【摘要】：目的探討鞘內(nèi)注射Reelin重組蛋白對大鼠慢性坐骨神經(jīng)壓迫性損傷(chronic constriction injury,CCI)模型中大鼠疼痛行為學(xué)及脊髓水平Reelin信號通路下游蛋白Dab1磷酸化、星形膠質(zhì)細胞的活化及TNF-α表達的相關(guān)性研究。方法鞘內(nèi)置管成功的SD雄性大鼠54只,無運動功能障礙,體重250-400g,年齡8-10周,隨機數(shù)字表法分成三組,Sham組(假手術(shù)+鞘內(nèi)注射PBS)(n=18),CCI組(坐骨神經(jīng)結(jié)扎+鞘內(nèi)注射PBS)(n=18),RELN組(坐骨神經(jīng)結(jié)扎+鞘內(nèi)注射Reelin重組蛋白)(n=18)。RELN組與CCI組采用4-0羊腸線結(jié)扎右側(cè)坐骨神經(jīng)建立慢性疼痛模型,Sham組予以暴露坐骨神經(jīng)但不結(jié)扎。RELN組于CCI術(shù)后第10天鞘內(nèi)注射Reelin重組蛋白5μl(0.01μg/μl),其余組給予5μl PBS溶液。記錄CCI術(shù)前1天,術(shù)后1、4、7、10、11、12、13、14、15、17、21天大鼠右側(cè)后足底痛行為學(xué)指標,包括熱縮足潛伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL)和機械縮足閾值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)。分別于給藥后1小時,給藥后3天處死大鼠,取右側(cè)腰膨大部位脊髓背角,采用免疫組化、Western blot方法檢測Dab1磷酸化、GFAP、TNF-α的表達情況。結(jié)果(1)術(shù)前各組大鼠的基礎(chǔ)PWMT和PWTL無明顯區(qū)別。Sham組大鼠前后PWTL和PWTL無明顯差異;CCI組大鼠從術(shù)后第1d開始各時間點PWMT和PWTL均低于Sham組(P0.05),且持續(xù)至術(shù)后第21d。RELN組鞘內(nèi)注射Reelin重組蛋白后1h、1、2、3、4、5d大鼠的PWMT和PWTL明顯增加(P0.05)。(2)免疫組化的結(jié)果與Western blot的結(jié)果顯示,與Sham組相比,CCI組手術(shù)側(cè)大鼠脊髓背角Dab1磷酸化的表達明顯減少(P0.05),術(shù)后第10d、13d脊髓背角GFAP、TNF-α的表達上調(diào)。與CCI組相比,RELN組鞘內(nèi)注射Reelin重組蛋白后1小時、給藥后3d大鼠右側(cè)脊髓背角p-Dab1表達明顯增加(P0.05),大鼠脊髓背角GFAP、TNF-α的表達明顯減少(P0.05)。結(jié)論鞘內(nèi)注射Reelin重組蛋白可以緩解神經(jīng)病理性疼痛,其機制可能與其抑制脊髓背角星形膠質(zhì)細胞的活化及TNF-α的表達有關(guān)。
【圖文】：

圖 3.5 各組大鼠脊髓背角 p-Dab1 的表達情況A：Western blot 檢測各組大鼠右側(cè)脊髓背角 p-Dab1 的表達；B p-Dab1/GAPDH 比值結(jié)果。與 Sham 組相比，#P＜0.05；與 CC。

18圖 3.6 各組大鼠脊髓背角免疫組化 GFAP 的表達情況注：A：免疫組化觀察各組大鼠右側(cè)脊髓背角 GFAP 的表達，箭頭指示為陽性細胞（×400）；B：免疫組化 IOD 值結(jié)果。與 Sham 組相比，#P＜0.05；與 CCI組相比，*P＜0.05。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R402

【參考文獻】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 陽巧云;鞘內(nèi)注射Reelin基因干擾慢病毒載體對大鼠慢性神經(jīng)病理性疼痛的研究[D];南華大學(xué);2015年

2 李晶金;慢性壓迫性神經(jīng)痛大鼠脊髓水平Reelin的表達變化[D];南華大學(xué);2014年

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本文編號：2628491