發(fā)布時(shí)間：2020-06-26 12:53

【摘要】：目的遺傳代謝病是一類種類繁多、臨床難以診斷、且危害極大的疾病。在新生兒期利用串聯(lián)質(zhì)譜法(MS)高通量的優(yōu)勢(shì),實(shí)現(xiàn)一種實(shí)驗(yàn)檢測(cè)多種疾病,是遺傳代謝病防治的重要手段。本研究采用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行新生兒遺傳代謝病篩查,采用新一代測(cè)序技術(shù)(NGS)作為后續(xù)方法,以明確患兒的基因診斷,探討NGS+MS聯(lián)合應(yīng)用在遺傳代謝病篩查與診斷中的臨床價(jià)值,闡明本地區(qū)新生兒遺傳代謝病發(fā)病特點(diǎn)及致病基因遺傳特征,并初步探討干擾因素對(duì)新生兒遺傳代謝病篩查與診斷的影響,以提高質(zhì)量控制。方法1.以2015年4月至2018年5月在常州市婦幼保健院出生的活產(chǎn)50844例新生兒為研究對(duì)象,按照所建立了新生兒遺傳代謝病篩查與診斷流程進(jìn)行研究。利用非衍生化法串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù),檢測(cè)干血片樣本中11種氨基酸、31種�；鈮A指標(biāo)以及琥珀酰丙酮的含量,以實(shí)現(xiàn)27種遺傳代謝病的篩查。2.采用靶向目標(biāo)基因測(cè)序技術(shù),基因包含有306個(gè)基因可檢測(cè)286種疾病,對(duì)可疑陽性患兒進(jìn)行基因診斷,采用Sanger法測(cè)序技術(shù)進(jìn)行致病基因突變位點(diǎn)驗(yàn)證以及明確父母遺傳方式的研究。3.深入分析臨床數(shù)據(jù),重點(diǎn)觀察初篩陽性率、篩查陽性率、召回陽性率、陽性預(yù)測(cè)值四個(gè)核心質(zhì)控指標(biāo),初步探討干擾因素(性別、分娩方式、城鄉(xiāng)區(qū)域、季節(jié)、新生兒體重)對(duì)核心質(zhì)控指標(biāo)的影響,探討新生兒遺傳代謝病質(zhì)量優(yōu)化的方法。結(jié)果1.50844例新生兒中,經(jīng)原血片復(fù)查發(fā)現(xiàn)650例陽性,其中595例成功召回并重新采樣,經(jīng)串聯(lián)質(zhì)譜復(fù)查54例仍為陽性。根據(jù)可疑陽性病種的不同,可疑患兒接受了不同的鑒別診斷和基因診斷,最終確診19例患兒為遺傳代謝病,共涉及11種遺傳代謝病,。其中氨基酸類疾病7例,包括4例苯丙酮尿癥(PKU)、1例瓜氨酸血癥Ι(CTLNΙ)、1例高甲硫氨酸血癥(MIM)、1例希特林蛋白缺乏癥(citrin deficiency);有機(jī)酸類疾病7例,包括戊二酸血癥Ι型(GA-Ι)3例、3-甲基巴豆酰輔酶A羧化酶缺乏癥(MCCD)與甲基丙二酸血癥(MMA)各2例;脂肪酸類疾病5例,包括2例短鏈酰基輔酶A脫氫酶缺乏癥(SCADD)、1例原發(fā)性肉堿吸收障礙(PCD)、1例中鏈�；o酶A脫氫酶缺乏癥(MCAD)和1例β-酮硫酶缺乏癥(β-ketothiolase deiciercy)。確診病例均建立了隨訪治療檔案,按《臨床遺傳代謝病》進(jìn)行對(duì)癥治療。2.本研究基因檢測(cè)共涉及10個(gè)病種,分別為3種氨基酸類疾病,3種有機(jī)酸類疾病,4種脂肪酸代謝類疾病,均為常染色體隱性遺傳病。15例自愿接受NGS基因診斷的患兒均發(fā)現(xiàn)疾病致病基因攜帶兩個(gè)位點(diǎn)的突變且均為雜合突變,經(jīng)數(shù)據(jù)庫查詢,檢測(cè)出29個(gè)致病變異,1個(gè)為臨床意義未明突變,致病變異檢出率為96.7%。經(jīng)家系突變驗(yàn)證表明突變分別來源于其父親和母親。3.經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,季節(jié)、新生體重對(duì)核心質(zhì)控指標(biāo)有影響,尤其是脂肪酸代謝類疾病(p0.05),而性別、分娩方式、城鄉(xiāng)區(qū)域影響不大(p0.05)。結(jié)論1.本地區(qū)新生兒遺傳代謝病總體發(fā)病率是1/2676,略高于其他地區(qū)的報(bào)道,值得關(guān)注。2.NGS技術(shù)在遺傳代謝病的應(yīng)用有助于揭示疾病的遺傳特征,明確致病基因突變位點(diǎn);Sanger測(cè)序技術(shù)有助于明確其遺傳方式。兩者聯(lián)合應(yīng)用有助于建立本地區(qū)遺傳代謝病致病基因突變頻譜。3.新生兒遺傳代謝病串聯(lián)質(zhì)譜篩查質(zhì)量控制指標(biāo)可能與新生兒出生體重、季節(jié)有關(guān),而與性別、分娩方式等無關(guān),排除干擾因素有助于優(yōu)化質(zhì)量控制。
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R722.1;R440
【圖文】：

技術(shù)路線圖

新生兒遺傳代謝病篩查與診斷流程圖

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2730338