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沉默c-met基因表達(dá)對胃癌肝高轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞生物學(xué)行為的影響

發(fā)布時間:2017-10-09 11:37

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【摘要】:背景胃癌肝高轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞(XGC9811-L)是本實驗組在前期工作中建立的一株具有肝臟高轉(zhuǎn)移潛能的胃癌細(xì)胞系,c-met基因在其中高表達(dá)。c-met是肝細(xì)胞生長因子(HGF)的受體。目的研究沉默c-met基因表達(dá)對XGC9811-L的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為的影響。方法 2014年1—6月,采用細(xì)胞轉(zhuǎn)染法將重組質(zhì)粒p SuppressorRetro-c-met-siRNA導(dǎo)入XGC9811-L,建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系,按有無轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)染目的基因的不同分為未轉(zhuǎn)染組、空載體組、隨機序列組和siRNA組。采用熒光定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測XGC9811-L中c-met mRNA相對表達(dá)水平,Western blotting法檢測c-met相對表達(dá)水平,通過細(xì)胞增殖實驗檢測各組細(xì)胞增殖能力并繪制細(xì)胞生長曲線,通過侵襲實驗和運動實驗計算各組穿膜細(xì)胞數(shù)。結(jié)果 siRNA組c-met mRNA、c-met相對表達(dá)水平低于未轉(zhuǎn)染組、空載體組、隨機序列組(P0.05)。siRNA組第3天、第5天、第6天、第7天細(xì)胞增殖能力低于未轉(zhuǎn)染組、空載體組、隨機序列組(P0.05)。在侵襲實驗中,siRNA組穿膜細(xì)胞數(shù)少于未轉(zhuǎn)染組、空載體組、隨機序列組(P0.05)。在運動實驗中,siRNA組穿膜細(xì)胞數(shù)少于未轉(zhuǎn)染組、空載體組、隨機序列組(P0.05)。結(jié)論沉默c-met基因的表達(dá)可以抑制XGC9811-L的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移能力,c-met在胃癌肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生、發(fā)展過程中可能起重要作用,抑制c-met基因表達(dá)可能會抑制胃癌細(xì)胞向肝臟轉(zhuǎn)移。
【作者單位】: 寧夏銀川市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科;寧夏回族自治區(qū)人民醫(yī)院消化內(nèi)科;寧夏銀川市第一人民醫(yī)院放射科;
【關(guān)鍵詞】RNA 小分子干擾 基因沉默 原癌基因蛋白質(zhì)c-met XGC-L
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(81060193) 寧夏自然科學(xué)基金資助項目(NZ1283)
【分類號】:R735.2
【正文快照】: Effects of Silencing of c-met Gene Expression on Biological Behavior of Gastric Cancer Cells With High Liver-metastatic Potential SHEN Hao,HU Sheng-juan,SHI Hong-li,et al.Department of Gastroenterology,the First People'sHospital of Yinchuan,Yinchuan 7500

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本文編號:999971

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