發(fā)布時(shí)間：2020-07-30 09:46

【摘要】：[目的]:檢測(cè)BRD4在小鼠脊髓中的表達(dá)及細(xì)胞定位,通過福爾馬林疼痛模型,探討B(tài)RD4在急性炎性疼痛中的作用。[方法]:36只健康雌性昆明小鼠隨機(jī)分為3組,分別是正常對(duì)照組(control)、福爾馬林組(FM)、福爾馬林+吲哚美辛組(FM+Indo),每組12只。于小鼠右側(cè)后肢足底皮下分別注射無菌生理鹽水(control)或1%福爾馬林溶液25μl(FM,FM+Indo),FM+Indo在小鼠皮下注射福爾馬林溶液前1小時(shí),給予腹腔注射吲哚美辛(20 mg/kg);福爾馬林或生理鹽水注射后立即觀察小鼠的自發(fā)疼痛行為。運(yùn)用免疫熒光雙標(biāo)方法確定BRD4在小鼠脊髓的細(xì)胞定位;免疫組織化學(xué)方法和Western blot檢測(cè)各組小鼠雙側(cè)脊髓BRD4的表達(dá)。[結(jié)果]:(1)BRD4在小鼠脊髓中的表達(dá)及細(xì)胞定位免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)結(jié)果顯示:BRD4陽(yáng)性信號(hào)廣泛分布于小鼠脊髓的各個(gè)區(qū)域,主要分布于后角淺層,左右兩側(cè)表達(dá)大致相同。免疫熒光雙標(biāo)方法檢測(cè)了BRD4與神經(jīng)元的標(biāo)記物Neu N、星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物GFAP和小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物Iba-1的共表達(dá)情況,結(jié)果顯示BRD4主要分布于小鼠脊髓后角淺層,與神經(jīng)元標(biāo)記物Neu N存在共表達(dá)情況,但與星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物GFAP和小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物Iba-1共定位表達(dá)較少,提示BRD4在小鼠脊髓后角淺層主要定位于神經(jīng)元。(2)BRD4在福爾馬林疼痛模型小鼠脊髓中的表達(dá)變化行為學(xué)結(jié)果顯示:與正常對(duì)照組相比,福爾馬林組小鼠組小鼠表現(xiàn)出明顯的雙相痛行為,而吲哚美辛預(yù)處理可減輕福爾馬林誘導(dǎo)的第二相疼痛。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:與正常對(duì)照組相比,福爾馬林組雙側(cè)脊髓后角淺層BRD4表達(dá)上調(diào)(P0.05);與福爾馬林組相比,福爾馬林+吲哚美辛組較福爾馬林組小鼠雙側(cè)脊髓后角淺層BRD4表達(dá)顯著下調(diào)(P0.05)。Western blot結(jié)果顯示:與正常對(duì)照組相比,福爾馬林組雙側(cè)脊髓BRD4蛋白表達(dá)上調(diào)(P0.05);與福爾馬林組相比,福爾馬林+吲哚美辛組較福爾馬林組小鼠雙側(cè)脊髓BRD4蛋白表達(dá)顯著下調(diào)(P0.05)。[結(jié)論]:小鼠脊髓后角淺層BRD4的表達(dá)變化可能參與了急性炎性疼痛的調(diào)節(jié)。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R402
【圖文】：

南華大學(xué)碩士學(xué)位論文第 3 章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 BRD4 在小鼠脊髓中的表達(dá)我們用免疫組織化學(xué)組織化學(xué)法檢測(cè) BRD4 在小鼠脊髓中的表達(dá)（如圖 1）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：BRD4 陽(yáng)性信號(hào)廣泛分布于脊髓的各個(gè)區(qū)域，主要分布在脊髓后角淺層，且左右兩側(cè)表達(dá)大致相同。結(jié)果表明：BRD4 主要分布于小鼠脊髓后角淺層，提示它的分布可能與其淺層功能有關(guān)。

圖 2 脊髓后角神經(jīng)元 BRD4 與 NeuN 共表達(dá)情況綠色熒光：BRD4， 紅色熒光：神經(jīng)元的標(biāo)記物 NeuN， 黃色熒光：BRD4 與 NeuN 共表達(dá)標(biāo)尺=100 μm 和 50 μm圖 3 結(jié)果顯示：在脊髓后角很少見 BRD4（綠色熒光）陽(yáng)性產(chǎn)物與星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物 GFAP（紅色熒光）的共存，并且與小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物 Iba-1（紅色熒光）共定位表達(dá)也難以見到。

第 3 章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖 2 脊髓后角神經(jīng)元 BRD4 與 NeuN 共表達(dá)情況綠色熒光：BRD4， 紅色熒光：神經(jīng)元的標(biāo)記物 NeuN， 黃色熒光：BRD4 與 NeuN 共表達(dá)標(biāo)尺=100 μm 和 50 μm圖 3 結(jié)果顯示：在脊髓后角很少見 BRD4（綠色熒光）陽(yáng)性產(chǎn)物與星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物 GFAP（紅色熒光）的共存，并且與小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物 Iba-1（紅色熒光）共定位表達(dá)也難以見到。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 朱忠寧,董六一,陳志武,宋必衛(wèi);小鼠鞘內(nèi)注射吲哚美辛的鎮(zhèn)痛作用與5-羥色胺的關(guān)系[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2001年02期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 王永輝;BRD4對(duì)人胰腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為及其化療敏感性影響的初步研究[D];東南大學(xué);2016年

2 高雪梅;BRD4相關(guān)的甲狀腺癌分子機(jī)制研究及微小乳頭狀甲狀腺癌患者臨床轉(zhuǎn)歸分析[D];華中科技大學(xué);2016年

本文編號(hào)：2775368