【摘要】：目的:自體動(dòng)靜脈內(nèi)瘺(arteriovenous fistula,AVF)作為透析患者的血管通路已有50余年的歷史。它具有低感染率和其他并發(fā)癥低發(fā)的優(yōu)勢(shì),是維持性血液透析患者首選的血管通路。但是,AVF的1年通暢率約為60%。AVF的失功嚴(yán)重影響了血液透析患者的透析質(zhì)量,同時(shí)也是維持性血液透析患者首要的住院原因。內(nèi)膜增生導(dǎo)致的非血栓性管腔狹窄是動(dòng)靜脈內(nèi)瘺失功的主要原因。AVF內(nèi)膜增生的病理特點(diǎn)是炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)、平滑肌細(xì)胞的遷移、細(xì)胞外基質(zhì)的積聚。目前的研究認(rèn)為炎癥反應(yīng)、毒素聚集、缺氧和血管剪切力的改變是動(dòng)靜脈內(nèi)瘺內(nèi)膜增生的基本病理機(jī)制。其中缺氧誘導(dǎo)的病理反應(yīng)是血管重塑的重要機(jī)制。由于內(nèi)膜的增厚會(huì)增加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)彌散的距離,加上增生細(xì)胞導(dǎo)致代謝所需能量的增,內(nèi)膜的增生必然會(huì)引起管壁中氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的缺乏。缺氧狀態(tài)通常會(huì)引起組織中血管的新生。關(guān)于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的研究中發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)膜的增生及斑塊的形成均伴有血管壁滋養(yǎng)血管的增生,這些增生的滋養(yǎng)血管可以為增厚的管壁提供氧氣及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。目前的研究認(rèn)為滋養(yǎng)血管參與了動(dòng)脈粥樣硬化的病理過(guò)程。內(nèi)膜增生是動(dòng)靜脈內(nèi)瘺狹窄和動(dòng)脈粥樣硬化疾病的共同病理特點(diǎn)。這提示滋養(yǎng)血管也可能參與了人體動(dòng)靜脈內(nèi)瘺內(nèi)膜增生的形成過(guò)程。本實(shí)驗(yàn)的目的為通過(guò)觀察滋養(yǎng)血管在人體狹窄動(dòng)靜脈內(nèi)瘺中的表達(dá)情況,探索滋養(yǎng)血管在動(dòng)靜脈內(nèi)瘺內(nèi)膜增生中的作用,為動(dòng)靜脈內(nèi)瘺狹窄的治療提供理論依據(jù)。方法:1.試驗(yàn)分為試驗(yàn)組、對(duì)照組A(自身對(duì)照組)和對(duì)照組B。試驗(yàn)組標(biāo)本:透析患者行AVF重建術(shù)時(shí)所取得的管腔明顯狹窄的廢棄靜脈段,10例。對(duì)照組A標(biāo)本:實(shí)驗(yàn)組患者行AVF重建術(shù)時(shí)根據(jù)手術(shù)需要取得的廢棄的鄰近狹窄部位且無(wú)明顯狹窄的靜脈組織片段,10例。對(duì)照組B標(biāo)本:初次行AVF成形術(shù)時(shí)結(jié)扎較粗的頭靜脈分支時(shí)所取得的廢棄靜脈段,10例。2.數(shù)據(jù)收集:各組標(biāo)本分別進(jìn)行HE染色觀察血管管壁的結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)變化,應(yīng)用Image profession plus6.0圖像處理軟件對(duì)內(nèi)膜增生情況進(jìn)行評(píng)估。應(yīng)用血管性血友病因子(Von Willebrand factor,vWF)免疫組織化學(xué)染色技術(shù)顯示管壁中的微血管(滋養(yǎng)血管),對(duì)血管壁中的微血管進(jìn)行定量分析,以微血管密度(Microvascular density,MVD)評(píng)估所觀察區(qū)域滋養(yǎng)血管的增生程度。應(yīng)用血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-A(Vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)免疫組織化學(xué)染色技術(shù)觀察各組標(biāo)本中VEGF-A的表達(dá)情況。3.