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3D打印聚乳酸納米纖維支架與軟骨細(xì)胞交聯(lián)體對(duì)大鼠軟骨基質(zhì)損傷修復(fù)的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-14 12:50
  背景:軟骨再生是骨科醫(yī)學(xué)中的重大挑戰(zhàn),而3D打印組織工程技術(shù)為軟骨基質(zhì)損傷修復(fù)提供了一個(gè)可選擇的方法。3D打印聚乳酸(PLA)支架組織及相應(yīng)新生軟骨組織在體內(nèi)的演變過程尚無專門研究。方法:使用3D打印技術(shù)打印聚乳酸納米纖維支架并觀察其微觀結(jié)構(gòu),將培養(yǎng)的大鼠軟骨細(xì)胞交聯(lián)于支架上,觀察支架及交聯(lián)物的微觀形態(tài)。通過免疫熒光,甲苯胺藍(lán)染色和番紅染色觀察軟骨細(xì)胞在支架上的形態(tài),通過免疫熒光和qPCR評(píng)估交聯(lián)軟骨細(xì)胞后F-肌動(dòng)蛋白、I型膠原蛋白和聚集蛋白聚糖相關(guān)表達(dá)情況確定細(xì)胞功能。將20只8周齡大鼠隨機(jī)分成2組,在軟骨鉆孔模型建立后,將交聯(lián)軟骨細(xì)胞的3D打印聚乳酸納米纖維支架移植到大鼠雙膝,分別在4周和8周處死相應(yīng)組的大鼠,取標(biāo)本并通過偏光顯微鏡,傅里葉紅外光譜分析,免疫熒光染色,甲苯胺藍(lán)染色,番紅染色和免疫組化等手段觀察新生軟骨增殖表達(dá)情況及打印組織分解情況。結(jié)果:3D打印支架鏡下觀察呈網(wǎng)格狀。交聯(lián)軟骨細(xì)胞后染色見軟骨細(xì)胞在支架上定植,形態(tài)可。免疫熒光提示第7天細(xì)胞形態(tài)呈圓形,排列更有序。F-肌動(dòng)蛋白的表達(dá)在第5天和第7天有增加。聚集蛋白聚糖和I型膠原蛋白的編碼基因相對(duì)定量PCR顯示其表達(dá)在第... 

【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:53 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

3D打印聚乳酸納米纖維支架與軟骨細(xì)胞交聯(lián)體對(duì)大鼠軟骨基質(zhì)損傷修復(fù)的研究


圖2在3D打印PLA納米纖維支架中附著軟骨細(xì)胞后的染色結(jié)果??

3D打印聚乳酸納米纖維支架與軟骨細(xì)胞交聯(lián)體對(duì)大鼠軟骨基質(zhì)損傷修復(fù)的研究


圖3??17細(xì)

3D打印聚乳酸納米纖維支架與軟骨細(xì)胞交聯(lián)體對(duì)大鼠軟骨基質(zhì)損傷修復(fù)的研究


圖4??A在軟骨鉆孔模型建立后,將3D打印組織分別移植到雙膝的軟骨組織中央


本文編號(hào):3082209

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