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菘藍(lán)環(huán)硫指定蛋白基因IiESP的克隆及其編碼產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位

發(fā)布時(shí)間:2017-10-08 18:36

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【摘要】:為了探究十字花科植物環(huán)硫指定蛋白(ESP)對(duì)硫代葡萄糖苷分解的導(dǎo)向作用所具有的生物學(xué)功能,從菘藍(lán)中克隆了Ii ESP基因的c DNA和基因組序列,并分析了其表達(dá)模式。在此基礎(chǔ)上利用GFP標(biāo)簽對(duì)Ii ESP蛋白進(jìn)行了亞細(xì)胞定位,并根據(jù)氨基酸序列預(yù)測(cè)了該蛋白的三維結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明:Ii ESP基因含有2個(gè)外顯子和1個(gè)內(nèi)含子,其基因組、c DNA和ORF序列長(zhǎng)度分別為1 555、1 315和1 164 bp。Ii ESP蛋白由387個(gè)氨基酸構(gòu)成,含有5個(gè)Kelch模塊,可折疊形成球狀超螺線管結(jié)構(gòu)。多重比對(duì)發(fā)現(xiàn)Ii ESP與歐洲菘藍(lán)It ESP、擬南芥At ESP和甘藍(lán)Bo ESP在氨基酸序列上的一致性分別為79%、76%和77%。通過農(nóng)桿菌滲入法在本氏煙草葉片表皮細(xì)胞中瞬時(shí)表達(dá)Ii ESP基因,證實(shí)Ii ESP蛋白定位于葉綠體中。RT-PCR分析結(jié)果顯示,Ii ESP主要在下胚軸、莖、早期花序、成熟花序、花、萼片和花瓣中表達(dá),其在花被中的高活性可能與吸引昆蟲進(jìn)行傳粉有關(guān)。
【作者單位】: 西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院陜西省生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室西部資源生物與現(xiàn)代生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】菘藍(lán) 環(huán)硫指定蛋白 表達(dá)分析 亞細(xì)胞定位 Kelch模塊
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(30870194和J1210063) 陜西省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室科研計(jì)劃(15JS111、12JS103和2010JS090) 西北大學(xué)研究生創(chuàng)新計(jì)劃(YZZ14076和YZZ13068)~~
【分類號(hào)】:S567.239
【正文快照】: 收稿2015-10-15修定2015-12-14資助國(guó)家自然科學(xué)基金(30870194和J1210063)、陜西省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室科研計(jì)劃(15JS111、12JS103和2010JS090)和西北大學(xué)研究生創(chuàng)新計(jì)劃(YZZ14076和YZZ13068)。植物細(xì)胞能夠合成各種各樣的次生代謝產(chǎn)物,這些物質(zhì)可以提供防御食草性動(dòng)物的功能,對(duì)植物有,

本文編號(hào):995651

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