【摘要】：目的近年來兒童糖尿病患者的數(shù)量在不斷增加,糖尿病已成為危害兒童身心健康的重要疾病之一。根據(jù)2018年ADA糖尿病指南,兒童糖尿病按病因?qū)W主要分為1型糖尿病,2型糖尿病和其他類型糖尿病。1型糖尿病是胰島β細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫疾病,也是兒童糖尿病的主要類型。大部分1型糖尿病患者血液中可以檢測到胰島自身抗體,而少數(shù)患者抗體檢測陰性。胰島自身抗體陰性糖尿病患者可能包括青年人起病的成年型糖尿病(maturity onset diabetes of the young,MODY)、新生兒糖尿病(neonatal diabetes mellitus,NDM)和伴有糖尿病的遺傳綜合征。本研究通過高通量測序及Sanger測序相結(jié)合方式對胰島自身抗體陰性的兒童糖尿病進(jìn)行糖代謝相關(guān)基因的篩查,旨在進(jìn)一步了解本地區(qū)抗體陰性糖尿病患兒的病因,加深對胰島自身抗體陰性糖尿病的認(rèn)識。從中篩查出未發(fā)現(xiàn)的單基因糖尿病,從而進(jìn)行個體化精準(zhǔn)治療,通過對所篩查基因結(jié)果及其臨床特點(diǎn)進(jìn)行綜合分析,找出基因型與表型的相關(guān)性,對今后兒童糖尿病的精準(zhǔn)治療通過參考。方法收集32名胰島自身抗體(ICA、GADA、IA-2)陰性,空腹C肽≥0.3ng/ml的兒童糖尿病患者作為實(shí)驗(yàn)組。同時選擇至少一種胰島自身抗體(ICA、GADA、IA-2)陽性的1型兒童糖尿病患者32例為對照組。經(jīng)過知情同意后獲得患者的病史資料并進(jìn)行詳細(xì)的體格檢查。提取抗體陰性患者外周血DNA,必要時抽取父母外周血DNA,進(jìn)行糖代謝相關(guān)基因的高通量測序。對篩選出的可能致病性變異,在患者及其家系中進(jìn)行Sanger測序驗(yàn)證。分析比較檢出基因致病變異組、未檢出變異基因組和胰島自身抗體陽性組的相關(guān)指標(biāo),包括出生體重、空腹C肽、起病時間、初診時糖化血紅蛋白、年齡、家族史、酮癥酸中毒(DKA)發(fā)生率、胰島素用量,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1.32例抗體陰性兒童糖尿病中有21例糖尿病患者檢出可能相關(guān)變異,11例患者未檢出變異基因。其中單基因糖尿病相關(guān)基因12個,其中4個致病變異、3個可能良性變異、5個致病性未明;與糖尿病易感性相關(guān)基因有12個。2.檢出基因致病變異組與胰島自身抗體陽性組相比在出生體重、BMI、空腹C肽、DKA發(fā)生率、胰島素用量上有差異(P0.05);未檢出基因致病變異組與胰島自身抗體陽性組相比在空腹C肽、Hb A1c、胰島素用量相比上有差異(P0.05);檢出基因致病變異組與未檢出變異基因組相比在空腹C肽、DKA發(fā)生率、Hb A1c、胰島素用量上有顯著差異(P0.05)。3.空腹C肽的Cut-off值0.64ng/ml,該界值的靈敏度為85.7%,特異性為92.7%;曲線下面積為0.735(P0.01)。結(jié)論1.胰島自身抗體陰性兒童糖尿病中,存在單基因糖尿病基因變異。但單基因糖尿病基因變異可能不是抗體陰性糖尿病的主要致病原因。2.空腹C肽結(jié)合BMI、DKA發(fā)生率、Hb A1c、胰島素用量在臨床可作為胰島自身抗體陰性糖尿病進(jìn)行基因檢測指標(biāo),有利于鑒別1型糖尿病和非1型糖尿病,提高單基因糖尿病的檢出率。3.單基因糖尿病及2型糖尿病與1型糖尿病相比,可能出生體重更低,體型更胖,空腹C肽更高,DKA發(fā)生率更低,胰島素用量更少。4.本研究發(fā)現(xiàn)中國2型糖尿病患者中存在GCGR c.118GA p.G40S,考慮該基因位點(diǎn)與中國2型糖尿病易感性是相關(guān)的。5.我們研究發(fā)現(xiàn)一例未報道ELN無義突變(G611*),此變異可能與糖代謝途徑相關(guān),需要行下一步研究明確。6.本研究找到一例未報道的LIPC移碼突變,對蛋白影響較大,與糖脂代謝相關(guān)。擬下一步行功能驗(yàn)證。
【圖文】：

圖 1 目標(biāo)區(qū)域測序技術(shù)流程圖（以 Illumina 為例）過目標(biāo)區(qū)域測序技術(shù)對胰島自身抗體陰性的兒童糖尿病患者測，找到該類型糖尿病致病原因。旨在進(jìn)一步了解本地區(qū)抗體出 MODY，加深胰島抗體陰性糖尿病病因和發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識糖尿病的分型提供更多依據(jù)。

2978.57±522.70* 3195.00±404.45 3403.23±379.46 9.86±5.00 8.80±4.13 7.29±4.26 18.01±3.50* 16.60±2.39 15.39±1.44 /ml) 0.89(0.61，2.90)* 0.48(0.38，0.88)*# 0.17(0.05，0.37) 6.88±1.7511.32±3.02*# 9.15±2.14 (%) 1/7* 8/11# 25/30 IU/Kg) 0.14±0.24* 0.51±0.30*# 0.68±0.21 4(7) 3(11) 11(32) 身抗體陽性組比較*P＜0.05；與檢出基因致病變異組比較#P＜0.05；KA 病例/每組總病例；兩組之間比較，，計(jì)量資料采用秩和檢驗(yàn)，定性＜0.05 提示兩組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因致病變異組與 C 肽的 ROC 曲線致病變異組的 Cut-off 值 0.64ng/ml，該界值的靈敏度為 85.7%線下面積為 0.735（P＜0.01）（見圖 3）。在檢出基因致病變85.7%）；在未檢出變異基因組 C 肽陽性率為 9/11（75%）
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R725.8;R440

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 黃鶯,張惠斌,周金培,黃文龍;以PPAR為靶點(diǎn)的抗糖尿病藥物研究[J];藥學(xué)進(jìn)展;2004年05期

2 ;可伴糖尿病的遺傳綜合征有哪些?[J];遼寧實(shí)用糖尿病雜志;2000年03期

本文編號：2675659