發(fā)布時(shí)間：2020-08-26 00:04

【摘要】：目的:測(cè)定磷霉素對(duì)臨床分離KPC-KP的最低抑菌濃度(MIC)。在此基礎(chǔ)上測(cè)定磷霉素聯(lián)合多黏菌素E、替加環(huán)素對(duì)KPC-KP的聯(lián)合藥敏及時(shí)間殺菌曲線,評(píng)價(jià)磷霉素聯(lián)合多黏菌素E、替加環(huán)素對(duì)KPC-KP的抗菌效果。根據(jù)耐藥突變選擇窗(MSW)理論,測(cè)定磷霉素、多黏菌素E、替加環(huán)素單藥及磷霉素分別聯(lián)合兩藥的防突變濃度,測(cè)定聯(lián)合用藥防止耐藥發(fā)生能力。初步探究KPC-KP對(duì)磷霉素的耐藥機(jī)制。方法:(1)使用瓊脂平板倍比稀釋法測(cè)定磷霉素對(duì)70株KPC-KP的MIC。(2)選取對(duì)磷霉素敏感的KPC-KP菌株,使用瓊脂平板倍比稀釋法測(cè)定多黏菌素E、替加環(huán)素對(duì)25株KPC-KP的MIC,使用微量棋盤稀釋法測(cè)定磷霉素分別聯(lián)合多黏菌素E、替加環(huán)素的聯(lián)合藥敏,計(jì)算FIC。根據(jù)各藥MIC及藥代動(dòng)力學(xué),測(cè)定并繪制磷霉素、多黏菌素E、替加環(huán)素及磷霉素分別聯(lián)合多黏菌素E、替加環(huán)素對(duì)6株KPC-KP的時(shí)間殺菌曲線。(3)根據(jù)前部分研究結(jié)果,使用瓊脂平板倍比稀釋法測(cè)定磷霉素、替加環(huán)素、多黏菌素E及聯(lián)合用藥對(duì)10株對(duì)磷霉素敏感KPC-KP的防突變濃度(MPC)。(4)使用PCR技術(shù)提取并測(cè)定耐藥突變菌株MurA、uhpT、glpT基因,將臨床耐藥菌、臨床敏感菌、體外實(shí)驗(yàn)篩選耐藥菌進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果:臨床分離的70株KPC-KP對(duì)磷霉素敏感率為35.71%。聯(lián)合藥敏顯示磷霉素聯(lián)合多黏菌素 E 時(shí),FIC≤0.5 占 20%,0.5FIC1 占 52%,FIC=1 占 16%,1FIC≤2占12%,磷霉素聯(lián)合替加環(huán)素時(shí),FIC≤0.5占8%,0.5FIC1占64%,FIC=1占20%,1FIC≤2占8%,未見FIC2。時(shí)間殺菌曲線磷霉素聯(lián)合多黏菌素E、替加環(huán)素殺菌效果優(yōu)于單藥,磷霉素聯(lián)合多黏菌素E可完全清除細(xì)菌。測(cè)定磷霉素、多黏菌素E、替加環(huán)素對(duì)KPC-KP的MPC,磷霉素為2048mg/L,多黏菌素E為64至256mg/L,替加環(huán)素為4至32mg/L。磷霉素聯(lián)用多黏菌素E、替加環(huán)素后MPC稍有下降。MPC篩選出磷霉素耐藥突變菌可見MurA、uhpT、glpT基因突變。結(jié)論:(1)臨床分離的70株KPC-KP對(duì)磷霉素有一定的抗菌活性。(2)聯(lián)合藥敏結(jié)果提示磷霉素與多黏菌素E、替加環(huán)素對(duì)大部分KPC-KP菌株呈協(xié)同作用,對(duì)部分菌株呈相加或無關(guān)作用,無拮抗作用。時(shí)間殺菌曲線發(fā)現(xiàn)磷霉素聯(lián)合多黏菌素E或替加環(huán)素殺菌效果優(yōu)于單藥。(3)磷霉素、多黏菌素E、替加環(huán)素單藥MPC高于血藥濃度,MSW過寬,單獨(dú)應(yīng)用易出現(xiàn)耐藥。磷霉素聯(lián)合多黏菌素E或替加環(huán)素時(shí),MPC下降不明顯,聯(lián)合用藥限制耐藥效果不理想。(4)KPC-KP對(duì)磷霉素的耐藥與MurA、uhpT、glpT基因突變相關(guān),上述基因突變可能影響細(xì)菌正常功能。
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R446.5
【圖文】：

