【摘要】：目的:研究制備集磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)與光熱治療photothermal therapy,PTT)于一體的多功能靶向納米探針——轉(zhuǎn)鐵蛋白偶聯(lián)的超小超順磁性氧化鐵納米顆粒(transferring-ultrasmall superparamagnetic iron-oxide nanoparticles,Tf-USPION),檢測(cè)該探針的理化性能、生物相容性,并探討其在前列腺癌磁共振成像和光熱治療中的應(yīng)用。方法:(1)通過(guò)一步溶劑熱法合成表面修飾羧基的超小超順磁性氧化鐵納米顆粒(ultrasmall superparamagnetic iron-oxide nanoparticles,USPION),在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC)和N-羥基琥珀酰亞胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)的作用下使表面的羧基活化,活化后的羧基與轉(zhuǎn)鐵蛋白(transferring,Tf)的氨基利用酰胺縮合反應(yīng)偶聯(lián),制備得到多功能靶向納米探針Tf-USPION。(2)通過(guò)X射線粉末衍射(X-ray powder diffraction patterns,XRD)、透射電子顯微鏡(transmission electron microscopy,TEM)、振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)(vibrating sample magnetometer,VSM)、傅里葉變換紅外光譜(fourier transform infrared,FTIR)、弛豫效能檢測(cè)、紫外-可見-近紅外(ultraviolet-visible-near infrared,UV-vis-NIR)吸收光譜及光熱轉(zhuǎn)換實(shí)驗(yàn)檢測(cè)探針Tf-USPION的理化性質(zhì)及光熱轉(zhuǎn)換性能。(3)通過(guò)細(xì)胞3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)納米探針Tf-USPION的生物相容性。(4)使用人前列腺癌細(xì)胞PC3分別與磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer saline,PBS)、USPION和Tf-USPION溶液共培養(yǎng)12 h,并對(duì)比不同處理?xiàng)l件下PC3細(xì)胞懸液的MR成像效果。(5)PC3細(xì)胞與PBS、Tf、USPION和Tf-USPION溶液共培養(yǎng)12 h,使用808 nm近紅外激光以8.3 W/cm2的功率分別照射5 min與10 min,采用MTT法評(píng)估各種不同處理?xiàng)l件下PC3細(xì)胞的存活率;同時(shí)采用鈣黃綠素乙酰甲酯(calcein-AM)及碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色,通過(guò)激光掃描共聚焦顯微鏡直接觀察各種不同處理?xiàng)l件下的PC3細(xì)胞的存活情況,結(jié)合MTT結(jié)果分析探針Tf-USPION對(duì)PC3細(xì)胞的PTT效果。(6)建立荷人前列腺癌裸鼠移植瘤模型,經(jīng)鼠尾靜脈注射探針Tf-USPION,探討所制備的靶向納米探針對(duì)于前列腺癌的MR成像效果。結(jié)果:(1)通過(guò)簡(jiǎn)單的一步溶劑熱法制備USPION,在EDC和NHS的作用下使表面的羧基活化,與Tf偶聯(lián)得到納米探針Tf-USPION。(2)XRD檢測(cè)證實(shí)制備的納米材料成分為Fe3O4;TEM顯示合成的USPION為類圓形,分布較均勻,直徑約為6.0 nm;VSM檢測(cè)USPION呈超順磁性,飽和磁化強(qiáng)度為25.13 emu/g;FTIR結(jié)果顯示所制備的納米探針Tf-USPION存在酰胺鍵;探針的T2弛豫率約為33.08 m M-1S-1;UV-vis-NIR吸收光譜檢測(cè)顯示探針Tf-USPION在近紅外區(qū)的的吸光范圍較寬。光熱轉(zhuǎn)換實(shí)驗(yàn)表明,經(jīng)808 nm激光照射,探針Tf-USPION的水溶液溫度迅速升高,濃度為為0.5 mg/mL,經(jīng)近紅外激光輻照4 min溫度升高41.5℃,而相同條件下去離子水僅升高7℃。(3)細(xì)胞MTT檢測(cè)結(jié)果表明PC3細(xì)胞與探針Tf-USPION共培養(yǎng)24 h,細(xì)胞存活率與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異,即使?jié)舛冗_(dá)0.8 mg/m L,細(xì)胞的存活率依然達(dá)到107.00%。(4)PC3細(xì)胞與PBS、USPION和Tf-USPION共培養(yǎng)12 h,MRI結(jié)果顯示,相較于與USPION共培養(yǎng)的細(xì)胞,與Tf-USPION共培養(yǎng)的PC3細(xì)胞懸液圖像明顯更暗。(5)PC3細(xì)胞與Tf-USPION溶液共培養(yǎng)12 h,經(jīng)近紅外激光輻照5 min與10 min,MTT結(jié)果顯示,PC3細(xì)胞存活率分別為20.85%與16.61%。PC3細(xì)胞與Tf-USPION溶液共培養(yǎng)12 h,經(jīng)近紅外激光照射10 min,通過(guò)激光顯微鏡觀察到,PC3細(xì)胞絕大部分發(fā)紅色熒光,僅觀察到個(gè)別綠色細(xì)胞,PC3細(xì)胞顯著死亡。(6)荷瘤裸鼠經(jīng)鼠尾靜脈注射靶向納米探針Tf-USPION,腫瘤組織的信號(hào)強(qiáng)度隨時(shí)間延長(zhǎng)而降低,持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。結(jié)論:本研究制備的納米探針Tf-USPION合成方法簡(jiǎn)便,生物相容性良好,對(duì)前列腺癌細(xì)胞的MR成像和PTT效果較好,可實(shí)現(xiàn)在體前列腺癌靶向MR成像。為前列腺癌的診斷與治療提供了新的研究思路,為腫瘤診療一體化研究提供了可靠依據(jù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R737.25;R445.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 張小娟;李文星;;用于腫瘤光熱治療的納米材料研究進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志;2016年08期

