【摘要】：背景Spexin(SPX)又稱神經(jīng)肽Q,是一種新發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性神經(jīng)肽。人Spexin前原肽由基因組12號(hào)染色體上C12orf29基因編碼。Spexin的氨基酸序列在脊椎動(dòng)物中高度保守,Spexin基因和蛋白在人及嚙齒類動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周組織中廣泛表達(dá)。Spexin參與調(diào)節(jié)多種生理功能,包括攝食、胃腸運(yùn)動(dòng)、能量代謝、葡萄糖及脂質(zhì)代謝等。Spexin免疫陽性細(xì)胞在嚙齒動(dòng)物的腦干,三叉神經(jīng)節(jié)和大腦皮層等與疼痛信號(hào)傳遞密切相關(guān)的區(qū)域有分布,這表明Spexin可能與疼痛有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)通過應(yīng)用福爾馬林誘導(dǎo)的急性炎癥痛和乙酸誘導(dǎo)的內(nèi)臟痛兩種模型,采用行為學(xué)檢測、qRT-PCR、Western blot、免疫組織化學(xué)等實(shí)驗(yàn)方法研究Spexin在急性痛模型中的鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制。福爾馬林致痛模型可模擬人類損傷后疼痛的某些特征,具有很好的重復(fù)性,被廣泛應(yīng)用于疼痛機(jī)制的研究。乙酸誘導(dǎo)的內(nèi)臟痛是研究中樞和外周疼痛的常用模型。目的探討Spexin對小鼠痛覺的影響。方法(1)采用福爾馬林炎癥痛小鼠模型,通過側(cè)腦室注射Spexin、Galr2、Galr3、KOR和MOR拮抗劑,檢測小鼠的痛覺行為;(2)側(cè)腦室注射Spexin或拮抗劑后,取腦組織,提mRNA,反轉(zhuǎn)錄得到cDNA,用qPCR檢測Galr2、Galr3、Adcy1-9、Pomc、Penk、Pdyn、Oprm1、Oprd1、Oprk1、c-Fos、Jun和Egr1 mRNA水平;(3)Spexin注射后,取腦組織,提蛋白,用Western blot檢測KOR的表達(dá)水平;(4)Spexin注射后,灌注,固定,組織包埋,切片,免疫組織化學(xué)檢測中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)區(qū)(PAG)內(nèi)c-Fos陽性細(xì)胞數(shù)目;(5)在乙酸誘導(dǎo)的內(nèi)臟痛小鼠模型中,檢測側(cè)腦室注射Spexin(0.081-2.43 mg/kg)對小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)的影響,qRT-PCR檢測腦組織Galr2、Galr3、Adcy1-9、Pomc、Penk、Pdyn、Oprm1、Oprd1、Oprk1、Gabra1-5、c-Fos、Jun、Egr1 mRNA水平。結(jié)果(1)在福爾馬林炎癥痛小鼠模型中,0.81 mg/kg和2.43 mg/kg Spexin可顯著縮短小鼠在第I時(shí)相第(早期時(shí)相,0-10 min)的舔/咬后爪時(shí)間,2.43 mg/kg Spexin顯著減少第II時(shí)相(晚期時(shí)相,10-30 min)舔/咬的時(shí)間,陽性對照甘丙肽GAL(0.32 mg/kg)在第I時(shí)相和第II時(shí)相均明顯縮短小鼠舔/咬后爪時(shí)間;(2)qRT-PCR結(jié)果顯示,側(cè)腦室注射Spexin能顯著提高Galr3及Galr3下游Adcy4mRNA水平,并且Galr3拮抗劑SNAP37889(0.018 mg/kg)能夠阻斷Spexin在福爾馬林炎癥痛模型中的鎮(zhèn)痛作用,說明Spexin的鎮(zhèn)痛作用是通過Galr3介導(dǎo)的;(3)阿片受體拮抗劑nor-BNI(73.47 mg/kg)能阻斷Spexin(2.43 mg/kg)的鎮(zhèn)痛反應(yīng);qRT-PCR結(jié)果顯示Spexin提高了Pdyn和Oprk1 mRNA水平,但不影響Pomc、Penk、Oprm1和Oprd1 mRNA水平;Western blot結(jié)果顯示Spexin顯著提高了KOR蛋白的表達(dá),這表明Spexin的鎮(zhèn)痛作用是通過Pdyn/KOR實(shí)現(xiàn)的;(4)Spexin顯著提高了小鼠腦組織c-Fos mRNA水平;c-Fos抑制劑T-5224(100mg/kg)能夠拮抗Spexin誘導(dǎo)的Pdyn和Oprk1 mRNA升高;免疫組織化學(xué)技術(shù)結(jié)果顯示Spexin(2.43 mg/kg)能顯著增加尾側(cè)(前囟-4.9 mm)PAG背內(nèi)側(cè)、端側(cè)和腹外側(cè)c-Fos陽性細(xì)胞個(gè)數(shù);表明Spexin的鎮(zhèn)痛作用與c-Fos有關(guān);(5)在乙酸誘導(dǎo)的內(nèi)臟痛模型中,Spexin能夠顯著減少小鼠扭體反應(yīng)次數(shù),qRT-PCR結(jié)果顯示Spexin提高Galr2、Adcy1、Pomc、Oprm1、c-Fos mRNA水平。結(jié)論1側(cè)腦室注射Spexin(0.81,2.43 mg/kg)在福爾馬林致小鼠急性炎癥痛模型中具有明顯鎮(zhèn)痛作用,該作用是通過Galr3/Adcy4/FOS/Pdyn/KOR路徑實(shí)現(xiàn)的;2中樞Spexin(0.81,2.43 mg/kg)在乙酸誘導(dǎo)的內(nèi)臟痛小鼠模型中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用,該作用與Galr2、Adcy1、c-Fos、Pomc、Oprm1基因有關(guān)。
【圖文】：

