【摘要】：背景:金黃色葡萄球菌是革蘭氏陽性菌的代表,可引起嚴重感染,包括鼻竇炎、肺炎、心內(nèi)膜炎、骨髓炎等,病死率高達20%。近年來由于抗生素的不合理使用與銷售,細菌耐藥性問題日益顯著,耐藥菌株傳播速度急劇加快,給人體帶來潛在的健康威脅。然而80%的金葡菌感染來源于患者入院前鼻腔或皮膚表層的金葡菌攜帶。金葡菌在健康人群中的定植是造成社區(qū)和醫(yī)院金葡菌感染和耐藥傳播的重要危險因素。目前國內(nèi)外針對金葡菌的研究多集中在醫(yī)院內(nèi)部而較少關(guān)注健康人群金葡菌的攜帶情況,因此,不利于感染來源的探究及防控措施的制定,強調(diào)我們需要對健康人群攜帶的金葡菌進行研究。目的:1.了解江蘇省泰興市健康人群中金黃色葡萄球菌攜帶情況。2.掌握江蘇省泰興地區(qū)健康人群攜帶金黃色葡萄球菌菌株的耐藥現(xiàn)狀,并對相關(guān)耐藥基因進行檢測,為臨床用藥及預(yù)防控制耐藥菌株感染提供科學依據(jù)。3.觀察江蘇省泰興地區(qū)健康人群攜帶金黃色葡萄球菌的分子特征。4.探討健康人群攜帶不同分子型別的金黃色葡萄球菌與感染風險及耐藥性獲得之間的關(guān)系,并闡述對耐藥菌株傳播可能帶來的影響。方法:1.2016年6月7日至2016年6月14日,按0、3、7天時間間隔對144名泰興市本地18-65歲常住成年健康人群進行鼻腔拭子標本采集。2.參照GB/T 4789.37-2008標準,采用Baird-Parker平板法對鼻腔拭子標本進行金黃色葡萄球菌計數(shù),挑選可疑菌株并通過血漿凝固酶試驗和Vetck-2生化試驗進行鑒定。根據(jù)3次采集的鼻腔拭子標本生化鑒定和菌落計數(shù)結(jié)果,將攜帶金黃色葡萄球菌人群分為長期定植、間歇定植和未確定定植狀態(tài)三個組別。3.參照美國臨床和實驗室標準協(xié)會(Clinical and Laboratory Standard Institute,CLSI)標準,選用K-B紙片法(K-B Disk Diffusion test)對臨床常用的24種抗菌藥物進行耐藥性研究。4.采用PCR方法對金黃色葡萄球菌多種耐藥基因攜帶情況進行篩查,并對甲氧西林耐藥基因進行mec A基因分型。5.運用金黃色葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal protein A,SPA)基因多態(tài)性分型、多位點序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)、多位點串聯(lián)重復(fù)序列分析(Multiplelocus variable number tandem repeat analysis,MLVA)三種分子分型方法對江蘇省泰興市健康人群中分離出的金黃色葡萄球菌進行分子分型并與國內(nèi)外流行菌株進行對比分析。結(jié)果:1.健康人群鼻腔中普遍攜帶金黃色葡萄球菌。本研究發(fā)現(xiàn)金黃色葡萄球菌的陽性攜帶率最高為20.83%。長期定植者在整個研究人群中占比8.33%,間歇定植者占比17.36%,仍有74.31%未確定定植狀態(tài)。金葡菌長期定植者中鼻腔菌落計數(shù)高達106 CFU。2.健康人群鼻腔提取的金葡菌對對β-內(nèi)酰胺類抗生素,紅霉素,替考拉寧耐藥水平較高,對氨基糖苷類、喹諾酮類、化學合成類等藥物耐藥檢出率較低,未發(fā)現(xiàn)利奈唑胺、利福平、莫匹羅星和萬古霉素耐藥菌株,多重耐藥情況嚴重。長期定植者與間歇定植者耐藥情況相比,未發(fā)現(xiàn)長期定植者中更高的耐藥種數(shù)。3.健康人群攜帶的金葡菌分子型別分布較為廣泛。長期定植者鼻腔金葡菌定植的分子型別相對固定,而間歇定植者易發(fā)生變化,且伴隨著不同耐藥程度金葡菌定植的變化。4.本研究發(fā)現(xiàn)23株mec A陽性菌株,SCCmec I型、II型和III型均出現(xiàn)在間歇定植者中(HA-MRSA)。長期定植者中已分型的SCCmec型別均為IV(CA-MRSA),三次采樣分型未發(fā)生變化。5.本研究發(fā)現(xiàn)健康人群中10種MRSA耐藥分子模式。長期定植者中兩種MRSA耐藥分子模式分別為t015-ST508-SCCmec IV和JS-8-ST1920-SCCmec IV。間歇定植者中8種MRSA耐藥分子模式:t437-ST59-SCCmec I,t437-ST59-SCCmec III,t437-ST59-SCCmec IV,t015-ST508-SCCmec IV,t616-ST944-SCCmec II,t5554-ST630-SCCmec III,t377-ST630-SCCmec II,t4549-ST630-SCCmec III。結(jié)論:1.健康人群中金葡菌攜帶狀況較為普遍,不同的定植狀態(tài)及分子型別對金葡菌耐藥性的產(chǎn)生和耐藥菌株的傳播具有重要的影響。2.本研究未在長期定植人群中發(fā)現(xiàn)較高的多重耐藥現(xiàn)象,提示定植狀態(tài)可能與多重耐藥無關(guān)。3.本研究發(fā)現(xiàn)對健康人群進行mec A基因分型,能夠預(yù)測攜帶不同SCCmec型別感染的來源和潛在的風險,不同定植狀態(tài)可能存在SCCmec型別上的潛在機制。4.本研究未在健康人群中發(fā)現(xiàn)引起我國院內(nèi)MRSA感染的主要耐藥分子模式。
【圖文】：

VITEK2 全自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)麥氏比濁儀法國梅里埃公司法國梅里埃公司.3 方法.3.1 鼻腔標本采集方法按 0、3、7 天時間間隔對志愿者進行鼻腔拭子標本采集。引導(dǎo)受試者平躺于床或沙發(fā)上，用手輕輕固定住受試者的頭部，使其頭部保持微姿態(tài)。將一支人造絲拭子輕輕插入受試者左側(cè)鼻道內(nèi)的鼻前庭處，順時針方向和逆時針交替緩慢轉(zhuǎn)動 15 秒后取出。將采樣后的人造絲拭子插入裝有 1mL 0.85%無菌生水的樣品保存管中，長于保存管的部分掰斷丟棄，擰緊管蓋。另取一支人造絲拭子，采集右側(cè)鼻腔拭子，，方法與左側(cè)相同，并將左右鼻腔拭子置于同一樣品保存管中，擰緊管蓋，靜置于室溫備用。

圖 1-2. 金葡菌長期定植與非志愿者中，最終有 144 名完成了整資料見表 1-2。在這些志愿者中，三菌陽性攜帶者，107 名未檢測出金樣本量較少，未進行統(tǒng)計學分析。表 1-2. 志愿者人口學基金葡菌陽性（n=37） 45（18-61） 16/37（43.2%） 21/37（56.8%） 25.1（20.6-35.5）
【學位授予單位】：東南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R446.5

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 王艷;周麗萍;巢國祥;吳艷濤;張小榮;;金黃色葡萄球菌MRSA分型及分子溯源研究[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2014年20期

2 王彤;楊曄;陳意;梅亞寧;顧兵;潘世揚;黃s顂

本文編號：2648850