【摘要】：背景生物小分子在生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、環(huán)境等方面都發(fā)揮著非常重要的作用。如銅離子在氧化還原反應(yīng)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等過(guò)程中起重要作用。焦磷酸鹽參與細(xì)胞中三磷酸腺苷的水解、DNA和RNA的聚合反應(yīng)等過(guò)程。硫化氫作為內(nèi)源性氣體信號(hào)分子,在心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等器官系統(tǒng)的病理生理過(guò)程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。因此,識(shí)別檢測(cè)生物體內(nèi)的銅離子、焦磷酸根和硫化氫有助于進(jìn)一步了解它們?cè)谏矬w新陳代謝中的作用,并對(duì)相關(guān)疾病的準(zhǔn)確診斷提供重要依據(jù)。目的設(shè)計(jì)合成具有高靈敏度和選擇性的小分子熒光探針,對(duì)銅離子、焦磷酸根和硫化氫進(jìn)行檢測(cè),為相關(guān)疾病的診斷和治療提供可視化的檢測(cè)方法。方法1.基于香豆素、萘酐等熒光基團(tuán),設(shè)計(jì)合成三個(gè)熒光探針L1、L2-Cu~(2+)、L3-Cu~(2+),通過(guò)質(zhì)譜、核磁、紅外等對(duì)其進(jìn)行表征。2.通過(guò)紫外-可見(jiàn)吸收光譜和熒光光譜檢測(cè)探針對(duì)各種金屬離子、陰離子和氨基酸的響應(yīng)。3.用pH依賴性實(shí)驗(yàn)探索探針的適宜應(yīng)用環(huán)境。4.培養(yǎng)肝正常細(xì)胞LO-2、肝癌細(xì)胞HepG-2和肺癌細(xì)胞A549,用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)檢測(cè)探針的細(xì)胞毒性。5.用熒光細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)測(cè)試探針應(yīng)用于生物環(huán)境的可行性。結(jié)果1.成功合成了銅離子熒光探針L1、焦磷酸根熒光探針L2-Cu~(2+)和硫化氫探針L3-Cu~(2+)。并通過(guò)高分辨質(zhì)譜、氫譜和碳譜進(jìn)行表征。2.紫外-可見(jiàn)吸收光譜和熒光光譜結(jié)果顯示:(1)探針L1對(duì)Cu~(2+)有較高的靈敏度和選擇性,共存時(shí)幾乎不受其它金屬離子和陰離子的干擾。(2)探針L2-Cu~(2+)對(duì)PPi具有較高的靈敏度和選擇性,其熒光“開(kāi)啟”方式優(yōu)于Pi、ATP、ADP和AMP等其它陰離子。(3)探針L3-Cu~(2+)可以較高的選擇性和靈敏度對(duì)H_2S進(jìn)行檢測(cè)且不易受各種氨基酸的干擾。3.細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:探針濃度在0-10μM范圍內(nèi),對(duì)細(xì)胞不存在顯著的細(xì)胞毒性和副作用。4.熒光細(xì)胞成像結(jié)果顯示:L1、L2、L2-Cu~(2+)、L3和L3-Cu~(2+)都具有良好的細(xì)胞滲透性,可用于細(xì)胞內(nèi)外銅離子、焦磷酸根和硫化氫的檢測(cè)。結(jié)論1.成功設(shè)計(jì)合成了銅離子熒光探針L1、焦磷酸根熒光探針L2-Cu~(2+)和硫化氫熒光探針L3-Cu~(2+)。2.三個(gè)熒光探針?lè)謩e成功應(yīng)用于在細(xì)胞環(huán)境下對(duì)銅離子、焦磷酸根和硫化氫進(jìn)行檢測(cè)。
【圖文】：

新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文光探針紫外-可見(jiàn)光譜響應(yīng)收光譜檢測(cè)結(jié)果顯示（圖 4）：在 CH3CN：HEPES（ Cu2+加入探針 L1 的溶液后，465 nm 附近的紫外可金屬離子如 Ag+、Ca2+、Co2+、Cr3+、Fe3+、Fe2+、K+、Mn2+、Hg2+和 Pb2+，熒光探針 L1 的紫外可見(jiàn)吸收

HEPES（3：2，v/v，，pH = 7.4）溶液中，加入 Cu2+后熒光探針見(jiàn)吸收光譜。插圖：在 465 nm 處的熒光探針 L1 的紫外可見(jiàn)滴0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0-0.06-0.04-0.020.000.020.040.060.080.100.12AbosrbnaceL/(L+Cu2+)HEPES（3：2，v/v，pH = 7.4）溶液中，熒光探針 L1 與 Cu2+的濃度為 50 μM）H 依賴性
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：O657.3;R446

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 岳攀;扶雄輝;;基于鉻天青S-銅-鄰二氮菲傳感體系對(duì)焦磷酸根的識(shí)別研究[J];應(yīng)用化工;2016年05期

2 徐勤超;金燦;朱雪慧;邢國(guó)文;;基于有機(jī)小分子的焦磷酸根熒光探針研究進(jìn)展[J];有機(jī)化學(xué);2014年04期

本文編號(hào)：2612909