觀察30 min內(nèi)小鼠第I時(shí)相（0-10 min）和第II時(shí)相（10-30 min）舔/咬爪時(shí)間。在第I時(shí)相（圖3-1A），Spexin0.81 mg/kg和2.43 mg/kg可顯著縮短小鼠的舔/咬時(shí)間（P<0.01，P<0.001），低劑量組（Spexin 0.081 mg/kg）與對照組相比無明顯差異（P=0.80）。在第II時(shí)相（圖3-1B），與對照組比較，2.43 mg/kg的Spexin，小鼠的舔/咬時(shí)間顯著減少（P<0.05），，在0.081或0.81mg/kg劑量（0.081 mg/kg，P=0.97；0.81 mg/kg
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R402

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 丁濟(jì)飛;鄧云坤;;褪黑素在帶狀皰疹后神經(jīng)痛中的鎮(zhèn)痛作用及其可能機(jī)制[J];中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志;2015年06期

2 羅敬華;曾曉艷;范桂香;袁育康;王軍陽;;葛根素對神經(jīng)病理性痛模型小鼠的鎮(zhèn)痛作用[J];西北藥學(xué)雜志;2013年01期

3 張文華;江劍平;;阿片類物質(zhì)的外周鎮(zhèn)痛作用[J];福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年02期

4 高立新;;苦味西葫蘆水提物鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];臨床醫(yī)藥實(shí)踐;2009年17期

5 梁生林;溫定文;肖紅鈴;孟凡利;李正紅;余海紅;劉億婕;;地錦草煎劑對小鼠的鎮(zhèn)痛作用[J];中國醫(yī)院藥學(xué)雜志;2009年23期

6 姚婉霞;周俊俊;閆琳;金少舉;蔣袁絮;;氧化槐定堿鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制研究[J];中草藥;2008年04期

7 余靜;;辣椒素提取及鎮(zhèn)痛作用研究進(jìn)展[J];糧食與油脂;2008年08期

8 劉永平,佟繼銘;野罌粟堿鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制研究(英文)[J];中國臨床康復(fù);2005年24期

9 李曉麗,張少華,秦林,宋振華,毛淳,張勤生;川烏與防己配伍鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;2000年03期

10 徐龍河;異丙酚的鎮(zhèn)痛作用[J];國外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊;1999年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 王瑞曇;岳明;郭琦;張恩戶;;解表藥鎮(zhèn)痛作用的文獻(xiàn)再評(píng)價(jià)[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中藥實(shí)驗(yàn)藥理分會(huì)第八屆學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

2 林青;楊蓮;段小花;李秀芳;馬云淑;;克班寧的鎮(zhèn)痛作用機(jī)制探討[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中藥實(shí)驗(yàn)藥理分會(huì)第八屆學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

3 劉紅艷;王海燕;李云鴻;蔣袁絮;余建強(qiáng);;氧化苦參堿對神經(jīng)病理性疼痛的鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制[A];中國藥理學(xué)會(huì)第十一次全國學(xué)術(shù)會(huì)議�？痆C];2011年

4 周俊俊;蔣袁絮;金少舉;陶麗君;劉利軍;;甘珀酸鈉苦參素包合物鎮(zhèn)痛作用及部位研究[A];中國藥理學(xué)會(huì)第九次全國會(huì)員代表大會(huì)暨全國藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

5 楊麗;鄧揚(yáng)鷗;吳世星;呂曉強(qiáng);劉永剛;;苦參堿鎮(zhèn)痛作用及其阿片受體非相關(guān)性的研究[A];第四次中華中醫(yī)藥科技成果論壇論文集[C];2014年

