【摘要】：黃瓜白粉病是危害黃瓜(Cucumis sativusL.)生產(chǎn)的主要病害之一,植株發(fā)病時光合效能下降,進而影響黃瓜產(chǎn)量和果實品質(zhì),常引起30%左右的減產(chǎn)。黃瓜抗白粉病品種選育及應(yīng)用是克服白粉病危害的有效途徑。植物的抗性機制通常與蛋白質(zhì)的差異表達相關(guān)。研究白粉菌接種后黃瓜抗感材料蛋白質(zhì)組學(xué)水平上的變化及其與抗白粉病之間的關(guān)系,將有助于在蛋白水平上揭示黃瓜抗白粉病機制。以實驗室選育的一個具有高抗白粉病且能穩(wěn)定遺傳的片段代換系'SSL508-28'和易感白粉病受體親本'D8'為試驗材料,利用iTRAQ技術(shù),研究了接種白粉病菌48h的葉片蛋白質(zhì)的變化;運用qRT-PCR技術(shù)對部分差異蛋白對應(yīng)基因在'SSL508-28'接種白粉菌48h后mRNA水平的表達量進行了分析,選擇抗感白粉病差異性顯著的黃瓜品系對抗病候選基因Csa4M290740.1的表達量進行了分析;主要研究結(jié)果如下:1.利用iTRAQ技術(shù)鑒定到具有定量信息的蛋白3629個,其中差異表達(FDR≤0.05、Fold changes≥2)蛋白151個;38個蛋白在抗感品系中被檢測到,主要為谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、放氧增強蛋白、過氧化物酶73等;79個蛋白僅在抗病品系'SSL508-28'中被檢測到,主要為多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白、核糖體循環(huán)因子、蘋果酸脫氫酶、remorin蛋白、DNA損傷修復(fù)/耐受蛋白DRT100等;34個蛋白只在感病品系'D8'中被檢測到,主要為甘油醛-3-磷酸脫氫酶和50S核糖體蛋白等;通過對差異蛋白進行生物信息學(xué)分析和功能注釋分析,篩選出7個抗病候選蛋白。2.利用qRT-PCR對候選的7個抗病候選蛋白的對應(yīng)基因在'SSL508-28'接種白粉菌48h的表達量進行檢測,結(jié)果表明,Csa4M290740.1(DNA損傷修復(fù)/耐受蛋白DRT100,屬于抗病(resistance,R)蛋白的LRR類)表達量在'SSL508-28'接種白粉菌48h后顯著上調(diào)。3.利用qRT-PCR分析Csa4M290740.1在黃瓜不同抗感白粉病品系中的表達量,結(jié)果顯示,Csa4M290740.1在抗病品系中的表達量高于感病品系,且在供體親本'Jin5-508'中的表達量最高,'D8'中相對表達量最低。本研究初步探明了黃瓜應(yīng)答白粉病菌脅迫的蛋白質(zhì)變化規(guī)律,獲得了與黃瓜白粉病抗性關(guān)系密切的抗性基因Csa4M290740.1,為黃瓜白粉病抗性機制解析及分子遺傳改良奠定了重要基礎(chǔ)。
【圖文】：

不同同位素在標(biāo)記同一段肽鏈后在一級質(zhì)譜分析中，分子量都是相同的，在串聯(lián)質(zhì)逡逑譜中，同位素標(biāo)記的肽段發(fā)生裂解，平衡基團在二級質(zhì)譜中發(fā)生中性丟失；信號離子表現(xiàn)逡逑為不同的質(zhì)荷比（１１３－１１４）的峰，根據(jù)波峰的高度和面積得到蛋白質(zhì)的定量信息（圖１－１）。逡逑

３級：白粉斑逐漸連接成片，所占面積超過葉面積的２／３；逡逑４級：白粉斑鋪滿整張葉片，，碰觸葉片，白粉振落；逡逑５級：白粉斑布滿整張葉片，葉片開始黃化，逐漸枯死（圖２－１）。逡逑
【學(xué)位授予單位】：揚州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S436.421.12

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本文編號：2608714