信號分子AI-2的體外合成及其對副溶血性弧菌四環(huán)素耐藥性的調(diào)控作用
發(fā)布時間：2022-01-26 06:33
【背景】抗菌藥的過度使用引起細菌耐藥性日益嚴重,作為重要的食源性致病菌,副溶血性弧菌也表現(xiàn)出一定程度的耐藥性。群體感應系統(tǒng)可以調(diào)控細菌的耐藥性,為研究副溶血性弧菌的耐藥機制和控制技術(shù)提供新的途徑�！灸康摹刻接懭后w感應信號分子AI-2 （autoinducer-2）對海產(chǎn)品中分離的副溶血性弧菌四環(huán)素耐藥性的調(diào)控作用。【方法】通過原核表達制備AI-2合成關(guān)鍵酶——S-核糖同型半胱氨酸酶（S-ribosylhomocysteinase, LuxS）和S-腺苷同型半胱氨酸核苷酶（S-adenosylhomocysteinenucleosidase,Pfs）,體外合成AI-2,通過菌落計數(shù)法分析AI-2對副溶血性弧菌在四環(huán)素亞抑菌濃度下耐受性的影響,采用逆轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR法測定不同濃度AI-2對副溶血性弧菌四環(huán)素耐藥基因轉(zhuǎn)錄水平的影響。【結(jié)果】通過原核表達獲得LuxS和Pfs,作用于底物S-腺苷同型半胱氨酸能合成具有生物活性的AI-2,其熒光強度約為陽性對照的6倍。在四環(huán)素亞抑菌濃度下,AI-2能顯著促進副溶血性弧菌的生長,6、15、30μmol/L濃度AI-2能不同程度地提高副溶血性弧菌...
【文章來源】：微生物學通報. 2020,47(05)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】：11 頁
【部分圖文】：
重組LuxS和Pfs的純化
體外合成AI-2的活性
測定了0、10、20、40、60、80、100μmol/L濃度的同型半胱氨酸分別與Ellman’s試劑反應后的吸光值，繪制了用于計算AI-2濃度的標準曲線(圖3)。純化的LuxS和Pfs蛋白作用于SAH底物的反應液經(jīng)超濾后，測得濃度約為330μmol/L，用V.harveyi BB170檢測到反應液的活性約為陽性對照的6倍，表明合成了具有生物學活性的AI-2(圖4)。圖2 重組LuxS和Pfs的純化
【參考文獻】：
期刊論文
[1]2015年中國大陸食源性疾病暴發(fā)事件監(jiān)測資料分析[J]. 付萍,王連森,陳江,白光大,徐粒子,王帥,郭云昌. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2019(01)
[2]2014年中國大陸食源性疾病暴發(fā)事件監(jiān)測資料分析[J]. 付萍,劉志濤,梁駿華,戴月,劉成偉,朱姝,郭云昌. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2018(06)
[3]腸炎沙門菌luxS缺失株的構(gòu)建及其生物學特性研究[J]. 于艷超,王莉莉,潘巧,辛九慶,王秀梅. 畜牧獸醫(yī)學報. 2018(06)
[4]2013年中國大陸食源性疾病暴發(fā)監(jiān)測資料分析[J]. 李薇薇,王三桃,梁進軍,劉長青,熊鷹,李寧,徐嬌,劉秀梅,郭云昌. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2018(03)
[5]副溶血弧菌耐藥及其機制的研究進展[J]. 張德福,安慧,張健,趙禹宗,張明,郭佳佳,馮嬌,劉雪飛,李春,白鳳翎,李鈺金,殷喆,勵建榮. 食品工業(yè)科技. 2018(09)
[6]luxS基因缺失對禽致病性大腸桿菌O1、O2和O78三種血清型分離株的生物學特性影響[J]. 呂小龍,胡劍剛,陳兆國,荊雅瑋,米榮升,黃燕,王少輝,韓先干,祁克宗. 微生物學報. 2018(02)
[7]變異鏈球菌自誘導物2信號分子的體外合成與活性檢測[J]. 張鷹,李明勇,霍麗,孟媛. 國際口腔醫(yī)學雜志. 2016(05)
[8]嗜水氣單胞菌群體感應信號分子AI-2的細胞外生物合成及活性檢測[J]. 趙晶,張福蓉,崔一,許永斌,陳明,權(quán)春善,范圣第. 微生物學通報. 2015(10)
[9]副溶血性弧菌的耐藥狀況及耐藥機制研究進展[J]. 江艷華,姚琳,李風鈴,翟毓秀,王聯(lián)珠. 中國漁業(yè)質(zhì)量與標準. 2013(04)
