【摘要】：神經(jīng)病理性疼痛(neuropathic pain,NP)由原發(fā)性神經(jīng)系統(tǒng)受損和功能障礙所引發(fā)的疼痛。其發(fā)病機制錯綜復雜,但臨床上目前暫無有效治療措施,長期的慢性痛折磨嚴重降低了患者的生存質量,也對社會造成嚴重的負擔,因此探討NP的發(fā)病機制和尋求新的治療藥物對我們來說迫在眉睫。葛根素亦稱葛根黃素,是從中藥葛根中提取的異黃酮類衍生物,已發(fā)現(xiàn)葛根素能有效抑制炎癥因子產生及活化膠質細胞,亦可緩解多種神經(jīng)損傷和痛性糖尿病模型鼠機械和熱痛敏反應,因此推測葛根素能通過抑制脊髓炎癥水平來有效的治療神經(jīng)病理性疼痛。目的:(1)建立小鼠神經(jīng)病理性疼痛模型,研究小鼠鞘內置管的方法,為后續(xù)實驗提供可靠的實驗基礎;(2)觀察葛根素不同給藥方式對小鼠神經(jīng)病理性疼痛是否有治療作用,為臨床該疾病藥物治療提供實驗基礎;(3)研究葛根素的治療作用是否與調控小膠質細胞的轉錄抑制因子sall1有關,以進一步探討葛根素的作用機制。方法:(1)雄性BALB/c小鼠建立坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷(SNI)模型,小鼠單側坐骨神經(jīng)的兩個分支即腓總神經(jīng)和脛神經(jīng)予以結扎并切斷,只保留腓腸神經(jīng)。Von Frey纖毛測量小鼠在SNI建模前后的50%機械縮足閾值變化。(2)在SNI建模5天通過腹腔注射、鞘內注射、鞘內置管三種給藥方式予以葛根素治療,分別測量各組小鼠給藥前后的機械痛閾變化情況。(3)RT-q PCR檢測SNI小鼠建模7天及給藥7天的患側腰段脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α炎癥指標的變化。(4)RT-q PCR、Western-blot檢測SNI小鼠葛根素治療7天、10天sall1的變化情況。結果:(1)SNI小鼠建�；甲憧梢娢逯覆n屈曲,輕度外翻畸形表現(xiàn)。建模后小鼠患側機械痛閾較正常組及假手術組相比下降明顯,有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)腹腔注射葛根素治療的SNI小鼠機械痛閾在給藥前后無明顯變化(P0.05),鞘內注射及鞘內置管給藥后小鼠機械痛閾較給藥前明顯上升(P0.05),證明鞘內注射及鞘內置管兩種中樞直接給藥方式對SNI小鼠有治療作用。(3)RT-q PCR檢測顯示SNI小鼠脊髓炎癥指標IL-1β、IL-6、TNF-α建模后明顯上升,鞘內注射葛根素7天脊髓炎癥相關指標較給藥前進一步上升,葛根素通過鞘內置管給藥7天脊髓炎癥相關指標較給藥前明顯下降(P0.05)。(4)RT-q PCR、Western-blot結果可知,sall1在SNI建模后均有降低,7天時下降最低,在葛根素鞘內置管給藥7天、10天m RNA及蛋白表達水平均有上升,以7天時上升最明顯,10天時升高至正常水平。結論:1.SNI模型后小鼠機械痛閾明顯降低,建模后與建模前基礎閾值相比下降大于40%判斷為建模成功,神經(jīng)病理性疼痛模型建立成功。葛根素通過腹腔注射對SNI小鼠痛敏反應無治療作用,鞘內注射及鞘內置管可提高SNI小鼠痛閾,推測本實驗所用的葛根素劑型不能通過血腦屏障,只能通過中樞給藥發(fā)揮作用,但鞘內反復注射有進一步造成炎癥損傷的存在,鞘內置管給藥方式最安全有效。2.SNI模型小鼠脊髓sall1表達水平下降,而在葛根素治療后能逆轉sall1表達下降,提示葛根素治療神經(jīng)病理性疼痛作用可能通過增加小膠質細胞轉錄抑制因子sall1發(fā)揮作用。
【圖文】：

圖 2.1 SNI 模型神經(jīng)結扎圖[40Figure 2.1 The schematic diagram about SNI model骨神經(jīng)與三個分支：脛神經(jīng)、腓總神經(jīng)、腓腸神經(jīng)，SNI 模型則如扎切斷脛神經(jīng)及腓總神經(jīng)，只保留腓腸神經(jīng)。圖 2.2 小鼠坐骨神經(jīng)及其分支解剖圖Figure 2.2 Sciatic nerve and its branches in mouse

8圖 2.2 小鼠坐骨神經(jīng)及其分支解剖圖Figure 2.2 Sciatic nerve and its branches in mouse如圖可見坐骨神經(jīng)主干及三個分支，藍色箭頭為坐骨神經(jīng)主干，，紅色箭頭為脛神經(jīng)，紫色箭頭為腓總神經(jīng)，灰色箭頭為最細的分支腓腸神經(jīng)。2.2.2 行為學觀察觀察小鼠建模后行走步態(tài)及肌力情況，如出現(xiàn)嚴重的步態(tài)障礙或肌無力，或出現(xiàn)患肢癱瘓及自噬情況，如有陽性則剔除后續(xù)實驗。
【學位授予單位】：江蘇大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R402

【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 樊碧發(fā);;神經(jīng)病理性疼痛的診療[J];現(xiàn)代實用醫(yī)學;2010年02期

2 翁瑩琪;郭曲練;王鍔;王瑞珂;;改良小鼠腰段蛛網(wǎng)膜下腔置管法[J];實驗動物與比較醫(yī)學;2010年02期

相關會議論文 前1條

1 張立實;;葛根素生物學作用研究進展(綜述)[A];第四屆第二次中國毒理學會食品毒理學專業(yè)委員會與營養(yǎng)食品所毒理室聯(lián)合召開學術會議論文集[C];2008年

本文編號：2596812