本文關(guān)鍵詞：檸檬酸來(lái)源的成骨誘導(dǎo)支架促進(jìn)大鼠顱骨骨缺損再生的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《南方醫(yī)科大學(xué)》 2014年

檸檬酸來(lái)源的成骨誘導(dǎo)支架促進(jìn)大鼠顱骨骨缺損再生的研究

孫大煒  

【摘要】：一、研究背景 全世界目前每年已經(jīng)有超過(guò)220萬(wàn)例骨移植手術(shù),手術(shù)領(lǐng)域包括骨科、神經(jīng)外科和牙科。由于自體骨移植具有良好的成骨誘導(dǎo)作用,自體骨移植被認(rèn)為是骨移植手術(shù)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。然而,自體骨移植供區(qū)可產(chǎn)生相關(guān)并發(fā)癥,如供區(qū)血腫形成、軟組織損傷、疼痛及恢復(fù)期延長(zhǎng)等,此外,自體骨移植是嚴(yán)重骨質(zhì)疏松癥患者的禁忌癥。因此,研發(fā)出完全合成的、易得的,且具有成骨誘導(dǎo)作用的人工合成材料作為自體骨移植的輔助材料是目前的研究熱點(diǎn),理想的人工材料研發(fā)成功也將會(huì)是臨床領(lǐng)域的里程碑事件。 在合成骨生物材料領(lǐng)域,合成材料已經(jīng)從使用永久性的、內(nèi)置金屬材料向模擬天然骨成分的組織工程、生物可降解材料轉(zhuǎn)化。生物可降解材料方面,最初合成的骨生物材料是生物陶瓷,即磷酸鈣(calcium phosphates；CaPs)和β-磷酸三鈣(beta tricalcium phosphate；TCP),這兩種材料具有模擬骨組織礦化結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)。盡管這兩種人工合成材料仿生及成骨方面與人體骨骼的多空結(jié)構(gòu)相差甚遠(yuǎn),而且這兩種材料本身材料的脆性以及極其緩慢的降解率,均限制了它們?cè)谂R床的應(yīng)用。為了改進(jìn)上述生物陶瓷的缺點(diǎn),人們已經(jīng)在生物陶瓷中參雜可降解的多聚體,以增加其機(jī)械性能及生物活性,使人工材料最終能達(dá)到臨床應(yīng)用。雖然如此,目前合成材料仍有許多顯著的不足之處,諸如機(jī)械強(qiáng)度不足,無(wú)誘導(dǎo)骨再生作用,骨整合作用弱,并且不能模仿天然骨的理化結(jié)構(gòu),尤其是天然骨膠原基質(zhì)中含有60-65%質(zhì)量的羥基磷灰石。 為了改善人工骨材料的缺陷,我們的實(shí)驗(yàn)室關(guān)注于研制基于檸檬酸人工合成材料與生物陶瓷合成材料,用于骨組織工程中。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),檸檬酸作為三羧酸循環(huán)中的中間產(chǎn)物可能在骨發(fā)育和骨生物材料發(fā)展中起非常重要的作用。天然骨組織中含有大量的檸檬酸,并且檸檬酸在骨代謝中具有重要的作用,因此在骨生物材料及支架的設(shè)計(jì)中應(yīng)當(dāng)考慮到檸檬酸的應(yīng)用。檸檬酸不僅僅是骨鈣的增溶劑,而且近來(lái)發(fā)現(xiàn)檸檬酸在骨納米結(jié)構(gòu)的組成中調(diào)節(jié)羥基磷灰石納米晶體的形成。盡管檸檬酸在骨形成作用方面的研究只是一個(gè)開(kāi)始,不過(guò)我們近期關(guān)于外源性檸檬酸的研究取得了鼓舞人心的結(jié)果,我們?cè)诨跈幟仕岬囊浦参锏捏w內(nèi)研究中或把檸檬酸加入培養(yǎng)基中的體外研究中發(fā)現(xiàn),檸檬酸均能增加堿性磷酸酶(ALP)基因和成骨細(xì)胞特異基因osterix (OSX)的表達(dá),成骨細(xì)胞表形增加以及出現(xiàn)基于檸檬酸的移植物骨誘導(dǎo)及骨整合作用。 如上所述,基于檸檬酸多聚體/羥基磷灰石復(fù)合物(CABP-HAs)是一種新型的骨生物活性材料,這種材料在骨組織工程應(yīng)用中具有明顯的優(yōu)勢(shì)。第一個(gè)被報(bào)道的基于檸檬酸的復(fù)合材料是poly(1,8-octanediol)-HA (POC-HA), POC是一種人工合成、成本低、無(wú)毒性的單體,通過(guò)自由羧基鍵的鈣螯合能力展現(xiàn)出與HA更強(qiáng)的整合能力。