圖１：磷霉素累計(jì)耐藥百分比（ｎ＝７０）逡逑用臨床時(shí)間長，因其抗菌譜廣、價(jià)格低廉廣泛應(yīng)用于各類染，對(duì)包括腸球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌在內(nèi)的多有殺菌活性ｎ７’１８］。肺炎克雷伯菌是常見的院內(nèi)致病菌，臨喹諾酮類、碳青霉烯類抗生素治療，隨著抗生素應(yīng)用的不種抗生素的耐藥性不斷增強(qiáng)。肺炎克雷伯菌可通過產(chǎn)生藥物作用靶點(diǎn)結(jié)構(gòu)等機(jī)制產(chǎn)生耐藥性。產(chǎn)碳青霉烯酶為肺炎性的重要機(jī)制，多種碳青霉烯酶如ＫＰＣ、ＭＢＬ、ＮＤＭ－１、ＩＭＰ年美國北卡羅來納首次發(fā)現(xiàn)產(chǎn)肺炎克雷伯碳青霉烯酶的來，ＫＰＣ－ＫＰ臨床分離率逐年升高［２°］。文獻(xiàn)報(bào)道肺炎克雷［２１〃２］

邐解放軍醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文邐逡逑單藥ＭＩＣ邋（圖２）。后分別吸取比濁稀釋后的菌液ｌＯＯｕｌ滴入９６孔板中，并記錄各菌逡逑株位置，１號(hào)、Ｈ號(hào)單藥孔加入５０邋ｕｌ滅菌ＭＨＢ，使９６孔板各孔均有２００邋ｕｌ液體，逡逑最終菌液濃度約為５ｘｌＯｓＣｆｕ／ｍｌ。將９６孔板置于微量振蕩儀振蕩約４５秒，使孔內(nèi)液逡逑體充分混合，后移至恒溫培養(yǎng)箱中以３７°Ｃ溫度培養(yǎng)２０ｈ，觀察并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，孔內(nèi)逡逑渾濁或底部可見沉渣判定為有細(xì)菌生長，孔內(nèi)液體清亮，底部未見沉渣判定為無細(xì)菌逡逑生長。逡逑ＦＩＣ邐９６孔板逡逑

加環(huán)素、多黏菌素Ｅ單藥對(duì)ＫＰＣ－ＫＰ的ＭＩＣ結(jié)果按ＣＬＳＩ及ＦＤＡ標(biāo)果如表２所示。替加環(huán)素ＭＩＣｍ＝邋ｌｍｇ／Ｌ，ＭＩＣｍ＝２邋ｍｇ／Ｌ，多黏菌素？邋５ｍｇ／Ｌ，ＭＩＣ９ｆｌ＝邋０．邋５ｍｇ／Ｌ。逡逑表２：磷霉素、多黏菌素、替加環(huán)素對(duì)ＫＰＣ－ＫＰ單藥ＭＩＣ邋（ｎ＝２５）逡逑藥物邋ＭＩＣ５０邋ＭＩＣ９０邋Ｓ逡逑磷霉素邐６４邐６４邐１００逡逑多黏菌素Ｅ邋０．５邐０．５邐１００逡逑替加環(huán)素邋１邐２邐１００逡逑素聯(lián)合替加環(huán)素、多黏菌素Ｅ藥敏結(jié)果，磷霉素聯(lián)合替加環(huán)素時(shí)，ｍｇ／Ｌ，ＭＩＣ９（）＝３２ｍｇ／Ｌ，替加環(huán)素邋ＭＩＣＭ＝ｌｍｇ／Ｌ，邋ＭＩＣ９［）＝２ｎｉｇ／Ｌ，磷霉素時(shí)，磷霉素邋ＭＩＣｗ＝８ｍｇ／Ｌ，ＭＩＣＭ＝３２ｍｇ／Ｌ，多黏菌素邋ＭＩＣｍ＝０．邋１２

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 崔俊昌;抗菌藥物防突變濃度及其臨床意義[J];國外醫(yī)學(xué)(呼吸系統(tǒng)分冊(cè));2003年06期

本文編號(hào)：2804375