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穴狀稀土螯合劑的免疫標(biāo)記技術(shù)研究

發(fā)布時(shí)間:2024-12-22 05:06
  目的本研究旨在合成理想的穴狀稀土螯合劑,并用于甲胎蛋白單克隆抗體(AFP-McAb)的標(biāo)記,同時(shí)對標(biāo)記的最佳條件進(jìn)行探索,以檢驗(yàn)自合成的穴狀稀土螯合劑用于標(biāo)記抗體的效果,為生物分子的標(biāo)記提供參考,為進(jìn)一步構(gòu)建均相時(shí)間分辨熒光免疫分析奠定基礎(chǔ)。方法以2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸乙酯為原料,優(yōu)化合成Li+(?)2,6-{N,N',N,N'-[二(2,2'-聯(lián)吡啶-6,6'-二甲基)]二(氨甲基)}-吡啶-二羧酸乙酯(Li+(?)bpy.bpy.py(CO2Et)2),進(jìn)一步選擇乙腈和甲醇兩種反應(yīng)體系合成 Eu3+(?)2,6-{N,N',N,N'-[二(2,2'-聯(lián)吡啶-6,6'-二甲基)]二(氨甲基)}-吡啶-二羧酸乙酯(Eu3+(?)bpy.bpy.py(CO2Et)2),比較不同反應(yīng)體系下合成的銪螯合物的光譜性質(zhì)。將EU3+(?)bpy.bpy.py(CO2Et)2水解后的銪螯合劑Eu3+(?)2,6-{N,N',N,N'-[二(2,2'-聯(lián)吡啶-6,6'-二甲基)]二(氨甲基)}-吡啶-二羧酸(Eu3+(?)bpy.bpy.py(CO2H)2)作為示蹤物,經(jīng)交聯(lián)劑EDC和NHS...

【文章頁數(shù)】:50 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖3.1交聯(lián)劑EDC和NHS的反應(yīng)原理

圖3.1交聯(lián)劑EDC和NHS的反應(yīng)原理

7pH9.60.5M碳酸鹽緩沖溶液:稱量29.3gNaHCO3、15.9gNa2CO3,置于燒杯中,加入二次蒸餾水,充分溶解,調(diào)節(jié)溶液pH,定容至1L,貼標(biāo)簽備用。8包被液:pH9.60.5M碳酸鹽緩沖溶液50ml,加入二次蒸餾水450ml混勻,貼標(biāo)....


圖2.1穴狀稀土螯合劑的合成路線圖

圖2.1穴狀稀土螯合劑的合成路線圖

以2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸乙酯為原料,首先合成,進(jìn)一步選擇乙腈和甲醇兩種反應(yīng)體系進(jìn)行Eu3+配位反應(yīng)[5],獲得目標(biāo)產(chǎn)物并對其激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率和熒光壽命進(jìn)行分析比較,同時(shí)將其水解生成合成路線如圖2.1所示。2.2.12,6-二(溴甲基)吡啶-3,....


圖2.2的質(zhì)譜圖

圖2.2的質(zhì)譜圖

螯合配位稀土銪離子的質(zhì)譜圖MSm/z(%):,如圖2.2所示,結(jié)果與其相對分子質(zhì)量相符,說明該配體與銪離子間配位結(jié)合。進(jìn)行酯基的水解反應(yīng),的質(zhì)譜圖MSm/z(%):,如圖2.3所示,結(jié)果與其相對分子質(zhì)量相符,說明配體上的兩個(gè)酯基水解形成羧基。研究表明[61],的激發(fā)光譜為24....


圖2.3的合成和質(zhì)譜圖

圖2.3的合成和質(zhì)譜圖

進(jìn)行酯基的水解反應(yīng),的質(zhì)譜圖MSm/z(%):,如圖2.3所示,結(jié)果與其相對分子質(zhì)量相符,說明配體上的兩個(gè)酯基水解形成羧基。研究表明[61],的激發(fā)光譜為240nm-340nm(最大激發(fā)波長322nm),發(fā)射光譜窄而尖銳(最大發(fā)射波長597nm和618nm),Stokes達(dá)29....



本文編號:4019480

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