【摘要】：目的探討錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院35株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌(Multi-drug resistant acinetobacter baumanii,MDR-AB)耐藥情況,檢測(cè)MDR-AB金屬β-內(nèi)酰胺酶(MBL)基因,探究抗生素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)MDR-AB的體外活性。方法收集錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2016年8月至2017年3月期間各科室耐碳青霉烯類的MDR-AB。微量肉湯稀釋法測(cè)定35株MDR-AB對(duì)抗生素的耐藥性。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測(cè)被測(cè)菌株MBL基因攜帶情況,將PCR陽(yáng)性產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序確定基因型。棋盤法測(cè)定抗生素聯(lián)用對(duì)MDR-AB的MIC值,計(jì)算FIC指數(shù),用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析。結(jié)果1、MDR-AB在ICU檢出率最高,其次為神經(jīng)外科,分別占74.3%(26/35)和17.1%(6/35)。2、實(shí)驗(yàn)菌株對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦(CFS)、哌拉西林/舒巴坦(SPI)、氨芐西林/舒巴坦(SAM)、美羅培南(MER)、比阿培南(BPM)、亞胺培南(IPM)、磷霉素(FOS)、硫酸依替米星(ETS)的耐藥率達(dá)100%,對(duì)利福平(RIF)耐藥率為31.4%、左氧氟沙星(LVX)為80.0%、舒巴坦(SUL)為91.4%、替加環(huán)素(TIG)為71.4%、多粘菌素B(PMB)為42.9%、阿米卡星(KAN)為94.3%、慶大霉素(GEN)為94.3%和米諾環(huán)素(MIN)為5.7%。3、用特異引物對(duì)NDM-1、IMP-1、VIM-1、VIM-2、GIM和SPM 6種金屬β-內(nèi)酰胺酶基因進(jìn)行擴(kuò)增后電泳,其中有26株菌均在263bp左右出現(xiàn)陽(yáng)性條帶,提示上述菌株可能攜帶了IMP-1基因,陽(yáng)性率為74.3%(26/35);13株在285bp左右出現(xiàn)陽(yáng)性條帶,提示上述菌株可能攜帶了VIM-2基因,陽(yáng)性率為37.1%(13/35);其中11株同時(shí)攜帶IMP-1和VIM-2基因。4、選取PCR陽(yáng)性產(chǎn)物送至大連寶生生物科技有限公司純化并測(cè)序,結(jié)果和GeneBank上報(bào)道的已知IMP-1和VIM-2基因比對(duì),同源性為99%,證實(shí)為IMP-1和VIM-2基因。5、在以SUL、CFS、TIG為基礎(chǔ)的各藥物聯(lián)用時(shí),對(duì)實(shí)驗(yàn)菌株主要表現(xiàn)為協(xié)同、部分協(xié)同和相加作用,無(wú)拮抗現(xiàn)象。其中,與MER聯(lián)用的協(xié)同率較高(P0.05)。結(jié)論1、本實(shí)驗(yàn)的35株MDR-AB中,多攜帶blaIMP-1、blaVIM-2基因,在介導(dǎo)碳青霉烯類抗生素耐藥中起一定作用。2、抗生素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)實(shí)驗(yàn)的35株MDR-AB主要表現(xiàn)為協(xié)同及部分協(xié)同作用,無(wú)拮抗作用。頭孢哌酮舒巴坦在治療MDR-AB時(shí),舒巴坦起主要作用;與比阿培南和亞胺培南相比,美羅培南分別與舒巴坦、頭孢哌酮舒巴坦、替加環(huán)素聯(lián)合,對(duì)MDR-AB具有良好的體外抗菌活性。
【圖文】：

取 IMP-1 和 VIM-2 基因所有陽(yáng)性產(chǎn)物純化并測(cè)序，結(jié)果和 GeneBank 上報(bào)道的已知基因序列比對(duì)，，證實(shí)為 IMP-1 和 VIM-2 基因，同源性為 99%。圖1 部分菌株IMP-1基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖注：M：DL2000 DNA MARK；N：陰性對(duì)照；1-6孔為blaIMP-1基因擴(kuò)增產(chǎn)物陽(yáng)性的菌株圖2 部分菌株VIM-2基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖注：M：DL2000 DNA MARK；N：陰性對(duì)照；2-13孔為blaVIM-2基因擴(kuò)增產(chǎn)物陽(yáng)性的菌株；1、14、15孔為blaVIM2基因擴(kuò)增產(chǎn)物陰性的菌株

圖1 部分菌株IMP-1基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖注：M：DL2000 DNA MARK；N：陰性對(duì)照；1-6孔為blaIMP-1基因擴(kuò)增產(chǎn)物陽(yáng)性的菌株圖2 部分菌株VIM-2基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖注：M：DL2000 DNA MARK；N：陰性對(duì)照；2-13孔為blaVIM-2基因擴(kuò)增產(chǎn)物陽(yáng)性的菌株；1、14、15孔為blaVIM2基因擴(kuò)增產(chǎn)物陰性的菌株
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R446.5;R440

【參考文獻(xiàn)】

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