POC具有大量的羧基化學(xué)鍵,能提供65%重量HA的結(jié)合,達(dá)到天然骨的HA含量,這種特性是之前所有人工材料都達(dá)不到的。從POC-HA研制開(kāi)始,我們實(shí)驗(yàn)室一直從事于基于檸檬酸可降解多聚體的研究,如力學(xué)性能強(qiáng)的crosslinked urethane-doped polyesters (CUPEs), biodegradable photoluminescent polymers (BPLPs), dual-crosslinkable poly (alkylene maleate citrate)(PAMC),以及clickable POC-based elastomers (POC-Click),這些基于檸檬酸的生物可降解材料用于多種醫(yī)學(xué)用途,用于骨骼、血管、神經(jīng)組織工程,腫瘤影像學(xué)和藥物輸送中。為了進(jìn)一步改善POC-HA的機(jī)械性能,我們通過(guò)加入聚氨酯鍵得至CUPE-HA復(fù)合物,使得CUPE-HA復(fù)合物達(dá)到突破性的抗壓強(qiáng)度116.23±65.37MPa,雖然這種抗壓強(qiáng)度仍遜于人體皮質(zhì)骨的抗壓強(qiáng)度(100-230MPa)。盡管CUPE-HA在兔股骨外側(cè)髁缺損模型中,移植缺損處表現(xiàn)出極微的慢性炎癥反應(yīng)和很強(qiáng)的骨誘導(dǎo)性,但是這種材料參雜聚氨酯鍵的設(shè)計(jì)丟失了有用的羧基側(cè)化學(xué)鍵,進(jìn)而也失去了螯合羥基磷灰石的能力,進(jìn)而使得材料的生物力學(xué)強(qiáng)度下降。為了改善上述缺點(diǎn),我們近期研發(fā)了clickable biodegradable elastomer,即poly (octanediol citrate)-click (POC-Click),這種新材料增加了疊氮-炔環(huán)加成反應(yīng)(click化學(xué)反應(yīng)),新增的交聯(lián)機(jī)理增加了材料的機(jī)械強(qiáng)度又保持了結(jié)合羥基磷灰石(HA)螯合鈣的羧基側(cè)化學(xué)鍵。 以上敘述了基于檸檬酸的生物活性材料特性可以滿足骨生物降解材料的設(shè)計(jì)機(jī)械強(qiáng)度,骨傳導(dǎo)性(osteocondutive)和骨誘導(dǎo)性(osteoinductive),但是這種新型骨生物材料目前仍局限于固態(tài)非孔性移植物的研究,也沒(méi)有修復(fù)顱骨骨缺損的相關(guān)研究。本研究中,我們合成CUPE-HA和POC-Click-HA多空支架,用于修復(fù)大鼠顱骨極限骨缺損(critical sized cranial defects)。 二、材料與方法 1.基于檸檬酸生物可降解支架材料的制作 1.1POC預(yù)聚物和CUPE預(yù)聚物的合成 1.2合成多孔的POC-CLICK-HA和CUPE-HA基于檸檬酸生物可降解盤(pán)形支架 2.掃描電鏡觀察POC-CLICK-HA和CUPE-HA支架結(jié)構(gòu) 3、Sprague Dawley (SD)大鼠自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)與基于檸檬酸的生物可降解支架共培養(yǎng) BMSCs的分離采用密度梯度離心法。經(jīng)過(guò)Co60消毒盤(pán)形的基于檸檬酸的生物可降解支架使用前浸泡于MEM/10%FBS3小時(shí),使得材料孔隙水化、材料孔隙表面充分吸收粘附蛋白,以利于接種的BMSCs在材料表面粘附生長(zhǎng)。將上述處理的支架移入培養(yǎng)皿中,用移液器在材料上加入密度為1×106的第三代BMSC混懸液,將所接種BMSCs的支架在37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)飽和濕度條件下培養(yǎng)5天。掃描電鏡觀察BMSCs在支架上的生物相容性。 4、大鼠顱骨骨缺損動(dòng)物模型的制作及分組 8周齡SPF級(jí)Sprague Dawley雄性大鼠74只(其中2只用于SD大鼠自體BMSCs取材,72只用于體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)),購(gòu)于南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。