發(fā)布時間：2020-07-24 01:58

【摘要】：目的:1.研究山西太原地區(qū)淋球菌臨床分離株對頭孢曲松、頭孢克肟、阿奇霉素、環(huán)丙沙星、大觀霉素、四環(huán)素、青霉素七種藥物的敏感性;2.采用NG-MAST初步探索山西太原地區(qū)淋球菌的基因型,把握本地區(qū)淋球菌不同基因型的流行狀況,為疾病防控提供理論依據(jù)。3.分析山西太原地區(qū)淋球菌頭孢菌素敏感性改變和耐藥基因mtrR和porB1b的關(guān)系。方法:1.收集2017年9月-2018年12月間,山西醫(yī)科大學第二醫(yī)院皮膚科、泌尿外科、藥敏室、山西疾病預(yù)防控制中心的淋球菌61株,用瓊脂稀釋法檢測頭孢曲松、頭孢克肟、阿奇霉素、環(huán)丙沙星、大觀霉素、四環(huán)素、青霉素七種藥物的藥敏。2.提取其DNA,對por和tbpB基因片段進行擴增并測序,并在NG-MAST官網(wǎng)中分析每株菌的por和tbpB對應(yīng)的等位基因號,以及NG-MAST基因序列,用MegaX軟件對por和tbpB基因序列做進化樹,用Bootstrap法對進化樹的可靠性進行檢驗,分析序列的同源性。3.對藥敏中的頭孢曲松和頭孢克肟低敏和耐藥的菌株和其中一株敏感的菌株的DNA進行提取,擴增mtrR和porB1b基因片段并測序,對比分析其潛在突變。結(jié)果:1.頭孢曲松、頭孢克肟、阿奇霉素、四環(huán)素、大觀霉素、環(huán)丙沙星、青霉素的耐藥率分別為0、0、4.92%、34.43%,9.8%,100%,100%。2.(1)61株淋球菌經(jīng)測序分析,por一共得到44種等位基因,其中基因型por1132,por2001,por6993,por581是山西地區(qū)por的優(yōu)勢基因型。(2)tbpB一共得到26種等位基因型,其中tbpB4,tbpB186,tbpB1058,tbpB566是山西地區(qū)的優(yōu)勢菌型。(3)一共發(fā)現(xiàn)49種NG-MAST基因分型,其中新的基因型別有21種一共22株,而NG-MAST3305、NG-MAST2083是山西地區(qū)流行的MAST基因型。3.(1)9株低敏株中都發(fā)現(xiàn)了mtrR啟動子位置的33位A的刪失,A39T、G45D、H105Y氨基酸置換在低敏株中不完全發(fā)現(xiàn),而敏感株中沒有發(fā)現(xiàn)此突變。(2)9株低敏株和低敏株的porB1b氨基酸序列中全存在M18T、Q143K、S258R的置換,而A121D、A121G以及G120K只在低敏株中發(fā)現(xiàn),在215位點所有菌株都存在置換。結(jié)論:1.四環(huán)素、大觀霉素、環(huán)丙沙星、青霉素已不再適合山西地區(qū)淋球菌治療,而頭孢曲松、頭孢克肟和阿奇霉素仍可用于山西太原地區(qū)淋球菌的治療。2.(1)por等位基因號90、5692、1123可能為短鏈上同一來源基因型。(2)淋球菌的tbpB的進化圖可以發(fā)現(xiàn)tbpB4、1601、446、75、447、156、1058的親緣關(guān)系比較近,它們可能是短鏈上來源相同的基因型。(3)山西太原淋球菌新的基因型別較多,山西地區(qū)的淋球菌基因分型需要持久的監(jiān)測。3.(1)mtrR啟動子區(qū)第33位A的缺失與淋球菌藥物敏感性降低可能有關(guān),而A39T、G45D以及H105Y氨基酸的置換與淋球菌藥物敏感性降低可能沒有關(guān)系;(2)porB1b第120、121位點氨基酸序列突變可能影響淋球菌對頭孢菌素的藥物敏感性。
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R446.5;R759.2
【圖文】：

1株菌por（650bp）凝膠電泳圖

18圖 2-2 61 株菌 tbpB（550bp）凝膠電泳圖：第一條泳道為 maker（M），最后一空為陰性對照（Y），序號依次為 1-61pB、por 等位基因以及 NG-MAST 基因分型分布圖（表 2.2）基因（個數(shù)） por 等位基因（個數(shù)） 對應(yīng)的 NG-MAST 基因分型（個4、1132（3）、1053、5924（2）、6176、7438、6485225、2083（3）、2318、1009110569、12778、New15 543、182、833（2）、6967、6986、1389、21831791、2051、4007（2）、11811931、New6、New7 2978（2）、7586（2）、6993、7910、105455061（2）、13051（2）、NewNew20、New4

圖 2-1-1 mtrR 基因片段凝膠電泳圖左到右依次為 maker、2、10、17、21、42、48、53、57、61、敏感株 38 號、B 標空白對照（Y）。porB1b（1000bp）基因片段凝膠電泳圖（圖 2-2-2）

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3 陳慧Y

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