目的：原發(fā)性肝癌(primary liver cancer，PLC)是我國常見惡性腫瘤之一，死亡率居我國惡性腫瘤的第二位。當(dāng)前治療原發(fā)性肝癌的首選方法是手術(shù)切除，然而有資料表明，肝癌術(shù)后3年復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移率高達(dá)57%-81%，嚴(yán)重威脅著人們的生命健康。因此，尋求有效抑制侵襲轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)已成為當(dāng)今肝癌研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)。中藥消癌平為臨床常用的抗癌藥物，有高效低毒的特點(diǎn)，能有效抑制多種腫瘤的生長，延長患者的生存期并有效改善生存質(zhì)量。 本實(shí)驗(yàn)通過觀察消癌平在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中對肝癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響，探討其可能的抗侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 1.細(xì)胞水平：細(xì)胞采用傳代培養(yǎng)。分別將低、中、高劑量(10mg/mL、30mg/mL、50mg/mL)的消癌平與Hepa1-6肝癌細(xì)胞共同培養(yǎng)，MTT法檢測藥物處理后細(xì)胞的活性，細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞的移動能力。 2.動物水平：構(gòu)建小鼠肝癌荷瘤模型，隨機(jī)分為5組，每組15只。消癌平低、中、高劑量組分別給予消癌平注射液10g/(kg·d)、20g/(kg·d)、40g/(kg·d)；陽性對照組給予5-Fu 20mg/（kg·d)；陰性對照組給予等體積無菌生理鹽水；均連續(xù)腹腔給藥14天。稱瘤重、脾重分別計(jì)算抑瘤率和脾指數(shù)；ELISA法檢測血清可溶性細(xì)胞間粘附分子-1（sICAM-1）水平。 結(jié)果： 1.細(xì)胞水平： 1.1光鏡下觀察：不同劑量的消癌平孵育Hepa1-6細(xì)胞后，細(xì)胞表現(xiàn)為不同程度的：偽足回縮、變圓，細(xì)胞分裂相減少，瘤巨細(xì)胞減少，部分細(xì)胞出現(xiàn)懸浮，隨藥物劑量增加上述表現(xiàn)越明顯；對照組細(xì)胞形態(tài)多不規(guī)則，有較長的偽足，核分裂相多見。 1.2 MTT示：不同劑量的消癌平對小鼠肝癌Hepa1-6細(xì)胞的生長均有抑制作用，呈劑量、時(shí)間依賴性；各給藥組與對照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)，組間比較差異顯著（P0.05）。 1.3細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)：不同劑量的消癌平能夠有效地阻止細(xì)胞向劃痕處生長，且鋪滿劃痕所需要的時(shí)間隨消癌平劑量的增加而延長。 2.動物水平： 2.1脾指數(shù)：與陰性對照組相比，消癌平各劑量組脾指數(shù)明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而陽性對照組無明顯差異（P＞0.05）。 2.2抑瘤率：消癌平注射液對H22荷瘤小鼠具有明顯的抑瘤作用，低、中、高劑量組抑瘤率分別為：20.7%，31.6%，38.63%；與陰性對照組平均瘤重相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；高劑量組與陽性對照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 2.3血清sICAM-1的表達(dá)：消癌平低、中、高劑量組的分泌量分別為：53.26±9.36ng/L，35.75±11.16ng/L，29.13±8.52ng/L；與陰性對照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；高劑量組與陽性對照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；與正常小鼠相比，各組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 結(jié)論：消癌平可能通過抑制肝癌細(xì)胞的增殖及運(yùn)動能力，降低血清中sICAM-1的表達(dá)達(dá)到抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移的目的。
【學(xué)位單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2011
【中圖分類】：R285.5;R735.7
【部分圖文】：

圖 1 肝 癌 H e a p 1 -6 細(xì) 胞AH e a p 1 -6 肝 癌細(xì) 胞（ × 2 0 0） 圖 A： He a p 1 - 6 肝 癌細(xì) 胞 對照 組 （× 1 00 ）細(xì)胞 形 態(tài)多 樣 ，核 質(zhì) 比大 。 H e a p 1- 6 肝 癌細(xì) 胞核 分 裂 象（ ×4 0 0 ）圖 B： 消 癌 平 低劑 量 組（ 1 0m g / mL ）（× 2 0 0） 作用 2 4h 后細(xì) 胞偽 足 部 分回 縮 B

腫瘤中心壞死明顯

腫瘤呈侵襲性生長，胸骨被破壞，兩側(cè)胸壁不對稱
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2871193