我們用不添加任何生長(zhǎng)因子或細(xì)胞成分的CABP-HA盤(pán)型支架(65%質(zhì)量HA含量；70%孔隙率)去修復(fù)大鼠顱骨骨缺損(n=72,每組18只),隨機(jī)分為四組：骨缺損未修復(fù)組(對(duì)照組)、CUPE-HA支架治療組(CUPE-HA組)、POC-Click-HA支架治療組(POC-CLICK-HA組),以及自體骨移植組(AB組)。顱骨骨缺損造模術(shù)后1月、3月及6月取標(biāo)本。 5.將4%多聚甲醛固定好的大鼠顱骨標(biāo)本,送至廣東中科愷盛醫(yī)療科技有限公司,使用該公司顯微CT成像系統(tǒng)進(jìn)行斷層掃描成像,掃描軟件三維重建、拍攝照片,骨分析軟件計(jì)算顱骨缺損處與正常顱骨交界區(qū)環(huán)形骨定量分析。 6.將標(biāo)本脫鈣切片,行骨組織學(xué)染色分析及免疫組化染色分析,并行形態(tài)計(jì)量學(xué)分析骨缺損處的血管計(jì)數(shù)。 7.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用IBM SPSS Statistics20統(tǒng)計(jì)軟件分析處理。計(jì)量資料統(tǒng)計(jì)描述用均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差(mean、SD)表示。不同組間術(shù)后3個(gè)時(shí)間點(diǎn)的比較采用Two-Way ANOVA檢驗(yàn)。單獨(dú)效應(yīng)分析采用One-Way ANOVA檢驗(yàn),方差不齊時(shí)使用Welch檢驗(yàn)結(jié)果。兩兩比較方差齊時(shí)采用LSD法,方差不齊時(shí)使用Games-Howell法。顯著性標(biāo)準(zhǔn)為a=0.05。 三、結(jié)果 1、CABP-HA支架掃描電鏡評(píng)價(jià) 本實(shí)驗(yàn)中合成的CUPE-HA和POC-Click-HA盤(pán)形支架掃描電鏡可見(jiàn)多空的支架平均孔徑大小為200-400μm的立方體結(jié)構(gòu),兩者結(jié)構(gòu)相似,50倍掃描電鏡下,CUPE-HA支架結(jié)構(gòu)較POC-CLICK-HA支架結(jié)構(gòu)略微疏松。 體外實(shí)驗(yàn)中大鼠BMSCs種植于CUPE-HA和POC-Click-HA盤(pán)形支架,共培養(yǎng)5天后,可見(jiàn)BMSCs健康貼于支架上生長(zhǎng)。 2.顱骨骨缺損新骨形成分析 造模術(shù)后1月,3月和6月,3D micro-CT觀察顱骨骨缺損處新骨形成。影像學(xué)可見(jiàn)非材料移植組(CON組和AB組)與CABP-HA材料移植組(CUPE-HA組和POC-Click-HA組)有明顯的不同。在未治療組(CON組)中,術(shù)后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均沒(méi)有完全骨形成,只有缺損處邊緣有少量的骨形成,這也證明4mm的大鼠顱骨骨缺損模型符合極限骨缺損模型(CSD)模型。新骨形成最明顯的仍然是自體骨移植組(AB組),術(shù)后6月,達(dá)到臨床骨愈合的標(biāo)準(zhǔn)。在兩個(gè)基于檸檬算骨生物材料組中均可見(jiàn)不透X線的組織廣泛填充于顱骨缺損處,這暗示了新骨形成,其中CUPE-HA組較POC-Click-HA組新骨形成更加明顯。 進(jìn)一步micro-CT骨形成定量分析,我們選取顱骨缺損的環(huán)形邊緣為新生礦化顱骨定量分析的關(guān)注區(qū)域(VOI the volume of interest)。根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析,AB組中新骨形成顯著高于其它各組,與非治療組(CON組)相比較,支架修復(fù)的兩組展現(xiàn)出良好的修復(fù)效果,不過(guò)這種修復(fù)效果仍不如自體骨移植組。術(shù)后1月,3月和6月,AB組的BMD值均顯著高于其它各組(F=24.526,P=0.016),而且術(shù)后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)CUPE-HA組和POC-Click-HA組這兩個(gè)支架修復(fù)組的BMD均高于CON組。