流行性感冒是由流行性感冒病毒（Influenza Viruses）引起的急性呼吸道傳染病,據(jù)統(tǒng)計全球每年有約25萬到50萬人死于流行性感冒,因此,流行性感冒病毒嚴(yán)重威脅著人類的公共衛(wèi)生安全。開展流感監(jiān)測能及時發(fā)現(xiàn)、評估流感疫情,是控制流感流行或大流行的重要手段。目前,全國范圍內(nèi)已經(jīng)建立起以流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室和流感哨點(diǎn)醫(yī)院為基礎(chǔ)的流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)。本研究針對公共衛(wèi)生安全威脅較大的8種流感病毒（A/H1N1-2009亞型、季節(jié)性A/H1N1亞型、A/H3N2亞型、A/H5N1亞型、A/H7N9亞型、A/H9N2亞型、B/Yamagata和B/Victoria譜系流感病毒）,采用MS2噬菌體病毒樣顆粒包裝平臺,將各亞型/譜系流感病毒核酸檢測的靶基因（血凝素基因、神經(jīng)氨酸酶基因、基質(zhì)蛋白基因、核蛋白基因、非結(jié)構(gòu)蛋白基因）分別包入MS2噬菌體衣殼蛋白內(nèi)部,制備了37種的病毒樣顆粒作為流感病毒核酸檢測模擬樣本。為探討流感病毒核酸檢測試劑與其它人患病毒間的交叉反應(yīng)情況,同時制備包裹麻疹病毒、風(fēng)疹病毒和丙肝病毒核酸檢測序列的病毒樣顆粒3種,作為流感病毒核酸檢測質(zhì)評樣本盤中的陰性樣本,以檢測流感病毒核酸檢測... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：301 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞
中文摘要
英文摘要
前言
1. 材料和方法
    1.1. 實(shí)驗(yàn)材料和試劑配制
    1.2. 方法
        1.2.1. 內(nèi)含流感病毒基因的表達(dá)載體的構(gòu)建
        1.2.2. 重組病毒樣顆粒的表達(dá)和純化
        1.2.3. 重組病毒樣顆粒的鑒定與定量
        1.2.4. 流感病毒核酸檢測質(zhì)評樣本盤的建立
        1.2.5. 流感病毒核酸檢測室間質(zhì)量評價
        1.2.6. 質(zhì)評結(jié)果的統(tǒng)計分析
2. 結(jié)果
    2.1. 病毒基因DNA片段的獲取與載體的構(gòu)建
    2.2. 重組病毒樣顆粒的表達(dá)和純化
    2.3. 重組病毒樣顆粒的鑒定
        2.3.1. 瓊脂糖凝膠電泳鑒定重組病毒樣顆粒
        2.3.2. SDS-PAGE鑒定重組病毒樣顆粒
        2.3.3. 逆轉(zhuǎn)錄PCR鑒定重組病毒樣顆粒內(nèi)含的目的RNA序列
        2.3.4. 數(shù)字PCR定量病毒顆粒拷貝數(shù)
        2.3.5. 樣本盤的建立及驗(yàn)證
        2.3.6. 漂流樣本檢測結(jié)果
        2.3.7. 2016年全國流感病毒核酸檢測室間質(zhì)量評價結(jié)果
3. 討論
參考文獻(xiàn)
論文綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄1 pACYCDuet-1載體詳細(xì)信息
附錄2 重組表達(dá)載體測序結(jié)果
附錄3 室間質(zhì)量評價情況調(diào)查通知
附錄4 全國流感病毒核酸檢測項(xiàng)目開展情況調(diào)查表
附錄5 活動安排及注意事項(xiàng)
附錄6 流感病毒核酸檢測室間質(zhì)量評價調(diào)查活動結(jié)果回報表
致謝
個人簡介



本文編號：3006222