【摘要】：桃蚜是一種危害多種茄科作物的世界性害蟲,昆蟲病原真菌--蠟蚧輪枝菌具有防治該害蟲的巨大潛力。本文比較分析了三株昆蟲病原真菌蠟蚧輪枝菌(V-2、V-3和V-5)的分生孢子、濾液、孢子和濾液的二元組合以及粗蛋白提取液對(duì)桃蚜的毒性,并測(cè)試了粗蛋白應(yīng)用于番茄對(duì)桃蚜的拮抗作用。此外,從蠟蚧輪枝菌中分離到降解昆蟲體壁的幾丁質(zhì)酶,并測(cè)試了該幾丁質(zhì)酶對(duì)大蠟螟的活性。主要結(jié)果如下:(1)測(cè)定3株分離菌株(V-2、V-3和V-5)的分生孢子、濾液和分生孢子+濾液的二元組合對(duì)桃蚜的致死性。分生孢子測(cè)試結(jié)果顯示,第8天時(shí)V-3在最高濃度1×10~8 CFU/mL具有最高的蚜蟲致死率為95%,V-5具有最低的致死率70%;與此同時(shí),濾液測(cè)試結(jié)果表明,V-3菌株的濾液具有98%的蚜蟲致死率,而V-5菌株濾液的蚜蟲致死率為74%。同樣地,V-3菌株的孢子+濾液的組合具有最高的蚜蟲致死率(91%)。這些結(jié)果表明,菌株V-3具有最高的蚜蟲致死率,并且其濾液拮抗蚜蟲最為有效。(2)使用4種不同濃度的粗蛋白(0、2、4和6 mg mL~(-1))處理番茄植株,每個(gè)處理重復(fù)10次。最高濃度處理后第7天的蚜蟲存活率最低(46%),最高濃度和對(duì)照組的平均繁殖率分別為1.5幼蟲/d/雌蟲和2.4幼蟲/d/雌蟲。RT-qPCR結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,粗蛋白顯著上調(diào)番茄中水楊酸相關(guān)基因(PR1、BGL2和PAL),適度上調(diào)了茉莉酸相關(guān)基因(LOX、AOS和AOC)。結(jié)果表明,不同蛋白濃度處理番茄后對(duì)桃蚜的存活率和繁殖力均有影響,從蠟蚧輪枝菌提取的粗蛋白能夠誘導(dǎo)番茄植株對(duì)桃蚜的抗性,能夠作為農(nóng)業(yè)害蟲生物防治的資源。。(3)利用His-Trap-Hp柱純化獲得了重組蛋白chit1,采用直接注入到大蠟螟幼蟲血腔的方法,測(cè)定了重組蛋白不同濃度(200、250、300、350、400、450和500μg mL~(-1))對(duì)大蠟螟幼蟲的血腔毒性。結(jié)果表明,純化的chit1蛋白能有效地殺死大蠟螟幼蟲,死亡率與蛋白濃度成正相關(guān)。最高濃度處理7d后大蠟螟幼蟲死亡率為95%。研究結(jié)果表明該真菌蛋白可以用于害蟲防治。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S476.12
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本文編號(hào)：2609167