【摘要】：基因治療是用健康的基因替換缺陷基因的過程,添加新的基因來幫助身體對抗或治療疾病或使有問題的基因失活。因此它在治療與遺傳疾病和癌癥等基因有關(guān)的主要疾病方面具有很大的優(yōu)勢。在基因治療中,基因載體的作用是將目的基因運輸?shù)剿拗骷毎?因此研發(fā)出一種既具有高轉(zhuǎn)染效率,并且其細胞毒性低的非病毒載體是非常有必要的。本論文的著重點集中在碳納米管/Fe_3O_4/聚乙烯亞胺基因載體。在第一章中,簡述了基因載體的發(fā)展近況。概括了聚乙烯亞胺被用作非病毒載體的優(yōu)勢,碳納米管在基因傳遞系統(tǒng)中的應(yīng)用,以及Fe_3O_4納米粒子在靶向治療、診斷中的應(yīng)用。在第二章中,用共沉淀法制備了羧基化CNTs/Fe_3O_4磁性納米粒子,再將雙硫鍵連接的聚乙烯亞胺(SSPEI)接枝到CNTs/Fe_3O_4表面,獲得到了生物相容性較好的CNTs-Fe_3O_4 SSPEI磁性納米粒子。測試了CNTs-Fe_3O_4-SSPEI納米粒子的粒徑和ζ電位,考察了CNTs-Fe_3O_4-SSPEI/DNA納米粒子介導(dǎo)的pGLuc-3質(zhì)粒對COS-7細胞和HeLa細胞的基因轉(zhuǎn)染效率和細胞存活率。用熒光倒置顯微鏡觀測了轉(zhuǎn)染48h后的COS-7細胞中1.8KDa PEI、25KDa PEI及CNTs-Fe_3O_4--SSPEI/DNA不同納米粒子介導(dǎo)的pEGFP-C1表達熒光蛋白結(jié)果。結(jié)果表明,與商用25KDa PEI相比,CNTs-Fe_3O_4-SSPEI納米粒子有較低的細胞毒性,其基因轉(zhuǎn)染效率與25KDa PEI/DNA相當(dāng)。通過有無外加磁場的作用下的對比,在外加磁場作用下,CNTs-Fe_3O_4-SSPEI納米粒子的基因轉(zhuǎn)染效率高于沒有外加磁場的基因轉(zhuǎn)染效率。在第三章中,通過在羧基化碳納米管Fe_3O_4磁性納米粒子表面上接枝酯鍵交聯(lián)的聚乙烯亞胺(HDDAPEI),制備得到了生物相容性良好的CNTs-Fe_3O_4 HDDA-PEI磁性納米粒子。測量了CNTs-Fe_3O_4-HDDAPEI/DNA納米粒子的粒徑和ζ電位,考察了CNTs-Fe_3O_4-HDDAPEI/DNA納米粒子介導(dǎo)的pGLuc-3質(zhì)粒對COS-7細胞和HeLa細胞的基因轉(zhuǎn)染效率和細胞存活率。用熒光倒置顯微鏡觀測了轉(zhuǎn)染48h后的COS-7細胞中1.8KDa PEI、25KDa PEI及CNTs-Fe3O4-HDDAPEI/DNA不同納米粒子介導(dǎo)的pEGFP-C1表達熒光蛋白結(jié)果。結(jié)果表明,與商用25KDa PEI相比,CNTs-Fe_3O_4-HDDAPEI納米粒子有較低的細胞毒性,其基因轉(zhuǎn)染效率與25KDa PEI/DNA基本接近。通過有無外加磁場的作用下的對比,外加磁場作用下的CNTs-Fe_3O_4-HDDAPEI納米粒子的基因轉(zhuǎn)染效率比沒有外加磁場作用的高。
【圖文】：

51igure 3-9．Size of CNTs-Fe3O4-HDDAPEI/DNA complexes with differet ratios(a). Zeta potential of CNTs-Fe3O4-HDDAPEI/DNA complexes widifferent weight ratios(b)圖 3-9a 可以看出，在 w/w 從 0.5 到 8 的范圍內(nèi)，CNTs-Fe3PEI/DNA 納米粒子的粒徑在 300-400nm。從圖 3-9b 可以看
【學(xué)位授予單位】：武漢工程大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：O613.71;TB383.1;R450

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王冬梅;曹金麗;張怡;張彥昌;殷園園;李天N，

本文編號：2694022