所測(cè)得的Tb.Th值結(jié)果與BMD值結(jié)果也表現(xiàn)出同樣的趨勢(shì)。CUPE-HA組和POC-Click-HA組兩種支架組之間,BMD值與Tb.Th值各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(p0.05) 3.組織學(xué)分析 從缺損處組織學(xué)的結(jié)果來(lái)看,CUPE-HA組和POC-Click-HA組兩個(gè)材料組與自體骨移植治療組(AB組)相似。特別是兩個(gè)材料組治療的顱骨缺損邊緣可見(jiàn)纖維間質(zhì)增生和反應(yīng)性成骨。纖維間質(zhì)圍繞支架處增生,表現(xiàn)出相對(duì)血管形成增多；未治療組(CON組)纖維間質(zhì)增生少于與這兩個(gè)材料組,也少于自體骨移植組。 造模1月,3月和6月后,VEGF-b免疫組化染色結(jié)果示,未治療組幾乎沒(méi)有成纖維細(xì)胞和炎性細(xì)胞,與其他各治療組相比較,VEGF-b免疫組化染色低表達(dá)。相反的是,在CUPE-HA組和POC-Click-HA組中,可見(jiàn)VEGF-b免疫組化高表達(dá),并且與AB組的免疫組化染色表達(dá)相似,尤其是術(shù)后1月組的VEGF-b免疫組化結(jié)果。造模1月,3月和6月后,各組缺損處的血管計(jì)數(shù)結(jié)果形態(tài)計(jì)量學(xué)分析示,兩種基于檸檬酸的生物可降解支架治療組有較多的成血管數(shù)量,其中術(shù)后1月時(shí)間點(diǎn),CUPE-HA組的成血管數(shù)量顯著高于AB組和POC-CLICK-HA組。(P=0.049)術(shù)后3月和6月時(shí)間點(diǎn),各組血管血管數(shù)均無(wú)著性不同。(P=0.261；P=0.187) 造模1月,3月和6月后,堿性磷酸酶(ALP)特染和骨鈣素(OCN)免疫組化染色結(jié)果示,在CUPE-HA組和POC-Click-HA組材料中,可見(jiàn)ALP陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá),以及OCN免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá),并且與AB組的免疫組化染色表達(dá)相似。 四、結(jié)論 我們認(rèn)為,大鼠極限骨缺損模型適合驗(yàn)證高孔隙率支架的成骨效果；基于檸檬酸多聚體羥基磷灰石復(fù)合物盤(pán)狀支架適合于修復(fù)大鼠顱骨極限骨缺損；無(wú)需復(fù)合生物生長(zhǎng)因子或成骨細(xì)胞, POC-Click-HA和CUPE-HA支架均能通過(guò)誘導(dǎo)顱骨缺損處骨形成和血管形成而表現(xiàn)出理想的宿主反應(yīng)和潛在成骨作用。因此,基于檸檬酸多聚體羥基磷灰石復(fù)合物支架是一種有應(yīng)用前景的即用移植材料,該材料可做為骨缺損的填充修復(fù)材料。 骨性關(guān)節(jié)炎(OA)是世界范圍內(nèi)最為常見(jiàn)的退行性骨科疾病,發(fā)病率極高。伴隨著人口老齡化,骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率也逐年上升。近年,據(jù)經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)估,關(guān)節(jié)炎發(fā)病這一單一因素可造成國(guó)內(nèi)生產(chǎn)總值(GDP)0.5-1%的下滑,如何有效的治療,預(yù)防骨性關(guān)節(jié)炎一直以來(lái)是醫(yī)學(xué)研究的難題之一。過(guò)去,在OA的發(fā)病過(guò)程中,主要的研究熱點(diǎn)集中于關(guān)節(jié)軟骨血管增生,滑膜入侵,軟骨細(xì)胞內(nèi)的線粒體自噬。然而,血管增生,滑膜入侵,線粒體自噬發(fā)生時(shí)已出現(xiàn)軟骨丟失。因此,針對(duì)這三點(diǎn)的研究,并不能達(dá)到提前保護(hù)軟骨的目的。 軟骨下骨是介于軟骨下與骨基質(zhì)區(qū)之間的一層松質(zhì)骨,較早便有報(bào)道在骨性關(guān)節(jié)炎病患的尸檢病理切片中,發(fā)現(xiàn)患者膝關(guān)節(jié)的軟骨下骨排列異常。