本文關(guān)鍵詞：環(huán)二鳥苷酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控結(jié)核桿菌休眠、生物膜發(fā)育和毒力，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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環(huán)二鳥苷酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控結(jié)核桿菌休眠、生物膜發(fā)育和毒力

     論文目錄

摘要第1-8頁

ABSTRACT第8-16頁

第一章 緒論第16-48頁

   ·結(jié)核病的危害與困境第16-17頁

   ·結(jié)核病的發(fā)病機(jī)理第17-20頁

     ·致病菌與傳播方式第17-18頁

     ·發(fā)病機(jī)理第18-20頁

   ·MTB的遺傳學(xué)基礎(chǔ)第20-21頁

   ·MTB重要致病因子第21-28頁

     ·脂和脂肪酸代謝基因第21-22頁

     ·氨基酸和嘌呤合成基因第22-23頁

     ·金屬攝取基因第23頁

     ·厭氧呼吸和氧化壓力蛋白第23-24頁

     ·轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子第24-25頁

     ·響應(yīng)調(diào)節(jié)因子第25-26頁

     ·其它毒力因子第26-28頁

   ·MTB潛伏感染與休眠第28-29頁

     ·潛伏感染與休眠第28頁

     ·Wayne厭氧模型第28-29頁

   ·三元信號(hào)系統(tǒng)DosR/DosS/DosT與休眠調(diào)控第29-36頁

     ·DosR系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)和組成第29-33頁

     ·有氧呼吸與休眠程序第33頁

     ·氧氣和氧化還原壓力感應(yīng)第33頁

     ·DosR系統(tǒng)作用機(jī)理第33-35頁

     ·休眠程序在巨噬細(xì)胞和動(dòng)物感染中的作用第35-36頁

   ·細(xì)菌核酸類胞內(nèi)二級(jí)信使第36-38頁

   ·C-di-GMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)第38-46頁

     ·C-di-GMP合成與降解第40頁

     ·C-di-GMP調(diào)控單元的信號(hào)輸入第40-41頁

     ·C-di-GMP受體介導(dǎo)信號(hào)傳遞第41-44頁

     ·c-di-GMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的靶標(biāo)和受其影響的胞內(nèi)過程第44-45頁

     ·GGDEF和EAL結(jié)構(gòu)域蛋白的多樣性第45頁

     ·C-di-GMP控制單元的時(shí)空隔離第45頁

     ·酶學(xué)失活的GGDEF和EAL蛋白第45-46頁

   ·本課題的研究目的第46頁

   ·本課題研究的技術(shù)路線第46-48頁

第二章 環(huán)二鳥苷酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控結(jié)核桿菌休眠、生物膜發(fā)育和毒力第48-102頁

   ·引言第48-49頁

   ·實(shí)驗(yàn)材料與方法第49-70頁

     ·實(shí)驗(yàn)菌株與載體第49-52頁

     ·實(shí)驗(yàn)所用引物第52-55頁

     ·試劑第55-56頁

     ·培養(yǎng)基第56-57頁

     ·主要儀器及材料第57-58頁

     ·實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞和動(dòng)物第58頁

     ·E.coli感受態(tài)細(xì)胞制備第58頁

     ·E.coli感受態(tài)熱擊轉(zhuǎn)化第58頁

     ·MTB基因組提取第58-59頁

     ·基因敲除質(zhì)粒構(gòu)建第59-60頁

     ·基因回補(bǔ)質(zhì)粒構(gòu)建第60頁

     ·MTB電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞制備第60-61頁

     ·基因敲除質(zhì)粒線性化第61頁

     ·基因敲除突變株構(gòu)建第61-62頁

     ·敲除突變株的基因回補(bǔ)第62-63頁

     ·MTB RNA抽提第63頁

     ·Microarray分析第63-64頁

     ·生物信息學(xué)預(yù)測基因功能第64頁

     ·RNA逆轉(zhuǎn)錄第64頁

     ·實(shí)時(shí)熒光定量PCR第64頁

     ·THP細(xì)胞感染實(shí)驗(yàn)第64-65頁

     ·小鼠感染模型第65頁

     ·脾肺臟切片與HE染色第65-66頁

     ·DNA染色和熒光素酶活體染色第66頁

     ·生物膜形成第66-67頁

     ·MTB體外低氧生長模型第67頁

     ·NAD和NADH分析第67-68頁

     ·蛋白重組表達(dá)第68頁

     ·蛋白純化第68-69頁

     ·c-di-GMP合成酶活性分析第69頁

     ·吡啶血色原分析第69-70頁

   ·實(shí)驗(yàn)結(jié)果第70-93頁

     ·生物信息學(xué)預(yù)測MTB中可能的c-di-GMP合成酶和降解酶第70頁

     ·Rv1354c和Rv1357c的重組表達(dá)第70-71頁

     ·Rv1354c和Rv1354-GG具有c-di-GMP合成酶活性第71-72頁

     ·GAF結(jié)構(gòu)域感應(yīng)氧化還原壓力調(diào)控c-di-GMP合成活力第72-74頁

     ·c-di-GMP合成酶和降解酶基因敲除與回補(bǔ)第74-76頁

     ·c-di-GMP合成酶基因缺失不影響MTB正常生長第76-77頁

     ·全基因轉(zhuǎn)錄譜分析第77-82頁

     ·定量RT-PCR驗(yàn)證中后期培養(yǎng)物的休眠基因表達(dá)第82頁

     ·c-di-GMP調(diào)控MTB生物膜發(fā)育第82-84頁

     ·c-di-GMP合成酶缺失導(dǎo)致MTB的正常生長需消耗更多氧氣第84頁

     ·胞內(nèi)氧化還原平衡需要c-di-GMP合成酶第84-85頁

     ·c-di-GMP調(diào)控MTB休眠的存活和生長恢復(fù)能力第85-86頁

     ·c-di-GMP合成酶缺失引起低氧條件下休眠基因下調(diào)表達(dá)第86-87頁

     ·c-di-GMP受體預(yù)測第87頁

     ·H37Rv基因敲除突變株篩選第87-88頁

     ·基因敲除引起細(xì)胞免疫因子表達(dá)改變第88-90頁

     ·Rv1357c缺失導(dǎo)致小鼠脾肺炎癥增強(qiáng)和感染后期細(xì)菌存活力嚴(yán)重下降第90-92頁

     ·Rv0195缺失導(dǎo)致MTB的小鼠致病力和感染后期細(xì)菌存活力嚴(yán)重下降第92-93頁

   ·討論第93-102頁

參考文獻(xiàn)第102-118頁

附錄第118-120頁

致謝第120-122頁

博士在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的研究成果第122頁

 發(fā)表論文第122頁

 申請(qǐng)專利第122頁

 主持項(xiàng)目第122頁

論文編號(hào)BS2225719，這篇論文共122頁
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