【摘要】：目的:本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)脂多糖誘導(dǎo)乳鼠心肌細(xì)胞的膿毒癥心肌損傷模型,探究UCP2過(guò)表達(dá)能否調(diào)控膿毒癥心肌線粒體炫的頻率,以及是否有心肌保護(hù)作用。方法:分離培養(yǎng)原代大鼠乳鼠心肌細(xì)胞,用LPS誘導(dǎo)建立膿毒癥心肌損傷模型。分別用UCP2過(guò)表達(dá)腺病毒與對(duì)照空病毒轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞。隨機(jī)分為6組:正常組、UCP2過(guò)表達(dá)組、空病毒組、LPS組、LPS+UCP2過(guò)表達(dá)組、LPS+空病毒組。用cp-YFP腺病毒轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞,使心肌細(xì)胞線粒體中表達(dá)cp-YFP,激光共聚焦顯微鏡采集圖像,Flash Sniper軟件分析圖像,觀察各組線粒體炫的頻率。分別檢測(cè)各組CK、LDH水平,TNF-α、IL-6釋放,TMRM染色法檢測(cè)線粒體膜電位,WB檢測(cè)各組UCP2蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:(1)與正常組相比,LPS組心肌細(xì)胞線粒體炫頻率顯著增高,CK、LDH、TNF-α、IL-6水平顯著升高(P0.05);(2)LPS+UCP2過(guò)表達(dá)組與LPS組相比,線粒體炫頻率明顯下降,CK、LDH、TNF-α、IL-6水平顯著降低,但高于正常組(P0.05);線粒體膜電位顯著上升,但低于正常組(P0.05);(3)LPS組UCP2蛋白表達(dá)顯著高于正常組,但低于UCP2過(guò)表達(dá)組與LPS+UCP2過(guò)表達(dá)組(P0.05);(4)UCP2過(guò)表達(dá)組與LPS+UCP2過(guò)表達(dá)組UCP2蛋白表達(dá)顯著高于正常組和LPS組(P0.05);(5)空病毒的轉(zhuǎn)染對(duì)心肌細(xì)胞無(wú)顯著影響(P0.05)。結(jié)論:UCP2過(guò)表達(dá)能夠減少膿毒癥心肌細(xì)胞過(guò)量ROS的產(chǎn)生,部分逆轉(zhuǎn)LPS誘導(dǎo)導(dǎo)致的心肌損傷,起到心肌保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R459.7
【圖文】：

義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位畢業(yè)論文 結(jié)果.1 UCP2 過(guò)表達(dá)對(duì)膿毒癥乳鼠心肌細(xì)胞 IL-6 的影響與正常組(Normal)比較，LPS 組 IL-6 釋放顯著增高(P<0.0肌細(xì)胞損害，其釋放 IL-6 增多。然而，LPS+UCP2 過(guò)表達(dá)組 ,但高于正常組(P<0.05)，表明 UCP2 過(guò)表達(dá)部分逆轉(zhuǎn)了 LPS 傷。UCP2 過(guò)表達(dá)組、空病毒組與正常組 IL-6 水平比較差異明單獨(dú)UCP2過(guò)表達(dá)獲空病毒轉(zhuǎn)染對(duì)心肌細(xì)胞IL-6水平無(wú)明病毒組之間 IL-6 水平比較差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，進(jìn)肌細(xì)胞無(wú) IL-6 水平無(wú)顯影響。結(jié)果見(jiàn)圖 1。

義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位畢業(yè)論文 .2 UCP2 過(guò)表達(dá)對(duì)膿毒癥乳鼠心肌細(xì)胞 TNF-α 的影與正常組(Normal)相比較，LPS 組 TNF-α水平顯著增高心肌細(xì)胞受損，其 TNF-α 釋放增多。然而，LPS+UCP2 過(guò)表于 LPS 組，但高于正常組(P<0.05)，表明 UCP2 過(guò)表達(dá)部分逆造成的損傷。UCP2 過(guò)表達(dá)組與空病毒組比較 TNF-α 水平無(wú)意義(P>0.05)，表明空病毒轉(zhuǎn)染對(duì)心肌細(xì)胞 TNF-α 水平無(wú)明顯病毒組比較 TNF-α 水平無(wú)顯著差異，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>轉(zhuǎn)染對(duì)心肌細(xì)胞 TNF-α 水平無(wú)明顯影響。結(jié)果見(jiàn)圖 2。

院碩士學(xué)位畢業(yè)論文 CP2 過(guò)表達(dá)對(duì)膿毒癥乳鼠心肌細(xì)胞 LDH 的影響正常組(Normal)比較，LPS 組 LDH 水平顯著升高(P<0.05，心肌細(xì)胞損傷，其漏出 LDH 增多。LPS+UCP2 過(guò)表達(dá)組，但高于正常組(P<0.05)，表明 UCP2 過(guò)表達(dá)部分逆轉(zhuǎn) LPSUCP2 過(guò)表達(dá)組與空病毒組之間 LDH 水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)毒的轉(zhuǎn)染對(duì) LDH 水平無(wú)明顯影響； LPS 組與 LPS+空病異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，進(jìn)一步表明空病毒轉(zhuǎn)染對(duì)心肌圖 3。

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本文編號(hào)：2806800