【摘要】：目的:研究姜黃素對(duì)人胃上皮細(xì)胞GES-1的放射性損傷的影響,并對(duì)其抗氧化損傷及抗細(xì)胞凋亡途徑的機(jī)制進(jìn)行探索,為胃的放射性損傷的治療提供新的可能治療思路。方法:實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組、姜黃素組、輻照模型組、輻照+姜黃素組。采用MTT法對(duì)輻照組的GES-1細(xì)胞活力進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析,X線輻照劑量選用1、2、4、8 Gy,輻照后觀察時(shí)間限定為6、12、24、48 h,選出細(xì)胞活力變化明顯的一組輻照劑量及輻照后觀察時(shí)間為輻照模型組的處理因素和觀察時(shí)間;通過(guò)MTT法檢測(cè)2、4、8、16μM濃度的姜黃素單純處理是否對(duì)GES-1細(xì)胞的活力產(chǎn)生影響;采用MTT法檢測(cè)上述不同濃度的姜黃素對(duì)放射性損傷的GES-1細(xì)胞是否具有保護(hù)作用;利用DCF法檢測(cè)上述不同濃度姜黃素處理后的放射性損傷的GES-1細(xì)胞的ROS升高率變化;通過(guò)MDA-TBA法檢測(cè)上述不同濃度姜黃素處理后的放射性損傷的GES-1細(xì)胞的MDA濃度變化;利用Western Blot法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3在不同濃度姜黃素處理后的放射性損傷的GES-1細(xì)胞中的表達(dá)情況。結(jié)果:1.GES-1細(xì)胞活力呈X線放射劑量依賴(lài)性下降,在4 Gy X線劑量輻照后24 h其細(xì)胞活力開(kāi)始顯著下降(P0.05);在2、4、8、16μM濃度的姜黃素單純處理下,GES-1細(xì)胞活力不受影響;隨著姜黃素的濃度上升,放射性損傷GES-1細(xì)胞模型的細(xì)胞活力呈濃度依賴(lài)性上升,并當(dāng)姜黃素濃度為4μM時(shí),其細(xì)胞活力與輻照模型組比較上升顯著(P0.05),但均未回復(fù)到空白對(duì)照組水平。2.姜黃素處理下的輻照模型GES-1細(xì)胞內(nèi)的ROS上升率呈藥物濃度依賴(lài)性下降趨勢(shì),濃度為2、4μM的姜黃素處理下的放射性損傷GES-1細(xì)胞模型的ROS上升率變化與輻照模型組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),當(dāng)姜黃素濃度增至8μM時(shí),其ROS上升率開(kāi)始與輻照模型組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3.X線輻照+姜黃素組GES-1細(xì)胞內(nèi)的MDA含量均低于輻照模型組,且與之比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且當(dāng)姜黃素濃度為16μM時(shí),其MDA含量接近空白對(duì)照組水平,相比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。4.X線輻射損傷的GES-1細(xì)胞Bcl-2蛋白含量呈姜黃素濃度依賴(lài)性上升,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白含量呈濃度依賴(lài)性下降,但均未回復(fù)到空白對(duì)照組水平。結(jié)論:姜黃素可通過(guò)抗氧化損傷及抗凋亡途徑發(fā)揮其對(duì)GES-1細(xì)胞的放射性損傷保護(hù)作用,部分機(jī)制為降低其ROS及MDA含量,并上調(diào)Bcl-2,下調(diào)Bax、Cleaved Caspase-3凋亡相關(guān)蛋白水平。
【圖文】：

GES-1 細(xì)胞在不同 X 線輻照劑量和不同輻照后觀察時(shí)間下的細(xì)胞活力（%注：*表示與對(duì)照組比較 P <0.05，**表示與對(duì)照組比較 P <0.01姜黃素對(duì) GES-1 細(xì)胞活力的影響有眾多實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道姜黃素對(duì)人體細(xì)胞無(wú)明顯負(fù)面作用，，但對(duì) G關(guān)研究較少。為了確定單獨(dú)姜黃素處理是否會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，同，選用姜黃素濃度為 2、4、8、16μM，培養(yǎng)時(shí)間為 24h。表 3.2 姜黃素各濃度處理組細(xì)胞活力與對(duì)照組均無(wú)顯著性差異，可認(rèn)為在黃素不影響 GES-1 細(xì)胞的生長(zhǎng)。GES-1 細(xì)胞在不同姜黃素濃度下培養(yǎng) 24h 后的細(xì)胞活力（%）變化（n=5，分組 細(xì)胞活力（%）Control 100 ± 0.0Cur 2 μM 99.8 ± 0.85

GES-1 細(xì)胞在不同姜黃素濃度下培養(yǎng) 24h 后的細(xì)胞活力（對(duì) X 線輻照后 GES-1 細(xì)胞的活力的影響圖 3.3 顯示，經(jīng) 4GyX 線輻照后培養(yǎng) 24h，GES-1 細(xì)
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R730.55

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本文編號(hào)：2640414