發(fā)布時(shí)間：2020-03-30 03:29

【摘要】：目的:檢測猬裂頭蚴感染小鼠不同時(shí)期優(yōu)勢特異性抗體類型,了解特異性抗體在抵抗裂頭蚴入侵、移行及定居過程中的作用。方法:1.裂頭蚴感染小鼠模型的建立及檢測標(biāo)本的制備:①取昆明小鼠120只,隨機(jī)分成16組,實(shí)驗(yàn)組8組(10只/每組),對照組8組(5只/每組)。將蛇源猬裂頭蚴經(jīng)口感染實(shí)驗(yàn)組小鼠(5條/只),建立小鼠感染模型。對照組小鼠不感染,其飼養(yǎng)條件及方式同實(shí)驗(yàn)組。②感染不同時(shí)間:6小時(shí)(h)、1天(d)、7d、14d、28d、56d、91d、126d分別解剖感染小鼠一組,記錄回收裂頭蚴數(shù)量及部位。③于感染后(6h-126d)分別收集實(shí)驗(yàn)組及對照組各一組的小鼠的小腸液、腹腔液及血清。2.特異性抗體的檢測:①用雙抗體夾心ELISA法測定小鼠腸液中的sIgA含量水平;②用間接ELISA法測定腹腔液(IgA、IgE)及血清中的特異性抗體類型或亞型(IgA、IgE、IgM、IgG、IgG1、IgG2b、IgG2c、IgG3)。對照組不感染裂頭蚴,腸液、腹腔液及血清的收集方法、時(shí)間與檢測同實(shí)驗(yàn)組。結(jié)果:1.感染6h可見裂頭蚴分布于小鼠胃腸腔、胃腸壁及腹腔,感染1d大部分裂頭蚴穿透胃腸壁到達(dá)腹腔,7d之后裂頭蚴主要移行至皮下組織,隨著感染時(shí)間的延長,裂頭蚴數(shù)目呈不同程度減少。2.小腸液抗體的檢測:小鼠感染后,小腸液中的sIgA水平呈上升趨勢,于感染后第7d達(dá)峰值[(22.05±1.43μg/mL],隨后下降,至56d達(dá)到感染前水平。3.腹腔液抗體的檢測:腹腔液中IgA及IgE于感染后的不同時(shí)間段均未檢出。4.血清抗體檢測(A450值):①IgM于感染后第7d檢出(0.551±0.120),7-28d呈上升趨勢,于28d達(dá)峰值(0.865±0.228),并維持高水平至第56d,隨后下降,于感染91d后逐漸降到感染前水平;②IgG于感染后第14d檢出(0.724±0.323),14-56d呈上升趨勢,第56d達(dá)峰值(2.435±0.088),隨后下降,于感染后126d仍能檢出;③血清IgA及IgE抗體于感染后的不同時(shí)間段均未檢出;④于感染后第14d對IgG亞型(IgG1、IgG2b、IgG2c、IgG3)進(jìn)行檢測,至感染126d,幾種抗體亞型均未測出。結(jié)論:1.小腸液中sIgA的檢出,表明裂頭蚴感染小鼠后可一定程度誘發(fā)小腸黏膜的免疫應(yīng)答作用,由于sIgA含量少,且產(chǎn)生晚于裂頭蚴入侵時(shí)間,因而sIgA不能有效抵抗裂頭蚴的入侵;2.小鼠血清中IgM及IgG的動(dòng)態(tài)水平變化,表明這兩種抗體介導(dǎo)的免疫應(yīng)答一定程度參與了抵抗裂頭蚴移行及定居等過程;3.IgG抗體為猬裂頭蚴感染小鼠血清中的優(yōu)勢抗體,小鼠體內(nèi)裂頭蚴的數(shù)量不斷減少可能與其有關(guān)。
【圖文】：

２．２小腸液ｓｌｇＡ水平的動(dòng)，

本文編號(hào)：2606961