而在骨性關(guān)節(jié)炎患者的MRI檢查時(shí),也發(fā)現(xiàn)一定病例出現(xiàn)軟骨下骨的異常增生。目前認(rèn)為骨性關(guān)節(jié)炎早期,由于應(yīng)力改變,軟骨下骨會(huì)出現(xiàn)病理性增生,而這一改變的來(lái)源,并未被清楚的闡述。 哺乳動(dòng)物雷帕霉素特異性靶標(biāo)(mTOR)信號(hào)通路自發(fā)現(xiàn)以來(lái),被認(rèn)為是調(diào)控哺乳動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育,能量代謝的重要信號(hào)通路。mTOR信號(hào)通路中,有兩種關(guān)鍵的蛋白復(fù)合體,mtorc1與mtorc2。mtorc1是雷帕霉素敏感復(fù)合物,體內(nèi)可被諸多生長(zhǎng)因子激活,調(diào)控能量代謝。 本研究將重點(diǎn)討論軟骨下骨mTOR信號(hào)通路的活性與骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病病理的重要關(guān)系。探討mTOR信號(hào)通路可能在骨性關(guān)節(jié)炎中的扮演的重要調(diào)控角色。以mTOR信號(hào)通路為基礎(chǔ)為骨性關(guān)節(jié)炎尋找全新的治療靶點(diǎn)。 我們選取選取成年C57雄性小鼠20只,體重16-18g,行前交叉韌帶離斷模型做為骨性關(guān)節(jié)炎疾病模型,右膝關(guān)節(jié)為骨性關(guān)節(jié)炎組(OA group),左膝關(guān)節(jié)作為假手術(shù)(sham group)。造模后2周及1個(gè)月時(shí)間點(diǎn)處死老鼠。其中一個(gè)月時(shí)間點(diǎn)取材后脫鈣切片,進(jìn)行蘇木素-伊紅染色及甲苯胺藍(lán)染色確定模型建立的成敗,并評(píng)估大致病程。mTOR信號(hào)通路特異性靶蛋白磷酸化S6免疫組織化學(xué)染色評(píng)估早期(2周)骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨中mTOR信號(hào)通路的活性。堿性磷酸酶特異性染色評(píng)估骨性關(guān)節(jié)炎中軟骨下骨成骨細(xì)胞活性與骨性增生。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子免疫組織化學(xué)染色評(píng)估骨性關(guān)節(jié)炎中軟骨下骨及軟骨血管增生情況。 術(shù)后1月骨性關(guān)節(jié)炎造模發(fā)現(xiàn),出現(xiàn)了明顯的軟骨丟失。所有HE染色結(jié)果和甲苯胺藍(lán)染色均一穩(wěn)定。ACLT造�？杀徽J(rèn)為是一種穩(wěn)定的骨性關(guān)節(jié)炎造模方法。早期骨性關(guān)節(jié)炎可用ACLT一周結(jié)果進(jìn)行模式替代。與假手術(shù)組比較,骨性關(guān)節(jié)炎組軟骨下骨在早期出現(xiàn)了顯著的PS6活性增高,說(shuō)明mTOR信號(hào)通路在軟骨下骨的活化可能在骨性關(guān)節(jié)炎病程中扮演關(guān)鍵作用。同時(shí),骨性關(guān)節(jié)炎組的軟骨下骨出現(xiàn)了堿性磷酸酶活性與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的增強(qiáng)。暗示mTOR信號(hào)通路可能通過(guò)影響軟骨下骨的成骨與血管再生過(guò)程影響骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病過(guò)程。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R687
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3 宋曉平;竇忠英;雷安民;華進(jìn)聯(lián);楊學(xué)義;馬勇江;;小鼠成骨細(xì)胞條件培養(yǎng)基的制備[A];全國(guó)首屆動(dòng)物生物技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

