真菌在農(nóng)產(chǎn)品中大量滋生,它的代謝物存在于各種農(nóng)業(yè)原材料和商品中。真菌毒素具有400多種不同的化學(xué)結(jié)構(gòu),其中赭曲霉毒素A（Ochratoxin A,OTA）是其主要的組成部分。OTA具有腎毒性、免疫毒性和致畸作用,被國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）歸類為致癌物質(zhì)�，F(xiàn)如今,最常用的檢測(cè)方法為儀器分析法和免疫分析法。儀器分析法往往需要昂貴的儀器、操作繁瑣且需要專業(yè)的技術(shù)人員。免疫分析法具有操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),可以快速檢測(cè)大量的待測(cè)樣品。本實(shí)驗(yàn)制備了OTA單克隆抗體,研制出直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA試劑盒,從而建立了快速、靈敏的OTA的檢測(cè)方法。本研究把OTA和牛血清白蛋白（Bovine serum albumin,BSA）偶聯(lián)合成免疫原OTA-BSA,把OTA和雞卵清蛋白（Ovalbumin,OVA）偶聯(lián)合成檢測(cè)原OTA-OVA。采用聚丙烯酰胺凝膠電泳和紫外掃描的方法,鑒定合成的抗原,結(jié)果顯示合成成功。OTA-BSA和OTA-OVA偶聯(lián)比分別為7.5:1與5:1。免疫結(jié)果表明OTA-BSA免疫的小鼠,產(chǎn)生了免疫應(yīng)答。用OTA-OVA包板進(jìn)行檢測(cè),其中1號(hào)小鼠免疫效果最好,其多抗血清效價(jià)最... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

赭曲霉毒素A的結(jié)構(gòu)式

OTA完全抗原制備

OTA-BSA紫外掃描


本文編號(hào)：3335170