2 彭虹;閔朋;江廣斌;;分子探針Tf-SPION在肝癌早期介入治療中的應(yīng)用分析[J];臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2016年02期

3 Guissi Fida;呂麗偉;韓智豪;顧月清;;納米物質(zhì)在腫瘤光熱治療及藥物可控釋放中的應(yīng)用[J];藥物生物技術(shù);2015年06期

4 崔敬敬;金光玉;夏雷;全姬善;;超順磁性氧化鐵納米粒在磁共振成像和藥物傳遞系統(tǒng)中的應(yīng)用[J];國(guó)際藥學(xué)研究雜志;2015年05期

5 柳帥;劉潔;楊亞妮;何軍;;抗體修飾納米載體表面構(gòu)建主動(dòng)靶向制劑常用偶聯(lián)方法[J];中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志;2015年04期

6 葉定偉;朱耀;;中國(guó)前列腺癌的流行病學(xué)概述和啟示[J];中華外科雜志;2015年04期

7 韓蘇軍;張思維;陳萬(wàn)青;李長(zhǎng)嶺;;中國(guó)前列腺癌發(fā)病現(xiàn)狀和流行趨勢(shì)分析[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2013年04期

8 范校周;郭燕麗;;前列腺癌的分子影像學(xué)進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2013年01期

9 錢瑩;龍國(guó)賢;劉東伯;胡國(guó)清;;靶向納米造影劑C225-USPIO標(biāo)記裸鼠鼻咽癌移植瘤MR成像研究[J];中國(guó)腫瘤臨床;2012年24期

10 劉光臻;馬俊平;劉家強(qiáng);;Photothermal Effect for Fe_3O_4 Nanoparticles Contained in Micelles Induced by Near-Infrared Light[J];Journal of Shanghai Jiaotong University(Science);2012年06期

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本文編號(hào)：2380547