發(fā)布時(shí)間：2017-10-08 20:38

  本文關(guān)鍵詞：馬尾松谷胱甘肽過氧化物酶PmGPX6基因cDNA克隆及轉(zhuǎn)化擬南芥耐旱性初步研究

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【摘要】：[目的]克隆馬尾松谷胱甘肽過氧化物酶基因,并對其進(jìn)行功能研究。[方法]采用RACE技術(shù)克隆基因c DNA序列,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測基因在馬尾松干旱脅迫下的表達(dá)模式,花序浸泡法轉(zhuǎn)化擬南芥,并對轉(zhuǎn)基因與野生型擬南芥的生長表型和根系生長進(jìn)行分析。利用熒光顯微鏡技術(shù)對轉(zhuǎn)基因擬南芥不定根進(jìn)行GFP熒光檢測。[結(jié)果]克隆到1個(gè)871 bp的GPX基因全長c DNA序列,命名為Pm GPX6。Pm GPX6包括513 bp的完整開放閱讀框,編碼170個(gè)氨基酸殘基。Pm GPX6蛋白與油松Pt GPX蛋白同源性達(dá)95%。Pm GPX6在馬尾松根中高表達(dá),莖、葉中表達(dá)量低。在干旱脅迫下,Pm GPX6在根、莖、葉中的表達(dá)量均在第15天達(dá)到最大,隨后出現(xiàn)下降趨勢。過表達(dá)Pm GPX6與野生型擬南芥植株在正常水分條件下表型與根長差異不大,但在干旱脅迫下,轉(zhuǎn)基因植株根系更長。轉(zhuǎn)基因擬南芥根在藍(lán)色光激發(fā)下能發(fā)出強(qiáng)烈的綠色熒光,表明Pm GPX6基因能高效表達(dá)。[結(jié)論]推測Pm GPX6可能參與馬尾松干旱脅迫應(yīng)答。
【作者單位】： 貴州省森林資源與環(huán)境研究中心;貴州大學(xué)林學(xué)院;貴州省農(nóng)業(yè)生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 馬尾松 谷胱甘肽過氧化物酶 轉(zhuǎn)基因擬南芥 抗旱性
【基金】：國家自然基金(31260183) 國家863課題(2011AA10020301) 貴州省重大專項(xiàng)(黔科合重大專項(xiàng)字[2012]6001號) 國家科技支撐課題(2015BAD09B0102)
【分類號】：S791.248
【正文快照】： 干旱、低溫、高鹽等非生物脅迫是影響林木正常生長的重要因素。研究認(rèn)為逆境脅迫下植物產(chǎn)生的大量活性氧(Reactive oxygen species,ROS)將會對其造成一定的傷害[1]。為了防御氧化脅迫,植物產(chǎn)生了一套酶促和非酶促的ROS清除機(jī)制來抗ROS脅迫[2]。其中谷胱甘肽過氧化物酶(glutath，

本文編號：996153