本文關(guān)鍵詞：大鼠腦缺血再灌注損傷后DWI和AQP4蛋白表達(dá)相關(guān)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:腦水腫是腦缺血后主要的病理表現(xiàn),研究表明水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)在腦梗死后腦水腫的形成和發(fā)展中起著重要作用,目前對腦缺血再灌注損傷后不同時期磁共振彌散加權(quán)成像(diffusion weighted imaging,DWI)和AQP4蛋白表達(dá)之間的相關(guān)性研究較少。因此本研究運(yùn)用DWI動態(tài)評價大鼠腦缺血再灌注損傷后腦損傷區(qū)AQP4蛋白表達(dá)和表觀擴(kuò)散系數(shù)(apparent diffusion coefficient,ADC)之間的相關(guān)性以及AQP4表達(dá)與缺血性腦水腫之間的關(guān)系。方法:1 80只SD雄性大鼠,體重270-300g,隨機(jī)分成8組,分別為腦缺血再灌注1h、3h、6h、12h、1d、3d、7d組和假手術(shù)組,采用線栓法制作大鼠右側(cè)大腦中動脈缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型。2采用Zea Longa評分法對假手術(shù)組和缺血再灌注后不同時間點(diǎn)大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評分。3使用Philips Achieva 3.0T MR掃描儀對假手術(shù)組和缺血再灌注后不同時間點(diǎn)大鼠腦部行冠狀位掃描,掃描序列包括T1WI、T2WI、DWI,在工作站上重建ADC圖,測量基底節(jié)層面梗死灶DWI信號強(qiáng)度(signal intensity,SI)和ADC值,計(jì)算相對ADC值(rADC)和相對DWI-SI(rDWI-SI)值。4采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色測量大鼠腦缺血再灌注損傷后不同時間點(diǎn)梗死體積的變化。5采用HE染色觀察假手術(shù)組和腦缺血再灌注大鼠不同時間點(diǎn)(12h、1d、3d)的組織形態(tài)學(xué)變化。6采用免疫組化染色測定假手術(shù)組和腦缺血再灌注大鼠不同時間點(diǎn)(12h、1d、3d)腦組織中AQP4蛋白表達(dá),測量平均光密度值(mean optical density,MOD)值評價染色程度。結(jié)果:1假手術(shù)組動物麻醉蘇醒后未見神經(jīng)功能缺損,神經(jīng)功能評分均為0。腦缺血再灌注1h大鼠出現(xiàn)神經(jīng)損傷,左側(cè)肢體無力,肌張力降低,左側(cè)轉(zhuǎn)圈,不能飲食。3h-1d時癥狀加重,1d時部分向?qū)?cè)傾倒,3-7d時癥狀改善,恢復(fù)飲食。1h神經(jīng)功能評分升高,3h-1d之間神經(jīng)功能評分無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,3-7d神經(jīng)功能評分減低,7d時神經(jīng)功能評分較1d明顯降低(p0.05);2假手術(shù)組dwi及adc圖均未見異常信號。mcao/r后1hdwi上紋狀體及周圍部分皮層區(qū)域出現(xiàn)高信號,相應(yīng)部位adc值降低。1h-1ddwi高信號面積隨時間推移逐漸增大,信號強(qiáng)度逐漸增高,3-7d時開始降低。radc值隨時間先降低后升高,6h達(dá)到最低,12h開始回升,1d時radc值較12h再次降低(p0.05)。3d時開始回升,7d時與假手術(shù)組無明顯差異(p0.05);1h-1drdwi持續(xù)升高,1d達(dá)最高峰,3-7d開始下降,7d時仍明顯高于假手術(shù)組;3he染色結(jié)果顯示假手術(shù)組海馬及皮層區(qū)結(jié)構(gòu)未見明顯異常,細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,細(xì)胞核染成深藍(lán)色,胞漿豐富,染色質(zhì)均一。