高氧抑制腸道緊密連接蛋白和腸道干細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2024-12-19 03:51
目的:氧氣對(duì)于機(jī)體持續(xù)產(chǎn)生能量是必不可少的。高氧治療是指吸入的氧氣濃度大于60%。高氧治療廣泛應(yīng)用于搶救重癥新生兒,它可以提高血氧分壓和血氧飽和度,以滿足組織器官的需氧量,消除或減少缺氧對(duì)機(jī)體的不利影響,是臨床上重癥新生兒急救中不可或缺的成分。雖然高氧治療提高了患兒的生存率,但是使用不當(dāng)也極易引發(fā)氧損傷,其中就包括腸道損傷,必須引起高度重視。緊密連接(tight junction,TJ)是一種多蛋白質(zhì)復(fù)合物,廣泛存在于所有上皮或內(nèi)皮細(xì)胞連接處的最頂端,包括封閉蛋白Claudins、閉合蛋白Occludin以及閉合小帶蛋白(Zonula occludens,Zos)等。腸道TJ是重要的物理屏障,受損后會(huì)引起免疫系統(tǒng)的過度激活,導(dǎo)致炎癥反應(yīng),與各種腸道和全身性炎癥疾病的發(fā)病密切相關(guān)。B-淋巴瘤莫洛尼氏鼠白血病病毒插入?yún)^(qū)-1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region-1,Bmi1)和亮氨酸富含重復(fù)的G蛋白偶聯(lián)受體5(Leucine‐rich repeat‐containing G‐protein coupled rece...
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
2.1 材料試劑與主要儀器
2.1.1 主要試劑
2.1.2 主要儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2.3 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MTT)檢測(cè)NCM460 細(xì)胞的生存能力
2.2.4 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)新生大鼠腸道緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 以及腸道干細(xì)胞標(biāo)記物Bmi1和Lgr5 的表達(dá)
2.2.5 Western Bolt法檢測(cè)新生大鼠腸道和NCM460 細(xì)胞緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 以及新生大鼠腸道干細(xì)胞標(biāo)記物Bmi1 和Lgr5的表達(dá)
2.2.6 RT-qPCR法檢測(cè)新生大鼠腸道和NCM460 細(xì)胞緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 以及新生大鼠腸道干細(xì)胞標(biāo)記物Bmi1 和Lgr5的mRNA表達(dá)
2.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 高氧降低腸道緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表達(dá)量
3.1.1 Western Blot檢測(cè)Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表達(dá)量
3.1.2 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表達(dá)
3.2 高氧降低腸道緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4的mRNA相對(duì)表達(dá)量
3.3 高氧降低腸道干細(xì)胞標(biāo)記物Bmi1、Lgr5 的蛋白表達(dá)量
3.3.1 Western Blot檢測(cè)Bmi1、Lgr5 的蛋白表達(dá)量
3.3.2 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Bmi1、Lgr5 的蛋白表達(dá)量
3.4 高氧降低腸道干細(xì)胞標(biāo)記物Bmi1、Lgr5的mRNA相對(duì)表達(dá)量
3.5 抗氧化劑NAC和 Apocynin作用下,高氧中NCM460 細(xì)胞生存率變化
3.5.1 抗氧化劑NAC(20μM)提高高氧中NCM460 細(xì)胞的生存率
3.5.2 抗氧化劑Apocynin作用下,高氧中的NCM460 細(xì)胞生存率沒有增高
3.6 抗氧化劑NAC(20μM)作用下高氧中的NCM460 細(xì)胞緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表達(dá)量增高
3.7 抗氧化劑NAC(20μM)作用下高氧中NCM460 細(xì)胞緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4的mRNA表達(dá)量增高
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
本文編號(hào):4017612
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
2.1 材料試劑與主要儀器
2.1.1 主要試劑
2.1.2 主要儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2.3 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MTT)檢測(cè)NCM460 細(xì)胞的生存能力
2.2.4 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)新生大鼠腸道緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 以及腸道干細(xì)胞標(biāo)記物Bmi1和Lgr5 的表達(dá)
2.2.5 Western Bolt法檢測(cè)新生大鼠腸道和NCM460 細(xì)胞緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 以及新生大鼠腸道干細(xì)胞標(biāo)記物Bmi1 和Lgr5的表達(dá)
2.2.6 RT-qPCR法檢測(cè)新生大鼠腸道和NCM460 細(xì)胞緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 以及新生大鼠腸道干細(xì)胞標(biāo)記物Bmi1 和Lgr5的mRNA表達(dá)
2.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 高氧降低腸道緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表達(dá)量
3.1.1 Western Blot檢測(cè)Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表達(dá)量
3.1.2 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表達(dá)
3.2 高氧降低腸道緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4的mRNA相對(duì)表達(dá)量
3.3 高氧降低腸道干細(xì)胞標(biāo)記物Bmi1、Lgr5 的蛋白表達(dá)量
3.3.1 Western Blot檢測(cè)Bmi1、Lgr5 的蛋白表達(dá)量
3.3.2 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Bmi1、Lgr5 的蛋白表達(dá)量
3.4 高氧降低腸道干細(xì)胞標(biāo)記物Bmi1、Lgr5的mRNA相對(duì)表達(dá)量
3.5 抗氧化劑NAC和 Apocynin作用下,高氧中NCM460 細(xì)胞生存率變化
3.5.1 抗氧化劑NAC(20μM)提高高氧中NCM460 細(xì)胞的生存率
3.5.2 抗氧化劑Apocynin作用下,高氧中的NCM460 細(xì)胞生存率沒有增高
3.6 抗氧化劑NAC(20μM)作用下高氧中的NCM460 細(xì)胞緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表達(dá)量增高
3.7 抗氧化劑NAC(20μM)作用下高氧中NCM460 細(xì)胞緊密連接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4的mRNA表達(dá)量增高
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
本文編號(hào):4017612
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