4 陳鋮;常智杰;張淑平;趙曉初;趙南明;張秀芳;;骨髓基質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)與誘導(dǎo)分化[A];2000年材料科學(xué)與工程新進(jìn)展（上）——2000年中國(guó)材料研討會(huì)論文集[C];2000年

5 徐凌霄;張前德;;左歸丸對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞骨向分化中堿性磷酸酶含量的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)風(fēng)濕病分會(huì)2010年學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

6 馬勇;羅海玲;盧曉楠;;日糧能量和蛋白質(zhì)對(duì)反芻動(dòng)物繁殖機(jī)能影響的機(jī)理[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)養(yǎng)羊?qū)W分會(huì)2014年全國(guó)養(yǎng)羊生產(chǎn)與學(xué)術(shù)研討會(huì)議論文集[C];2014年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫斌;可注射溫敏殼聚糖/膠原/甘油磷酸鈉水凝膠應(yīng)用于骨組織工程的初步研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年

2 楊慶秋;云南白藥及主要成分骨形成作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

3 龔建文;從P38信號(hào)通路探討中藥骨康方對(duì)去勢(shì)大鼠MSCs成骨分化的機(jī)制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

4 董金磊;BMP-2基因轉(zhuǎn)染的MSCs復(fù)合nHAC/PLA支架修復(fù)骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2011年

5 孫德毅;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與骨誘導(dǎo)活性材料構(gòu)建組織工程骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2011年

6 彭謙;新型多孔磷酸鈣陶瓷支架構(gòu)建及其體內(nèi)培育大尺寸活體骨修復(fù)體[D];西南交通大學(xué);2010年

7 李洪偉;硅酸二鈣涂層離子溶液促進(jìn)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2011年

8 李喜功;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與退變髓核細(xì)胞體外共培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2011年

9 陳希哲;含孔磷酸鈣陶瓷為支架基因轉(zhuǎn)染自體細(xì)胞成骨能力研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

10 劉素榮;強(qiáng)腎膠囊治療糖尿病骨質(zhì)疏松癥的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2001年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 蔣建召;富血小板血漿復(fù)合自體濃縮紅骨髓促進(jìn)骨缺損愈合的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2010年

2 肖豐偉;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合異體骨治療骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2010年

3 黃家志;兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及誘導(dǎo)多向分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

4 賀晉棟;不同濃度瘦素對(duì)乳鼠成骨細(xì)胞增殖及VEGFmRNA表達(dá)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

5 干錦波;生物材料表面拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)、細(xì)胞相互作用的研究[D];武漢理工大學(xué);2011年

6 沈鋒;構(gòu)建BMSCs-慶大霉素—藻酸鈣三維緩釋微球的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

7 沈健堅(jiān);計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)、制作個(gè)性化骨缺損修復(fù)體的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

8 王長(zhǎng)軍;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與成骨細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng)對(duì)成骨細(xì)胞增殖的影響[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

9 裴方;Nucleostemin在大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化中的研究[D];華中科技大學(xué);2010年

