【摘要】：嗎啡(Morphine)是一種臨床上治療疼痛的藥物,長期的使用會(huì)產(chǎn)生藥物的耐受,最終導(dǎo)致成癮。嗎啡長期使用會(huì)導(dǎo)致相關(guān)腦區(qū)發(fā)生病理性的改變和相應(yīng)的病理性行為,例如覓藥、戒斷行及復(fù)吸行為。嗎啡成癮主要涉及前額葉皮層區(qū)(Prefrontal cortex,PFC),中腦腹側(cè)被蓋區(qū)(Ventral tegmental area,VTA),伏隔核區(qū)(Nucleus accumbens,NAc)和海馬區(qū)(Hippocampus,Hip)。嗎啡成癮可導(dǎo)致這些腦區(qū)多巴胺能神經(jīng),谷氨酸能神經(jīng)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABA)能神經(jīng)系統(tǒng)的改變。隨著環(huán)境的污染,電離輻射,酗酒,吸煙都會(huì)產(chǎn)生氧化應(yīng)激,硫氧還蛋白-1(Thioredoxin-1,Trx-1)是一個(gè)氧化還原調(diào)節(jié)蛋白具有多種生物功能。Trx-1能夠抵抗細(xì)胞凋亡,調(diào)節(jié)糖皮質(zhì)激素和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,以及免疫應(yīng)答反應(yīng)。而嗎啡嚴(yán)重危害人類健康,它的種植會(huì)導(dǎo)致水土的流失,嗎啡的提煉會(huì)導(dǎo)致河流污染,空氣污染,因此探究嗎啡成癮的機(jī)制對(duì)于人體健康也具有十分重要的意義。因此,我們可以利用硫氧還蛋白一1的還原活性來保護(hù)人體健康免受環(huán)境毒性物嗎啡成癮的作用。然而,Trx-1是否參與調(diào)節(jié)嗎啡成癮以及它的分子機(jī)制還不清楚。本研究的主要目的是探索Trx-1對(duì)嗎啡所導(dǎo)致的獎(jiǎng)賞效應(yīng)的調(diào)節(jié)作用以及Trx-1調(diào)節(jié)嗎啡成癮相關(guān)信號(hào)通路的分子機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:(1)Trx-1轉(zhuǎn)基因高表達(dá)小鼠抵抗嗎啡誘導(dǎo)的條件性位置偏好(Conditioned place preference,CPP)。本實(shí)驗(yàn)將野生型小鼠隨機(jī)分為兩組,分別是野生型生理鹽水組和野生型嗎啡組,將Trx-1轉(zhuǎn)基因高表達(dá)小鼠隨機(jī)分為兩組,分別是轉(zhuǎn)基因生理鹽水組和轉(zhuǎn)基因嗎啡組,通過使用小鼠位置偏好裝置和小動(dòng)物行為記錄儀檢測(cè)嗎啡給藥后小鼠的位置偏好。結(jié)果顯示:嗎啡誘導(dǎo)野生型小鼠CPP形成,而轉(zhuǎn)基因小鼠則沒有CPP形成。這些結(jié)果表明,Trx-1的高表達(dá)能夠抑制嗎啡誘導(dǎo)的CPP形成。在VTA、NAc、Hip及PFC區(qū)中嗎啡能夠誘導(dǎo)Trx-1的表達(dá)升高,而Trx-1轉(zhuǎn)基因小鼠抑制了 Trx-1的表達(dá)升高。(2)Trx-1對(duì)μ受體的調(diào)節(jié)作用。在小鼠CPP模型中,嗎啡降低野生型小鼠VTA區(qū)μ受體的表達(dá),而轉(zhuǎn)基因小鼠恢復(fù)了它的降低。免疫共沉淀的方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn),Trx-1和μ受體之間互相結(jié)合,二硫蘇糖醇或雙氧水可調(diào)節(jié)Trx-1與μ受體結(jié)合。(3)Trx-1對(duì)轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)節(jié)作用。在嗎啡CPP模型中,嗎啡誘導(dǎo)VTA及NAc中環(huán)磷酸腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB),△FosB 和細(xì)胞周期素依賴蛋白激酶5(Cyclin-dependentKinase5,CDK5)的表達(dá)升高,而在轉(zhuǎn)基因小鼠中Trx-1的高表達(dá)抑制了它們的表達(dá)升高,嗎啡降低核起始因子2(Eukaryotic Initiation Factor 2,eIF2α)的活性水平,并且轉(zhuǎn)基因小鼠恢復(fù)了它們的活性。在Hip區(qū),嗎啡誘導(dǎo)p-CREB與CDK5的表達(dá)升高,而在轉(zhuǎn)基因小鼠中抑制了它們的表達(dá)升高。在PFC區(qū),嗎啡誘導(dǎo)△FosB與CDK5的表達(dá)升高,而在轉(zhuǎn)基因小鼠中Trx-1的高表達(dá)抑制了它們的表達(dá)升高。(4)Trx-1對(duì)多巴胺能神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用。在嗎啡CPP模型,VTA和NAc區(qū)中多巴胺受體 1(Dopamine receptor 1,D1R),多巴胺受體 2(Dopamine receptor 2,D2R)和酪氨酸羥化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)的表達(dá)升高,而在轉(zhuǎn)基因小鼠中他們的表達(dá)不再升高。在Hip區(qū)與PFC區(qū)中D1R和TH的表達(dá)升高,而在轉(zhuǎn)基因小鼠中Trx-1的高表達(dá)抑制了他們的表達(dá)升高。(5)Trx-1對(duì)谷氨酸能神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用。在嗎啡CPP模型,VTA、NAc及Hip區(qū)中N-甲基-D-天冬氨酸受體(N-methyl-D-asparticacidreceptor)的亞單位 NR2B,α一氨基-3-羥基-5-甲基-4-異惡唑丙酸受體(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid receptor,AMPAR)的表達(dá)升高,并且轉(zhuǎn)基因小鼠中Trx-1的高表達(dá)抑制了它們的表達(dá)升高,而囊泡谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體3(Vesicular glutamate transport 3,VGLUT3)的表達(dá)降低,在轉(zhuǎn)基因小鼠中它的表達(dá)恢復(fù)。在PFC區(qū)中,NR2B的表達(dá)升高,而在轉(zhuǎn)基因小鼠中Trx-1的高表達(dá)抑制了它的表達(dá)升高。(6)在嗎啡CPP模型中,電鏡觀察發(fā)現(xiàn)嗎啡誘導(dǎo)野生型小鼠VTA區(qū)的突觸數(shù)目顯著增加,而且轉(zhuǎn)基因小鼠相比于野生型小鼠突觸數(shù)目也增加;然而,嗎啡在轉(zhuǎn)基因小鼠中不再誘導(dǎo)突觸的進(jìn)一步增加。VTA區(qū)突觸后密度蛋白95(Postsynaptic density protein 95,PSD-95)的表達(dá)升高,而轉(zhuǎn)基因小鼠中Trx-1的高表達(dá)抑制了它的表達(dá)升高。(7)Trx-1對(duì)γ-氨基丁酸能神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用。在嗎啡CPP模型,VTA、NA、Hip及PFC 中γ-氨基丁酸受體 B(γ-aminobutyricacidreceptorB,GABABR)的表達(dá)降低,在轉(zhuǎn)基因小鼠中它們的表達(dá)恢復(fù)。高效液相色譜法檢測(cè)結(jié)果顯示,VTA、NAc 區(qū)中GABA水平顯著降低,在轉(zhuǎn)基因小鼠中它們的表達(dá)水平恢復(fù)。小結(jié):本研究揭示了 Trx-1高表達(dá)抵抗嗎啡誘導(dǎo)的CPP形成,抑制了 VTA、NAc、Hip和PFC區(qū)中成癮相關(guān)的多巴胺能,谷氨酸能以及γ-氨基丁酸能系統(tǒng)的表達(dá)變化。Trx-1高TT表達(dá)阻止嗎啡誘導(dǎo)VTA區(qū)突觸數(shù)目進(jìn)一步增加,因此,Trx-1可以作為治療嗎啡獎(jiǎng)賞效應(yīng)的重要靶點(diǎn)。
【圖文】：