mcao/r后12h缺血側(cè)海馬區(qū)及皮層區(qū)出現(xiàn)缺血性損害,可見部分濃染細(xì)胞和胞漿空泡形成,核固縮,但細(xì)胞排列尚好;1d時缺血側(cè)神經(jīng)元缺血性損傷加重,細(xì)胞排列紊亂,細(xì)胞間隙增寬,出現(xiàn)大量胞漿空泡化,核固縮顯著;3d時缺血側(cè)海馬區(qū)空泡化有所減輕;4假手術(shù)組ttc染色未見白染區(qū)域,均染成紅色。模型組1h可見右側(cè)紋狀體及周圍少許皮層染成蒼白色,為梗死區(qū)域;1h-1d白染區(qū)域逐漸擴(kuò)大,包括右側(cè)基底節(jié)區(qū)及額顳葉皮層,3-7d范圍較1d時縮小。1h-1d時梗死體積隨時間推移逐漸增加,6h-1d之間增加最快,1-3d時達(dá)到峰值,7d時梗死體積減小,但7d仍高于6h(p0.05)。腦缺血再灌注1h-1d缺血側(cè)腦水腫體積隨時間持續(xù)增加,1d達(dá)到高峰,3d時開始下降,7d明顯減低;5假手術(shù)組海馬區(qū)及皮層區(qū)aqp4免疫組化染色較淺淡。mcao/r后12h缺血側(cè)海馬區(qū)及皮層均可見aqp4陽性著色細(xì)胞,12h-3daqp4mod隨時間延長逐漸增高,3d時達(dá)到高峰,三組aqp4表達(dá)水平均明顯高于假手術(shù)組(p0.05);6模型組各時間點(diǎn)神經(jīng)功能評分與相應(yīng)時間點(diǎn)基底節(jié)區(qū)梗死灶rDWI-SI呈顯著性正相關(guān)(r=0.503,P=0.000);相應(yīng)時間點(diǎn)腦梗死體積、水腫體積與rDWI-SI均呈顯著性正相關(guān)(r=0.542,P=0.001;r=0.740,P=0.000);7 12h、1d、3d組大鼠腦水腫體積與相應(yīng)時間點(diǎn)缺血側(cè)皮層區(qū)AQP4表達(dá)水平的MOD值呈正相關(guān)(r=0.642,P0.05),與海馬區(qū)AQP4表達(dá)水平的MOD值呈正相關(guān)(r=0.605,P0.05);三組大鼠基底節(jié)區(qū)梗死灶rADC值與缺血側(cè)皮層區(qū)、海馬區(qū)AQP4表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.542,P=0.037;r=0.655,P=0.008)。結(jié)論:1磁共振擴(kuò)散加權(quán)成像及ADC值的變化對評價腦缺血再灌注損傷具有高度的敏感性和特異性,對腦缺血再灌注損傷后梗死灶的動態(tài)改變具有直觀的價值。2大鼠腦缺血再灌注后腦水腫體積、rADC值與AQP4的表達(dá)水平存在時間上的相關(guān)性;12h-1d時腦水腫體積及AQP4表達(dá)水平明顯增加,1d到3d時水腫體積輕度下降,而AQP4表達(dá)水平仍繼續(xù)升高,這提示AQP4在急性期(12h-1d)時可能參與了缺血再灌注后腦水腫的形成,而亞急性期(1d-3d)可能與防止腦水腫進(jìn)一步加重、清除腦內(nèi)過多的水分有關(guān)。3結(jié)合DWI檢查,對腦缺血后AQP4表達(dá)部位、作用以及調(diào)節(jié)機(jī)制進(jìn)行更深入系統(tǒng)的研究可能為臨床治療缺血性腦水腫提供新的診斷思路和治療方法。
【關(guān)鍵詞】：磁共振成像 彌散加權(quán)成像 腦水腫 大鼠 腦缺血再灌注 表觀擴(kuò)散系數(shù) 水通道蛋白4
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R743.3;R445.2
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-14
• 材料與方法14-18
• 結(jié)果18-20
• 附圖20-31
• 附表31-34
• 討論34-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 綜述 水通道蛋白在腦內(nèi)分布、功能的研究進(jìn)展44-56
• 參考文獻(xiàn)52-56
• 致謝56-57
• 個人簡歷57-58

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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  本文關(guān)鍵詞：大鼠腦缺血再灌注損傷后DWI和AQP4蛋白表達(dá)相關(guān)性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：344077