2 蛋白復合體所有亞基的蛋白結構域和系統(tǒng)進化樹分析Fig. 1 Protein domains and phylogenetic tree analyses of all subunits of the AP-2 complex.The cartoons depict the protein domains of the AP-2 complex each subunit in the fungi(Aspergillus nidulans, Magnaporthe oryzae, Neurospora crassa, Saccharomyces cerevisiae orSchizosaccharomyces pombe), plants (Arabidopsis thaliana) and mammals (Homo sapiens).A. The protein domains of the AP-2 complex α subunit. The subunits contain N-terminal adaptindomain (pfam01602, ~570 amino acids). The numbers 1 and 2 stand for Alpha_adaptin C2(smart00809, ~103 amion acids) and Alpha_adaptin_C (pfam02296, ~ 112 amion acids),respectively. The phylogenetic tree was reconstructed using Neighbor-Joining and bootstrapmethods.The branch scale used was 0.1 and the branch lengths reflect the expected number ofsubstitutions per site.

19圖 2 FgAP-2 復合體靶標基因的 Southern blot 分析Fig. 2 Southern blot analyses of FgAP-2 complex targeted gGenomic DNAs were extracted from the wild type strain PH-1 and putative were digested with the indicated restriction enzymes and gel fractionated.probes were used for mutant screening and identification.A. Targeted deletion of FgAP2α. NcoI-digested genomic DNAs showed a 3.20and a 2.419 kb band in the mutant.B. Targeted deletion of FgAP2β. EcoRV-digested DNAs showed a 2.314kb b3.108kb band in the mutant.C. Targeted gene deletion of FgAP2mu. NcoI-digested DNAs showed a 3.71and a 2.380kb band in the mutant.D. Targeted deletion of FgAP2σ. XhoI-digested genomic DNAs showed a 1.4a 3.789 kb band in the mutant.
【學位授予單位】：福建農(nóng)林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S435.121.45

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本文編號：2614769