統(tǒng)計(jì)方法:實(shí)驗(yàn)中收集的數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x?s)表示,應(yīng)用t檢驗(yàn)比較組間數(shù)據(jù)的差異,應(yīng)用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,P0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.HE染色光學(xué)顯微鏡下觀察試驗(yàn)組中的靜脈內(nèi)膜存在明顯的增厚,呈不均勻增厚,有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。對(duì)照組A的內(nèi)膜呈均勻、輕度增厚,對(duì)照組B的靜脈內(nèi)膜未見(jiàn)明顯增生,無(wú)炎細(xì)胞浸潤(rùn)。對(duì)實(shí)驗(yàn)組及兩對(duì)照組的內(nèi)膜/中膜厚度比進(jìn)行測(cè)量、比較,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組的內(nèi)膜/中膜厚度比明顯高于對(duì)照組A和對(duì)照組B,且對(duì)照組A明顯高于對(duì)照組B,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2.683±0.356 vs.0.686±0.059,P0.01;2.683±0.356 vs.0.123±0.024;P0.01;0.686±0.059 vs.0.123±0.024,P0.01)。2.vWF免疫組織化學(xué)染色高倍光學(xué)顯微鏡下觀察vWF染色,著色部位位于血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿中,陽(yáng)性染色部位主要位于血管外膜,沿微血管的管腔分布。在400x高倍鏡下觀察三組血管外膜視野中微血管的數(shù)量,計(jì)算微血管的密度。結(jié)果顯示試驗(yàn)組中血管壁外膜的MVD明顯高于對(duì)照組A和對(duì)照組B,對(duì)照組A與對(duì)照組B相比無(wú)明顯差異(15.923±4.924 vs.6.879±1.821,P0.01;15.923±4.924 vs.4.586±1.611,P0.01;6.879±1.821 vs.4.586±1.611,P0.05)。3.VEGF-A免疫組織化學(xué)染色VEGF-A表達(dá)主要位于細(xì)胞的胞漿中,管壁各層均可見(jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。在試驗(yàn)組中VEGF-A的表達(dá)呈強(qiáng)陽(yáng)性,在對(duì)照組A及對(duì)照組B中VEGF-A的表達(dá)呈弱陽(yáng)性。結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組VEGF-A的表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組A和對(duì)照組B,兩對(duì)照組間比較無(wú)明顯差異(0.119±0.438 vs.0.049±0.176,P0.01;0.119±0.438 vs.0.039±0.011,P0.01;0.049±0.176 vs.0.039±0.011,P0.05)。4.相關(guān)性分析Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示在狹窄的AVF中血管外膜的微血管密度與內(nèi)膜/中膜的厚度比呈極強(qiáng)相關(guān)性(r=0.830,P0.01),同時(shí)VEGF-A表達(dá)與血管外膜滋養(yǎng)血管的表達(dá)呈強(qiáng)相關(guān)性(r=0.768,P0.01)。結(jié)論:1.滋養(yǎng)血管在自體動(dòng)靜脈內(nèi)瘺狹窄部位血管外膜的表達(dá)增多。2.VEGF-A在自體動(dòng)靜脈內(nèi)瘺狹窄部位組織中存在高表達(dá),且其可能與滋養(yǎng)血管的增生相關(guān)。3.滋養(yǎng)血管可能與自體動(dòng)靜脈內(nèi)瘺非血栓性管腔狹窄的形成相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R459.5
【圖文】：

實(shí)驗(yàn)組-HE染色（100X）

對(duì)照組A-HE染色（100X）

圖 1.3 對(duì)照組 B-HE 染色（100X）Fig.1.3 HE staining in control group B (100X)平滑肌細(xì)胞炎性細(xì)胞空泡變性

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本文編號(hào)：2757836