本文選題：DNA損傷　切入點：核磁共振氫譜　出處：《山東大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：研究目的:應(yīng)用離體型高分辨率核磁共振氫譜檢測腦膠質(zhì)瘤細胞系(C6、U87及U251)經(jīng)不同劑量X線(OGy、1Gy、5Gy、1OGy及15Gy)照射后的代謝物變化,并初步探討代謝物變化與DNA損傷之間的相關(guān)關(guān)系。研究方法:選擇臨床實驗常用腦膠質(zhì)瘤細胞系(C6、U87及U251)為研究對象,分別分成5個照射劑量(OGy、1Gy、5Gy、1OGy及15Gy)進行X線照射,OGy設(shè)為對照組,1Gy、5Gy、1OGy及15Gy設(shè)為實驗組,照射后細胞繼續(xù)培養(yǎng)24小時。將每個劑量的細胞隨機分為5組,第1組利用單細胞凝膠電泳實驗進行DNA損傷檢測,檢測指標(biāo)為尾長(taillength)、彗尾中DNA含量(TDNA)、尾矩(tail moment);第2組利用流式細胞儀檢測多個照射劑量下的細胞周期分布情況;第3組利用流式細胞儀檢測不同照射劑量下的細胞凋亡率;第4組利用集落形成實驗統(tǒng)計集落形成率,并利用單擊-多靶模型繪制細胞存活曲線,從而得出放射敏感性參數(shù),比較不同細胞系之間的放射敏感性大小;第5組利用高分辨率核磁共振氫譜檢測不同劑量X線照射后的代謝物變化。采集到的核磁共振氫譜數(shù)據(jù)利用軟件MestRenova進行分析,多組間比較采用單因素方差分析,兩組間比較采用/檢驗。研究結(jié)果:1.DNA損傷:與對照組相比,各實驗組照射后,彗尾逐漸延長,DNA損傷明顯加重(C6,P0.01;U87,P0.05;U251,P0.01),并隨著照射劑量的增加,DNA損傷具有劑量依賴效應(yīng)。2.細胞周期分布:與對照組相比,當(dāng)照射劑量為1Gy時,三種細胞系G1期所占百分比顯著增加(C6,P0.05;U87,P0.01;U251,P0.01);隨著照射劑量繼續(xù)增加為5、10及15Gy時,G1所占百分比C6呈增加趨勢(1Gy vs.5Gy,P0.05;5Gy vs.10Gy,P0.05;10Gy vs.15Gy,P0.05),U87及 U251 呈下降趨勢(U87:1Gy vs.5Gy,P0.05;5Gy vs.10Gy,P0.05;1OGy vs.15Gy,P0.05.U251:1Gy vs.5Gy,P0.01;5Gyvs.1OGy,P0.01;1OGyvs.15Gy,P0.01)。3.細胞凋亡率變化:相比于對照組,各實驗組細胞凋亡率顯著增加(C6,P0.01;U87,P0.01;U251,P0.01);各相鄰組間比較時,C6及U87呈緩慢增加趨勢(C6,P0.01;U87,P0.05),U251 呈現(xiàn)出先快(OGy vs.1Gy,P0.01)后慢(1Gy vs.5Gy,P0.05;5Gy vs.10Gy,P0.01;1OGyvs.15Gy,P0.05)的增加趨勢。4.集落形成實驗:與對照組相比,各實驗組集落形成率明顯降低(C6,P0.01;U87,P0.01;U251,P0.01)。各實驗組組間比較可得:1Gyvs.5Gy,三種細胞系P值均0.01;5Gyvs.10Gy,C6 和 U251 的 P 值0.01,U87 的P值0.05;1OGyvs.15Gy,C6 的P值0.01,U87 和 U251 的P值0.05。5.細胞放射敏感性大小比較:細胞存活曲線擬合結(jié)果顯示,三種細胞系(C6、U251及U87)的SF2(照射劑量為2Gy時的細胞存活分?jǐn)?shù))值分別為0.557、0.456及0.148,U87的放射敏感性大于U251,U251的放射敏感性大于C6。6.細胞內(nèi)代謝物改變:照射劑量由OGy增加為1Gy、5Gy、10Gy、15Gy的過程中,代謝物比值Lac/Cr和Suc/Cr逐漸減少(C6和U87,P0.05;U251,P0.01),Cho/Cr逐漸增加(C6和U87,P0.05;U251,P0.01),與DNA損傷參數(shù)(尾長、TDNA、尾矩)呈線性相關(guān)關(guān)系(0.783R20.996)。結(jié)論:離體型高分辨率核磁共振氫譜檢測得出,腦膠質(zhì)瘤細胞系(C6、U87及U251)放療后Lac/Cr、Suc/Cr及Cho/Cr比值變化與腫瘤細胞DNA損傷存在明顯相關(guān)性,高分辨率核磁共振氫譜作為一種無創(chuàng)性檢測方法可以預(yù)測腦膠質(zhì)瘤細胞系放療后的DNA損傷。
[Abstract]:Objective : To study the changes of metabolites in human glioma cell lines ( C6 , U87 and U251 ) after irradiation with different doses of X - ray ( OGy , 1Gy , 5Gy , 1OGy and 15Gy ) . Compared with the control group , the apoptosis rate of the cells increased significantly ( C6 , P0.01 , U87 , P0.01 ; U251 , P 0.01 ; U251 : 1Gy vs . 15Gy , P0.01 ) . Compared with the control group , the rate of colony formation in each experimental group decreased significantly ( C6 , P0.01 , U87 , P0.01 ; U251 , P0.01 ) . The results showed that the ratios of Lac / Cr and Suc / Cr decreased gradually ( C6 and U87 , P0.05 ; U251 , P0.01 ) , Cho / Cr increased ( C6 and U87 , P0.05 ; U251 , P0.01 ) .

【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R739.41;R445.2

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