群體感應（QS）系統(tǒng),是細菌間進行信號傳遞并以此作為交流介質(zhì)的一種機制,以自身分泌的自身誘導素為交流介質(zhì),可以調(diào)控細菌諸如生物發(fā)光、毒性因子釋放和生物膜形成等行為過程。而在自然環(huán)境中,細菌并不是以單菌落或單一菌種的生物被膜存在,而是以混合種生物被膜的形式生存,那么,在混合生物被膜中必定進行著細菌間的多維交流。嗜水氣單胞菌是一種典型的人畜魚共患病原體,廣泛分布在淡水、污水、淤泥、土壤和人類糞便中,可引起水產(chǎn)動物病害,引發(fā)敗血癥。群體感應信號分子AI-2能被嗜水氣單胞菌識別,對其致病性和生物被膜的形成過程中起著重要的作用。本實驗以嗜水氣單胞菌為研究對象,研究外源信號分子對生物被膜形成的影響,包括生物被膜的粘附能力,對氨芐青霉素、頭孢霉素、硫酸鏈霉素的最低抑制濃度（MIC）,生物被膜表面形態(tài)的觀察。方法嗜水氣單胞菌分離株由篩選培養(yǎng)基挑取,經(jīng)16SrDNA序列測序分析鑒定。使用PCR擴增檢測嗜水氣單胞菌luxS基因片段；利用AI-2指示菌哈氏弧菌BB170檢測培養(yǎng)上清AI-2的存在及其發(fā)光強度。采用微孔板結(jié)晶紫染色法檢測嗜水氣單胞菌在外源培養(yǎng)上清的加入時生物被膜的形成能力；采用微量肉湯稀釋法檢... 

【文章來源】：廣東工業(yè)大學廣東省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１細菌生物被膜的形成過程??Ｆｉｇ?１－１?Ｔｈｅ?ｓｋｅｔｃｈ?ｍａｐ?ｏｆ?ｂｉｏｆｉｌｍ?ｆｏｒｍａｔｉｏｎ??

因子ＬｕｘＲ蛋白與自誘導物結(jié)含，激活ＬｕｘＲ蛋白，激活ＤＮＡ結(jié)合轉(zhuǎn)錄元件，與巧光??素酶ｌｕｘＣＤＡＢＥ基因的啟動子結(jié)合，激活基因轉(zhuǎn)錄，并誘導自身的發(fā)光基因表達，發(fā)??出化物巧光ＩＷ，如圖１。??近來，在研究細菌細胞的信號傳遞系統(tǒng)時，發(fā)現(xiàn)一些與費氏弧菌自誘導物相似的??信號分子，驕基高絲氨酸內(nèi)醋類化合物（ＡＨＬｓ）。與費氏弧菌ＱＳ類似，自誘導物通過??類ＬｕｘＩ蛋白合成，然后與類Ｌｕｘ民蛋白結(jié)合，形成受體－誘導物復合物。該復合物與目??的基因的啟動子結(jié)合，激活基因進行轉(zhuǎn)錄。??６??

?＂‘Ｉ．．Ｉ‘?＾＊￣＊＊］＾＊Ｓｉ■＾＞Ｈ＊＊＾＊－＊＊￣＂＂￣￣??０Ｍ??圖１－２?ＱＳ１系統(tǒng)感應系統(tǒng)不意圖??Ｆｉｇ?１－２?Ｔｈｅ?ｇｅｎｅｒａｌ?ｐｌｏｔ?ｏｆ?ＱＳｌ??三角形，自誘導物；ＩＭ，膜內(nèi)；ＯＭ，膜外??１．２．２革蘭氏陽性菌ＱＳ系統(tǒng)??革蘭氏陽性細菌并不產(chǎn)生類似ＡＨＬｓ的信號分子，主要是通過雙組分磯酸激酶蛋??白產(chǎn)生的修飾后的寡膚（ＡＩＰｓ）作為信號分子進行感應Ｐ０１。ＡＩＰｓ類信號分子不能自由進??出細胞壁，需要借助ＡＢＣ轉(zhuǎn)運系統(tǒng)或者其他膜通道蛋白才可Ｗ行使功能。當ＡＩＰｓ隨??著菌體密度增加而達到某濃度閥值時，膜上激酶識別ＡＩＰｓ，促進激酶中氨酸殘基稱酸??化，經(jīng)過天冬氨酸殘基的傳遞，把磯酸基團傳遞給受體蛋白，最后憐酸化的受體蛋白??與ＤＮＡ特定的靴位點接合，刺激胞內(nèi)基因表達進行調(diào)控作用ＰＩ－２３，如圖２所示。與革??蘭氏陰性菌一樣，其感應系統(tǒng)都具有較高的種屬特異性，即信號分子只能被同種細菌??的感應分子識別

【參考文獻】：
期刊論文
[1]青魚病原嗜水氣單胞菌分離鑒定、毒力因子檢測及藥敏試驗[J]. 梁利國,謝駿.  生態(tài)學雜志. 2013(12)
[2]分子生物學技術(shù)在乳酸菌鑒定中的應用[J]. 王俊鋼,劉成江,郭安民,李宇輝,韓冬印.  中國釀造. 2012(01)
[3]LuxS/AI-2對傷寒沙門菌基因表達的調(diào)節(jié)[J]. 羅哲,王敏,杜鴻,王菲,孟彥辰,倪斌,徐順高,黃新祥.  江蘇大學學報(醫(yī)學版). 2011(01)
[4]細菌生物膜耐藥機制的研究與進展[J]. 陳鐵柱,李曉聲,曾文魁,杜堯,譚財福.  中國組織工程研究與臨床康復. 2010(12)
[5]細菌密度感應信號AI-2及其與生物被膜形成的關系[J]. 馬艷平,陳豪泰,張杰,劉永生.  畜牧與獸醫(yī). 2010(03)
[6]大腸桿菌AcrAB-TolC外輸泵的研究進展[J]. 于運峰,王風丹.  山東畜牧獸醫(yī). 2009(09)
[7]金黃色葡萄球菌agr系統(tǒng)受體蛋白AgrC的跨膜結(jié)構(gòu)分析[J]. 李巍,王軍華,權(quán)春善,鄭維,范圣第.  生物物理學報. 2009(03)
[8]嗜水氣單胞菌臨床分離菌對抗菌藥物的耐藥性調(diào)查[J]. 林居純,羅忠俊,舒剛,呂程.  安徽農(nóng)業(yè)科學. 2009(15)
[9]鞭毛介導的運動性與細菌生物膜的相互關系[J]. 丁莉莎,王瑤.  微生物學報. 2009(04)
[10]細菌溶血素的分類及代表性溶血素研究進展[J]. 陳希,索占偉,許劍琴,穆祥.  中國農(nóng)學通報. 2008(08)



本文編號：3257168