10 楊婷;高氟對(duì)成釉細(xì)胞生物學(xué)特性影響的體外研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

【相似文獻(xiàn)】

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2 莫湘濤;骨組織工程支架材料的降解和生物力學(xué)特性[J];醫(yī)用生物力學(xué);2004年01期

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4 李洪鵬,許建中;動(dòng)力性三維培養(yǎng)大尺寸組織工程骨的方法學(xué)研究[J];中國(guó)臨床康復(fù);2004年35期

5 耿燕麗;阮孜煒;李東旭;;骨組織工程支架材料的研究進(jìn)展[J];材料導(dǎo)報(bào);2004年11期

6 鄧春富,譚學(xué)新,周青,黃紹輝,王玉新;兩種支架材料與頜下腺細(xì)胞體外復(fù)合培養(yǎng)的比較研究[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2005年05期

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2 張亞;王曉東;;細(xì)胞復(fù)合型絲素支架材料修復(fù)兔橈骨骨缺損[A];蘇州市自然科學(xué)優(yōu)秀學(xué)術(shù)論文匯編(2008-2009)[C];2010年

3 黃慶聰;;碗扣腳手架在現(xiàn)澆混凝土連續(xù)箱梁施工中的應(yīng)用[A];中國(guó)公路學(xué)會(huì)橋梁和結(jié)構(gòu)工程學(xué)會(huì)2002年全國(guó)橋梁學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2002年

4 匡世軍;張志光;何一青;蘇凱;;兔顳下頜關(guān)節(jié)盤(pán)纖維軟骨細(xì)胞與聚乳酸支架材料復(fù)合培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];第七次全國(guó)顳下頜關(guān)節(jié)病學(xué)及（牙合）學(xué)研討會(huì)暨《顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病及口頜面疼痛的基礎(chǔ)與臨床進(jìn)展》國(guó)家級(jí)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2008年

5 秦勝男;陳鴻輝;楊小紅;葉春婷;康寧;譚見(jiàn)容;戴麗冰;梁偉國(guó);;組織工程膠原海綿支架材料的制備及孔徑結(jié)構(gòu)分析[A];第七屆全國(guó)創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

6 吳彬杉;韓冬霏;秦斌;田天;張倩;;三維多孔支架材料及致孔相關(guān)性[A];中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第六次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2004年

7 任杰;;組織工程用支架材料研究進(jìn)展[A];2005年上海市醫(yī)用生物材料研討會(huì)論文匯編[C];2005年

8 朱曉海;江華;袁湘斌;趙耀忠;章建林;孫美慶;張盈帆;張文俊;林子豪;;1993～2006年間277例耳廓再造手術(shù)體會(huì)[A];第四屆華東六省一市整形外科學(xué)術(shù)會(huì)議暨2007年浙江省整形、美容學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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3 常秀梅;組織工程方法構(gòu)建牙周組織的實(shí)驗(yàn)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

4 田奇;膀胱移行上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)及其支架復(fù)合物的制備[D];吉林大學(xué);2007年

5 李瀟;DSCT對(duì)冠狀動(dòng)脈支架植入術(shù)后的評(píng)價(jià)[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2010年

6 胡順鵬;新型膠原真皮支架材料的制備與性能表征[D];山東大學(xué);2010年

7 陳義康;生物降解半互穿網(wǎng)絡(luò)聚合物的合成及其性能研究[D];暨南大學(xué);2005年

8 鄧倩瑩;緩釋溶菌酶納米微球/殼聚糖復(fù)合支架材料的制備及性能[D];暨南大學(xué);2006年

9 王宗良;細(xì)菌纖維素組織工程支架材料的制備及其應(yīng)用研究[D];吉林大學(xué);2008年

10 龔飛飛;無(wú)機(jī)活性誘導(dǎo)元素支架材料對(duì)頜骨缺損骨創(chuàng)面骨祖細(xì)胞的生物誘導(dǎo)作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2008年

  本文關(guān)鍵詞：檸檬酸來(lái)源的成骨誘導(dǎo)支架促進(jìn)大鼠顱骨骨缺損再生的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：143082