群體感應(yīng)（QS）系統(tǒng),是細(xì)菌間進(jìn)行信號(hào)傳遞并以此作為交流介質(zhì)的一種機(jī)制,以自身分泌的自身誘導(dǎo)素為交流介質(zhì),可以調(diào)控細(xì)菌諸如生物發(fā)光、毒性因子釋放和生物膜形成等行為過(guò)程。而在自然環(huán)境中,細(xì)菌并不是以單菌落或單一菌種的生物被膜存在,而是以混合種生物被膜的形式生存,那么,在混合生物被膜中必定進(jìn)行著細(xì)菌間的多維交流。嗜水氣單胞菌是一種典型的人畜魚(yú)共患病原體,廣泛分布在淡水、污水、淤泥、土壤和人類(lèi)糞便中,可引起水產(chǎn)動(dòng)物病害,引發(fā)敗血癥。群體感應(yīng)信號(hào)分子AI-2能被嗜水氣單胞菌識(shí)別,對(duì)其致病性和生物被膜的形成過(guò)程中起著重要的作用。本實(shí)驗(yàn)以嗜水氣單胞菌為研究對(duì)象,研究外源信號(hào)分子對(duì)生物被膜形成的影響,包括生物被膜的粘附能力,對(duì)氨芐青霉素、頭孢霉素、硫酸鏈霉素的最低抑制濃度（MIC）,生物被膜表面形態(tài)的觀察。方法嗜水氣單胞菌分離株由篩選培養(yǎng)基挑取,經(jīng)16SrDNA序列測(cè)序分析鑒定。使用PCR擴(kuò)增檢測(cè)嗜水氣單胞菌luxS基因片段；利用AI-2指示菌哈氏弧菌BB170檢測(cè)培養(yǎng)上清AI-2的存在及其發(fā)光強(qiáng)度。采用微孔板結(jié)晶紫染色法檢測(cè)嗜水氣單胞菌在外源培養(yǎng)上清的加入時(shí)生物被膜的形成能力；采用微量肉湯稀釋法檢... 

【文章來(lái)源】：廣東工業(yè)大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１細(xì)菌生物被膜的形成過(guò)程??Ｆｉｇ?１－１?Ｔｈｅ?ｓｋｅｔｃｈ?ｍａｐ?ｏｆ?ｂｉｏｆｉｌｍ?ｆｏｒｍａｔｉｏｎ??

因子ＬｕｘＲ蛋白與自誘導(dǎo)物結(jié)含，激活ＬｕｘＲ蛋白，激活ＤＮＡ結(jié)合轉(zhuǎn)錄元件，與巧光??素酶ｌｕｘＣＤＡＢＥ基因的啟動(dòng)子結(jié)合，激活基因轉(zhuǎn)錄，并誘導(dǎo)自身的發(fā)光基因表達(dá)，發(fā)??出化物巧光ＩＷ，如圖１。??近來(lái)，在研究細(xì)菌細(xì)胞的信號(hào)傳遞系統(tǒng)時(shí)，發(fā)現(xiàn)一些與費(fèi)氏弧菌自誘導(dǎo)物相似的??信號(hào)分子，驕基高絲氨酸內(nèi)醋類(lèi)化合物（ＡＨＬｓ）。與費(fèi)氏弧菌ＱＳ類(lèi)似，自誘導(dǎo)物通過(guò)??類(lèi)ＬｕｘＩ蛋白合成，然后與類(lèi)Ｌｕｘ民蛋白結(jié)合，形成受體－誘導(dǎo)物復(fù)合物。該復(fù)合物與目??的基因的啟動(dòng)子結(jié)合，激活基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。??６??