圖 1. 1 嗎啡的分子結(jié)構(gòu)Figure1.1 The molecular structure of morphine[3]機(jī)理懲罰學(xué)說來闡明吸毒者的成癮行為。懲罰學(xué)說認(rèn)

大腦的神經(jīng)投射[52]
【學(xué)位授予單位】：昆明理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R749.64

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 萬寶俊,王望紅,徐穎惠;耳穴壓豆預(yù)防嗎啡類藥物所致便秘的療效觀察[J];現(xiàn)代護(hù)理;2003年07期

2 郭萬里,孫多金,石恩林;蘭州地區(qū)嗎啡類藥物依賴分析[J];川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2001年02期

3 陳燕;;耳穴壓豆預(yù)防嗎啡類藥物所致便秘的療效觀察[J];中醫(yī)臨床研究;2015年25期

4 樊碧發(fā);嗎啡類藥物的臨床應(yīng)用[J];遼寧醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

5 何鳴;嗎啡類藥物依賴機(jī)理研究[J];國外醫(yī)學(xué).精神病學(xué)分冊(cè);1995年01期

6 蘇坤;陳惠東;;自擬養(yǎng)陰潤腸方治療嗎啡類藥物引起的便秘29例臨床觀察[J];湖南中醫(yī)雜志;2017年11期

7 董明會(huì);郭利華;;中醫(yī)治療嗎啡類藥物所致便秘的進(jìn)展[J];云南中醫(yī)中藥雜志;2010年03期

8 李紹毅;齊愛霞;白力允;宋士軍;;嗎啡類藥物不良反應(yīng)的臨床觀察[J];中國民康醫(yī)學(xué);2014年09期

9 吳登斌;王文萍;王忠?guī)?王華偉;高晶晶;;中藥“嗎啡伴侶”治療嗎啡類藥物所致便秘的療效觀察[J];遼寧中醫(yī)雜志;2009年06期

10 朱兆承;王懷章;姚亞民;楊峰;朱霞;;加味增液湯治療嗎啡類藥物所致便秘38例[J];光明中醫(yī);2010年08期

相關(guān)會(huì)議論文 前1條

1 郭天林;;鹽酸鈉洛酮在急救中的應(yīng)用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國第五次急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];1994年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 高書明;讓癌癥患者不再疼痛[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 李翔;硫氧還蛋白-1對(duì)環(huán)境毒性物嗎啡成癮的調(diào)節(jié)機(jī)制研究[D];昆明理工大學(xué);2018年

2 姜美俊;嗎啡所致小鼠胸腺細(xì)胞凋亡及其機(jī)制和胸腺細(xì)胞iNOS表達(dá)水平的研究[D];中南大學(xué);2004年

，

本文編號(hào)：2688177