發(fā)布時(shí)間：2018-03-27 19:48

  本文選題：細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換　切入點(diǎn)：LncRNA-ATB　出處：《解放軍醫(yī)學(xué)雜志》2017年11期

【摘要】：目的探討長鏈非編碼RNA-ATB(Lnc RNA-ATB)在高糖刺激誘導(dǎo)的人腹膜間皮細(xì)胞(HPMCs)表型轉(zhuǎn)換及增殖中的作用。方法將HPMCs分為對照組、甘露醇組和高糖組3組。對照組不予任何處理;高糖組和甘露醇組分別采用50mmol/L D型葡萄糖和同等滲透壓的甘露醇刺激72h。采用Real-time PCR檢測各組Lnc RNA-ATB、E-鈣黏素(E-cadherin)、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、結(jié)締組織生長因子(CTGF)、細(xì)胞周期素D1(Cyclin D1)、細(xì)胞周期蛋白依賴激酶抑制因子4(CDK4)、蛋白質(zhì)p27(p27)及增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)m RNA的表達(dá),Western blotting檢測各組E-cadherin、α-SMA、CTGF、Cyclin D1、CDK4、p27及PCNA蛋白的表達(dá),并采用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期。利用慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù),將Lenti-Lnc RNA-ATB和sh RNA-Lnc RNA-ATB導(dǎo)入HPMCs中,分別上調(diào)及下調(diào)Lnc RNA-ATB的表達(dá),采用Real-time PCR檢測E-cadherin、α-SMA及CTGF m RNA的表達(dá),Western blotting檢測E-cadherin、α-SMA、CTGF蛋白的表達(dá),流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期。結(jié)果 Real-time PCR、Western blotting及流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示,高糖刺激后,Lnc RNA-ATB、α-SMA、CTGF、Cyclin D1、CDK4及PCNA表達(dá)增加,E-cadherin及p27表達(dá)減少(P0.05)。上調(diào)Lnc RNAATB表達(dá)可促進(jìn)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換及增殖,下調(diào)Lnc RNA-ATB表達(dá)可抑制細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換及增殖。結(jié)論高糖刺激可通過上調(diào)Lnc RNA-ATB的表達(dá)促進(jìn)人腹膜間皮細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換及增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the role of long chain noncoding RNA-ATB(Lnc RNA-ATB in the phenotypic transformation and proliferation of human peritoneal mesothelial cells stimulated by high glucose. Methods HPMCs was divided into three groups: control group, mannitol group and high glucose group. The high glucose group and mannitol group were stimulated with 50mmol/L D glucose and mannitol for 72 h, respectively. The Lnc RNA-ATBU E-cadherin, 偽 -SMAG (偽 -SMAN), D1(Cyclin D1 (cyclin D 1), D1(Cyclin D 1 (Cyclin D 1) were detected by Real-time PCR in each group. The expression of cyclin dependent kinase inhibitor (p27p27) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA RNA) was detected by Western blotting to detect the expression of E-cadherin, 偽 -SMA-CTGFGFCF-Cyclin D1, CDK4p27 and PCNA protein in each group. The cell cycle was detected by flow cytometry. Lenti-Lnc RNA-ATB and sh RNA-Lnc RNA-ATB were transfected into HPMCs with lentivirus transfection technique. The expression of Lnc RNA-ATB was up-regulated and down-regulated, respectively. E-cadherin, 偽 -SMA and CTGF m RNA were detected by Real-time PCR and E-cadherin and 偽 -SMACTGF were detected by Western blotting. Results Real-time PCR Western blotting and flow cytometry showed that the expression of Lnc RNA-ATB, 偽 -SMA-CTGFGFCyclin D1 CDK4 and PCNA increased after high glucose stimulation, and the expression of E-cadherin and p27 decreased. Upregulating the expression of Lnc RNAATB could promote the phenotypic transformation and proliferation of the cells. Conclusion High glucose stimulation can promote the phenotypic transformation and proliferation of human peritoneal mesothelial cells by up-regulating the expression of Lnc RNA-ATB.
【作者單位】： 解放軍273醫(yī)院內(nèi)三科;武警克州支隊(duì)衛(wèi)生隊(duì);空軍廣州天河干休所;空軍95269部隊(duì)53分隊(duì)保健科;空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院腎臟內(nèi)科;
【分類號(hào)】：R459.5

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本文編號(hào)：1672983