幼年新西蘭白兔損傷關(guān)節(jié)軟骨與軟骨下骨再生修復(fù)相關(guān)因子的基因克隆與功能研
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第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文7幼年新西蘭白兔損傷關(guān)節(jié)軟骨與軟骨下骨再生修復(fù)相關(guān)因子的基因克隆與功能研究摘要研究背景:關(guān)節(jié)損傷后的治療非常困難,是骨科臨床面臨的難題,關(guān)節(jié)損傷后難以修復(fù)及功能恢復(fù)的關(guān)鍵原因是:關(guān)節(jié)軟骨不能很好的修復(fù),在損傷關(guān)節(jié)軟骨表面尚無(wú)有效方法再生透明軟骨層。文獻(xiàn)報(bào)道,幼年新西蘭白兔關(guān)節(jié)軟骨損傷后能夠接近完全再生,修復(fù)組織中透明軟骨超過(guò) 80%,修復(fù)組織的機(jī)械性能和耐久度接近正常的關(guān)節(jié)軟骨,而成年新西蘭白兔在關(guān)節(jié)軟骨損傷部位只能形成纖維瘢痕修復(fù),修復(fù)組織透明軟骨含量低。這種修復(fù)的差異,推測(cè)是因?yàn)樵趽p傷部位存在著與修復(fù)相關(guān)的基因表達(dá)差異。以具有軟骨再生能力的動(dòng)物為模型,尋找并研究損傷部位局部早期的基因表達(dá),有可能發(fā)現(xiàn)關(guān)節(jié)損傷后再生修復(fù)的重要基因,進(jìn)一步研究目標(biāo)基因的功能,具有重要意義和價(jià)值。目的:利用抑制性消減雜交技術(shù)構(gòu)建幼年新西蘭白兔膝關(guān)節(jié)損傷后修復(fù)組織差異表達(dá)基因文庫(kù),并通過(guò)測(cè)序、生物信息學(xué)檢索篩選膝關(guān)節(jié)損傷后修復(fù)相關(guān)基因,并進(jìn)一步通過(guò) RACE 技術(shù)克隆未報(bào)到基因全長(zhǎng)基因序列,進(jìn)行蛋白表達(dá)、純化并初步研究其對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞增值及形態(tài)學(xué)的影響。方法:采用一步法和植物 RNA 提取方法相結(jié)合,提取關(guān)節(jié)損傷修復(fù)組織...
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本文編號(hào):186969
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