【摘要】：[目的]:檢測BRD4在小鼠脊髓中的表達及細胞定位,通過福爾馬林疼痛模型,探討B(tài)RD4在急性炎性疼痛中的作用。[方法]:36只健康雌性昆明小鼠隨機分為3組,分別是正常對照組(control)、福爾馬林組(FM)、福爾馬林+吲哚美辛組(FM+Indo),每組12只。于小鼠右側后肢足底皮下分別注射無菌生理鹽水(control)或1%福爾馬林溶液25μl(FM,FM+Indo),FM+Indo在小鼠皮下注射福爾馬林溶液前1小時,給予腹腔注射吲哚美辛(20 mg/kg);福爾馬林或生理鹽水注射后立即觀察小鼠的自發(fā)疼痛行為。運用免疫熒光雙標方法確定BRD4在小鼠脊髓的細胞定位;免疫組織化學方法和Western blot檢測各組小鼠雙側脊髓BRD4的表達。[結果]:(1)BRD4在小鼠脊髓中的表達及細胞定位免疫組織化學方法檢測結果顯示:BRD4陽性信號廣泛分布于小鼠脊髓的各個區(qū)域,主要分布于后角淺層,左右兩側表達大致相同。免疫熒光雙標方法檢測了BRD4與神經元的標記物Neu N、星形膠質細胞標記物GFAP和小膠質細胞標記物Iba-1的共表達情況,結果顯示BRD4主要分布于小鼠脊髓后角淺層,與神經元標記物Neu N存在共表達情況,但與星形膠質細胞標記物GFAP和小膠質細胞標記物Iba-1共定位表達較少,提示BRD4在小鼠脊髓后角淺層主要定位于神經元。(2)BRD4在福爾馬林疼痛模型小鼠脊髓中的表達變化行為學結果顯示:與正常對照組相比,福爾馬林組小鼠組小鼠表現出明顯的雙相痛行為,而吲哚美辛預處理可減輕福爾馬林誘導的第二相疼痛。免疫組織化學結果顯示:與正常對照組相比,福爾馬林組雙側脊髓后角淺層BRD4表達上調(P0.05);與福爾馬林組相比,福爾馬林+吲哚美辛組較福爾馬林組小鼠雙側脊髓后角淺層BRD4表達顯著下調(P0.05)。Western blot結果顯示:與正常對照組相比,福爾馬林組雙側脊髓BRD4蛋白表達上調(P0.05);與福爾馬林組相比,福爾馬林+吲哚美辛組較福爾馬林組小鼠雙側脊髓BRD4蛋白表達顯著下調(P0.05)。[結論]:小鼠脊髓后角淺層BRD4的表達變化可能參與了急性炎性疼痛的調節(jié)。
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R402
【圖文】：

南華大學碩士學位論文第 3 章 實驗結果3.1 BRD4 在小鼠脊髓中的表達我們用免疫組織化學組織化學法檢測 BRD4 在小鼠脊髓中的表達（如圖 1）。實驗結果顯示：BRD4 陽性信號廣泛分布于脊髓的各個區(qū)域，主要分布在脊髓后角淺層，且左右兩側表達大致相同。結果表明：BRD4 主要分布于小鼠脊髓后角淺層，提示它的分布可能與其淺層功能有關。

圖 2 脊髓后角神經元 BRD4 與 NeuN 共表達情況綠色熒光：BRD4， 紅色熒光：神經元的標記物 NeuN， 黃色熒光：BRD4 與 NeuN 共表達標尺=100 μm 和 50 μm圖 3 結果顯示：在脊髓后角很少見 BRD4（綠色熒光）陽性產物與星形膠質細胞標記物 GFAP（紅色熒光）的共存，并且與小膠質細胞標記物 Iba-1（紅色熒光）共定位表達也難以見到。

第 3 章 實驗結果圖 2 脊髓后角神經元 BRD4 與 NeuN 共表達情況綠色熒光：BRD4， 紅色熒光：神經元的標記物 NeuN， 黃色熒光：BRD4 與 NeuN 共表達標尺=100 μm 和 50 μm圖 3 結果顯示：在脊髓后角很少見 BRD4（綠色熒光）陽性產物與星形膠質細胞標記物 GFAP（紅色熒光）的共存，并且與小膠質細胞標記物 Iba-1（紅色熒光）共定位表達也難以見到。

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 朱忠寧,董六一,陳志武,宋必衛(wèi);小鼠鞘內注射吲哚美辛的鎮(zhèn)痛作用與5-羥色胺的關系[J];中國藥理學通報;2001年02期

相關博士學位論文 前2條

1 王永輝;BRD4對人胰腺癌細胞生物學行為及其化療敏感性影響的初步研究[D];東南大學;2016年

2 高雪梅;BRD4相關的甲狀腺癌分子機制研究及微小乳頭狀甲狀腺癌患者臨床轉歸分析[D];華中科技大學;2016年

本文編號：2775368