?＂‘Ｉ．．Ｉ‘?＾＊￣＊＊］＾＊Ｓｉ■＾＞Ｈ＊＊＾＊－＊＊￣＂＂￣￣??０Ｍ??圖１－２?ＱＳ１系統(tǒng)感應(yīng)系統(tǒng)不意圖??Ｆｉｇ?１－２?Ｔｈｅ?ｇｅｎｅｒａｌ?ｐｌｏｔ?ｏｆ?ＱＳｌ??三角形，自誘導(dǎo)物；ＩＭ，膜內(nèi)；ＯＭ，膜外??１．２．２革蘭氏陽(yáng)性菌ＱＳ系統(tǒng)??革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌并不產(chǎn)生類(lèi)似ＡＨＬｓ的信號(hào)分子，主要是通過(guò)雙組分磯酸激酶蛋??白產(chǎn)生的修飾后的寡膚（ＡＩＰｓ）作為信號(hào)分子進(jìn)行感應(yīng)Ｐ０１。ＡＩＰｓ類(lèi)信號(hào)分子不能自由進(jìn)??出細(xì)胞壁，需要借助ＡＢＣ轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)或者其他膜通道蛋白才可Ｗ行使功能。當(dāng)ＡＩＰｓ隨??著菌體密度增加而達(dá)到某濃度閥值時(shí)，膜上激酶識(shí)別ＡＩＰｓ，促進(jìn)激酶中氨酸殘基稱(chēng)酸??化，經(jīng)過(guò)天冬氨酸殘基的傳遞，把磯酸基團(tuán)傳遞給受體蛋白，最后憐酸化的受體蛋白??與ＤＮＡ特定的靴位點(diǎn)接合，刺激胞內(nèi)基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)控作用ＰＩ－２３，如圖２所示。與革??蘭氏陰性菌一樣，其感應(yīng)系統(tǒng)都具有較高的種屬特異性，即信號(hào)分子只能被同種細(xì)菌??的感應(yīng)分子識(shí)別

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]青魚(yú)病原嗜水氣單胞菌分離鑒定、毒力因子檢測(cè)及藥敏試驗(yàn)[J]. 梁利國(guó),謝駿.  生態(tài)學(xué)雜志. 2013(12)
[2]分子生物學(xué)技術(shù)在乳酸菌鑒定中的應(yīng)用[J]. 王俊鋼,劉成江,郭安民,李宇輝,韓冬印.  中國(guó)釀造. 2012(01)
[3]LuxS/AI-2對(duì)傷寒沙門(mén)菌基因表達(dá)的調(diào)節(jié)[J]. 羅哲,王敏,杜鴻,王菲,孟彥辰,倪斌,徐順高,黃新祥.  江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(01)
[4]細(xì)菌生物膜耐藥機(jī)制的研究與進(jìn)展[J]. 陳鐵柱,李曉聲,曾文魁,杜堯,譚財(cái)福.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(12)
[5]細(xì)菌密度感應(yīng)信號(hào)AI-2及其與生物被膜形成的關(guān)系[J]. 馬艷平,陳豪泰,張杰,劉永生.  畜牧與獸醫(yī). 2010(03)
[6]大腸桿菌AcrAB-TolC外輸泵的研究進(jìn)展[J]. 于運(yùn)峰,王風(fēng)丹.  山東畜牧獸醫(yī). 2009(09)
[7]金黃色葡萄球菌agr系統(tǒng)受體蛋白AgrC的跨膜結(jié)構(gòu)分析[J]. 李巍,王軍華,權(quán)春善,鄭維,范圣第.  生物物理學(xué)報(bào). 2009(03)
[8]嗜水氣單胞菌臨床分離菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性調(diào)查[J]. 林居純,羅忠俊,舒剛,呂程.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(15)
[9]鞭毛介導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)性與細(xì)菌生物膜的相互關(guān)系[J]. 丁莉莎,王瑤.  微生物學(xué)報(bào). 2009(04)
[10]細(xì)菌溶血素的分類(lèi)及代表性溶血素研究進(jìn)展[J]. 陳希,索占偉,許劍琴,穆祥.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2008(08)



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