[10]禽致病性大腸桿菌安徽分離株luxS和pfs基因的克隆、表達與細胞外合成AI-2活性檢測[J]. 韓先干,白灝,劉蕾,陳文靜,丁鏟,胡青海,祁克宗,于圣青. 微生物學報. 2012(09)
碩士論文
[1]AI-2群體感應對禽致病大腸桿菌金霉素耐藥性的調(diào)控機制[D]. 劉志超.安徽農(nóng)業(yè)大學 2018
[2]AI-2群體感應系統(tǒng)對禽致病大腸桿菌耐藥性的調(diào)控機制研究[D]. 李文昌.安徽農(nóng)業(yè)大學 2017
[3]AI-2的體外合成及其對植物乳桿菌細菌素合成的影響[D]. 楊杰.東北農(nóng)業(yè)大學 2015
本文編號：3609996
【文章來源】：微生物學通報. 2020,47(05)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】：11 頁
【部分圖文】：
重組LuxS和Pfs的純化
體外合成AI-2的活性
測定了0、10、20、40、60、80、100μmol/L濃度的同型半胱氨酸分別與Ellman’s試劑反應后的吸光值，繪制了用于計算AI-2濃度的標準曲線(圖3)。純化的LuxS和Pfs蛋白作用于SAH底物的反應液經(jīng)超濾后，測得濃度約為330μmol/L，用V.harveyi BB170檢測到反應液的活性約為陽性對照的6倍，表明合成了具有生物學活性的AI-2(圖4)。圖2 重組LuxS和Pfs的純化
【參考文獻】：
期刊論文
[1]2015年中國大陸食源性疾病暴發(fā)事件監(jiān)測資料分析[J]. 付萍,王連森,陳江,白光大,徐粒子,王帥,郭云昌. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2019(01)
[2]2014年中國大陸食源性疾病暴發(fā)事件監(jiān)測資料分析[J]. 付萍,劉志濤,梁駿華,戴月,劉成偉,朱姝,郭云昌. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2018(06)
[3]腸炎沙門菌luxS缺失株的構(gòu)建及其生物學特性研究[J]. 于艷超,王莉莉,潘巧,辛九慶,王秀梅. 畜牧獸醫(yī)學報. 2018(06)
[4]2013年中國大陸食源性疾病暴發(fā)監(jiān)測資料分析[J]. 李薇薇,王三桃,梁進軍,劉長青,熊鷹,李寧,徐嬌,劉秀梅,郭云昌. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2018(03)
[5]副溶血弧菌耐藥及其機制的研究進展[J]. 張德福,安慧,張健,趙禹宗,張明,郭佳佳,馮嬌,劉雪飛,李春,白鳳翎,李鈺金,殷喆,勵建榮. 食品工業(yè)科技. 2018(09)
[6]luxS基因缺失對禽致病性大腸桿菌O1、O2和O78三種血清型分離株的生物學特性影響[J]. 呂小龍,胡劍剛,陳兆國,荊雅瑋,米榮升,黃燕,王少輝,韓先干,祁克宗. 微生物學報. 2018(02)
[7]變異鏈球菌自誘導物2信號分子的體外合成與活性檢測[J]. 張鷹,李明勇,霍麗,孟媛. 國際口腔醫(yī)學雜志. 2016(05)
[8]嗜水氣單胞菌群體感應信號分子AI-2的細胞外生物合成及活性檢測[J]. 趙晶,張福蓉,崔一,許永斌,陳明,權(quán)春善,范圣第. 微生物學通報. 2015(10)
[9]副溶血性弧菌的耐藥狀況及耐藥機制研究進展[J]. 江艷華,姚琳,李風鈴,翟毓秀,王聯(lián)珠. 中國漁業(yè)質(zhì)量與標準. 2013(04)
[10]禽致病性大腸桿菌安徽分離株luxS和pfs基因的克隆、表達與細胞外合成AI-2活性檢測[J]. 韓先干,白灝,劉蕾,陳文靜,丁鏟,胡青海,祁克宗,于圣青. 微生物學報. 2012(09)
碩士論文
[1]AI-2群體感應對禽致病大腸桿菌金霉素耐藥性的調(diào)控機制[D]. 劉志超.安徽農(nóng)業(yè)大學 2018
[2]AI-2群體感應系統(tǒng)對禽致病大腸桿菌耐藥性的調(diào)控機制研究[D]. 李文昌.安徽農(nóng)業(yè)大學 2017
[3]AI-2的體外合成及其對植物乳桿菌細菌素合成的影響[D]. 楊杰.東北農(nóng)業(yè)大學 2015
本文編號：3609996
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