6 張芬;祝慧鳳;薛莉君;羅偉;張茂蕓;;瓦松鎮(zhèn)痛作用研究[A];全國第3屆臨床中藥學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

7 呂曉強(qiáng);鄧揚(yáng)鷗;楊麗;侯平;姜靜;;氧化苦參堿鎮(zhèn)痛作用的研究[A];“新成果·新進(jìn)展·新突破”中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)2013年學(xué)術(shù)年會(huì)、第三次中華中醫(yī)藥科技成果論壇論文集[C];2013年

8 黃家詔;謝金鮮;黃顯文;李愛媛;梁紅;;虎威傷痛靈抗炎、消腫和鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究[A];仲景醫(yī)學(xué)求真（續(xù)一）——中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第十五屆仲景學(xué)說學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

9 宋靜靜;田野;趙敏;閆國棟;;復(fù)方鼠婦鎮(zhèn)痛作用的研究[A];泛環(huán)渤海地區(qū)九省市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)——2011年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2011年

10 周汝俊;周智;楊健;呂輝章;黃敬耀;陳漣如;;黃甲棒鎮(zhèn)痛作用研究[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)成立大會(huì)暨第六次全國口腔醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];1996年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 楊建;中藥冰片外用鎮(zhèn)痛作用機(jī)制獲證實(shí)[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2017年

2 記者 劉海英;撲熱息痛鎮(zhèn)痛作用機(jī)制被發(fā)現(xiàn)[N];科技日報(bào);2011年

3 吳勐；王銀葉；艾鐵民;紫金龍鎮(zhèn)痛作用與阿片受體無關(guān)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

4 瞿燕 秦旭華 潘曉麗;成都中醫(yī)藥大學(xué)研究表明:醋艾葉炭有止血鎮(zhèn)痛作用[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

5 何瑤;止痛消炎好及時(shí)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

6 何瑤;止痛降溫 安全有效[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

7 王子平;以充分公開換專利保護(hù)[N];中國知識(shí)產(chǎn)權(quán)報(bào);2001年

8 孫琳婧;“笑”里藏刀[N];中國醫(yī)藥報(bào);2018年

9 張揆一;介紹四種催人入眠的食物[N];家庭醫(yī)生報(bào);2008年

10 藍(lán)天;催眠不妨試一下食物[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 陳卉;治療PHN元全片的制備工藝及其鎮(zhèn)痛作用機(jī)制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年

2 郭平;中藥七情配伍的研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2004年

3 董英偉;辣椒辣素鎮(zhèn)痛作用及安全性的研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2003年

4 李元海;呱氨托美汀鎮(zhèn)痛和胃保護(hù)作用及其部分機(jī)制的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2004年

5 馮宇鵬;神經(jīng)降壓素在大鼠脊髓背角的鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 秦曉輝;胍丁胺對炎性疼痛的鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2005年

7 宋志揚(yáng);膽堿能系統(tǒng)參與SCS鎮(zhèn)痛作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2006年

8 李淑慧;N-乙酰-5-甲氧色胺的鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

9 樊惠;GLP-1受體非肽類激動(dòng)劑鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制的研究[D];上海交通大學(xué);2015年

10 林思芳;麻醉藥鎮(zhèn)痛作用機(jī)制的功能性磁共振成像研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張曉梅;Spexin對小鼠痛覺的影響及機(jī)制研究[D];河南大學(xué);2019年

2 羅雅范;外源性催產(chǎn)素在周圍神經(jīng)系統(tǒng)的鎮(zhèn)痛作用研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2018年

3 徐婷婷;氧化槐果堿的鎮(zhèn)痛作用及相關(guān)機(jī)制的研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2013年

4 李記爭;氧化苦參堿的鎮(zhèn)痛作用及其與GABA能神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)機(jī)制的研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2011年

5 周俊俊;甘珀酸鈉苦參素包合物鎮(zhèn)痛作用及相關(guān)機(jī)制的研究[D];寧夏醫(yī)學(xué)院;2008年

6 宋小平;映山紅總黃酮的鎮(zhèn)痛作用及其作用機(jī)理[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2006年

7 王利明;異丙酚的鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)理研究[D];蘇州大學(xué);2002年

8 丁曉蘭;中華眼鏡蛇毒不同劑型和給藥途徑的鎮(zhèn)痛作用研究[D];蘇州大學(xué);2013年

9 盛尊來;落新婦生藥學(xué)及其根鎮(zhèn)痛作用有效部位的研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2006年

10 于桂杰;骶管內(nèi)伍用新斯的明對嗎啡在小兒術(shù)后鎮(zhèn)痛作用的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2003年

本文編號(hào)：2691523