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皮膚結核的臨床病理分析及實時熒光定量PCR檢測

發(fā)布時間:2020-07-28 16:52
【摘要】:研究背景:皮膚結核(Cutaneous Tuberculosis,CTB)是一種慢性感染性皮膚病,臨床和病理表現(xiàn)多樣,皮損中含菌量少,診斷困難。實時熒光定量聚合酶鏈反應(Real time fluorescence quantitative PCR,qPCR)在結核的診斷中特異性達100%,應用于CTB新鮮組織結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的檢測中敏感性為24.5%-33.3%。但CTB患者初診時往往會因臨床表現(xiàn)不典型,未留取新鮮組織用于qPCR檢測,而二次取材患者依從性差、亦增加患者負擔,因而對石蠟包埋組織中的MTB檢測尤為重要。既往研究已證實qPCR可應用于系統(tǒng)結核石蠟包埋組織病原菌的檢測,敏感性為62.5%-74.6%。關于結核疹中是否存在MTB存在爭議,有人認為結核疹是皮膚對血源性傳播的細菌或細菌成分的免疫反應,皮膚活檢中幾乎見不到細菌,亦有報道應用PCR技術在硬紅斑及丘疹壞死性結核疹皮損中檢測到MTB。研究目的:對我院2012年1月-2018年3月確診的CTB及結核疹病例,總結其臨床和病理資料,結合文獻嘗試對其臨床和病理特點進行分析,提高對CTB及結核疹的認識;采用qPCR技術檢測CTB新鮮組織及石蠟包埋組織中的MTB,初步比較在兩種組織中檢測的敏感性,以探討在CTB石蠟包埋組織中開展MTB檢測的可行性;并應用qPCR技術檢測結核疹中的MTB,進一步探討結核疹中是否存在MTB。研究方法:收集山東省皮膚病醫(yī)院病理科2012年1月-2018年3月初步診斷或疑診CTB及結核疹的病例;仡櫺苑治龃_診病例的一般資料、臨床表現(xiàn)、組織病理、結核相關的輔助檢查、誤診情況;對確診CTB及結核疹病例的全部石蠟包埋組織以及部分新鮮組織提取DNA,應用達安基因公司的結核分枝桿菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光法,Cat.#DA-052)進行檢測MTB,操作在AB 7500熒光定量PCR系統(tǒng)(美國應用生物系統(tǒng)公司)上進行。研究結果:確診CTB 20例,包括尋常狼瘡(Lupus vulgaris,LV)11例和疣狀皮膚結核(Tuberculosis verrucosa cutis,TVC)9例。確診為結核疹16例,包括硬紅斑(Erythema induratum of Bazin,EIB)15例,丘疹壞死性結核疹(Papulonecrotic tuberculid,PNT)1例。其中CTB留取新鮮組織6例,結核疹留取新鮮組織1例。結核性肉芽腫見于36.4%的LV,22.2%的TVC,6.7%的EIB。CTB新鮮組織樣本qPCR敏感性為50%,石蠟包埋組織樣本qPCR敏感性為35%。結核疹的新鮮組織及石蠟包埋組織均未檢測出MTB。研究結論:CTB臨床表現(xiàn)多樣,誤診率、延遲診斷比例高。30%的病例可依靠組織病理確定診斷,70%的病例組織病理可提示診斷。qPCR技術可應用于CTB新鮮組織及石蠟包埋組織中MTB的檢測,較之抗酸染色等傳統(tǒng)技術,qPCR敏感性、特異性更高,可輔助CTB的早期確診。在臨床工作中,如初診考慮到CTB的診斷,建議病理取材時一并留取新鮮組織進行qPCR檢測;如臨床表現(xiàn)不典型,在病理提示CTB診斷可能性時,利用石蠟包埋組織開展qPCR檢測也是協(xié)助病原學診斷的一種重要方式。結核疹可能為皮膚對血源性傳播的細菌或細菌成分的免疫反應,皮損中并無MTB。
【學位授予單位】:濟南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:R529.4;R440
【圖文】:

結節(jié),斑塊,疣狀增生,臨床表現(xiàn)


圖 1 CTB 的臨床表現(xiàn) LV 皮損:a、b:右面部、左肘窩暗紅色斑塊,表面高低不平;c:左手結節(jié);TVC 皮損:d:臀部的疣狀增生性斑塊;EIB 皮損:e:右下肢的結節(jié),表面破潰結痂

抗酸染色,上皮樣細胞肉芽腫,結核結節(jié),脂肪層


19圖 2 CTB 的病理表現(xiàn) a:真皮內見大小不等的上皮樣細胞肉芽腫,周圍見淋巴細胞浸潤;(HE xb:結核結節(jié)內內見干酪樣壞死(HE x100);c:脂肪層內血管壁纖維蛋白樣變性,周圍組織細淋巴細胞浸潤(HE x400);d:多核巨細胞內見 2 條抗酸菌,箭頭所示(抗酸染色 x1000)3.5.2 抗酸染色20 例 CTB 均行抗酸染色,3 例見抗酸菌(圖 2d)。其中 1 例 LV,2 例 TVC;結核疹病例均行抗酸染色,均為陰性。

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