高溫脅迫下瓜實(shí)蠅的內(nèi)參基因篩選
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【摘要】:基于實(shí)時熒光定量PCR技術(shù),測定瓜實(shí)蠅雌成蟲GAPDH、SD、β-TUB、ACT和RPL13共5個備選內(nèi)參基因分別在25(CK)、37、45℃下處理1 h的m RNA水平表達(dá)情況,并借助Bestkeeper、Normfinder和Ge Norm程序分析5個備選內(nèi)參基因表達(dá)的穩(wěn)定性。篩選得出Best Keeper:SD值排序?yàn)镾D(0.06)=GAPDH(0.06)RPL13(0.11)β-TUB(0.15)ACT(0.23);Normfinder:穩(wěn)定值排序?yàn)镾D(0.004)=RPL13(0.004)GAPDH(0.005)β-TUB(0.006)ACT(0.010);Ge Norm:M值排序?yàn)镾D(0.011)=RPL13(0.011)=GAPDH(0.011)β-TUB(0.012)ACT(0.016)。綜合分析結(jié)果可選定SD為最穩(wěn)定的內(nèi)參基因,RPL13和GAPDH次之。該結(jié)果可為深度開展高溫脅迫下瓜實(shí)蠅其它基因的表達(dá)情況研究提供參照。
【作者單位】: 海南大學(xué)環(huán)境與植物保護(hù)學(xué)院;中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所;
【關(guān)鍵詞】: 高溫脅迫 瓜實(shí)蠅 內(nèi)參基因
【基金】:公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(No.201103026) 中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)基金(No.2014hzs1j003) 2014年海南省研究生創(chuàng)新科研課題(No.Hyb2014-07) 海南大學(xué)研究生優(yōu)秀學(xué)位論文培育計(jì)劃第二批資助項(xiàng)目 2015年海南大學(xué)研究生實(shí)踐創(chuàng)新項(xiàng)目
【分類號】:S433
【正文快照】: 實(shí)時熒光定量PCR(real-time fluorescence quantitativePCR,RT-q PCR)技術(shù)是在傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,通過收集熒光信號對目標(biāo)基因進(jìn)行定量分析,具有效率高、敏感性高、操作簡易和重復(fù)性好等優(yōu)勢,已成為對不同目標(biāo)基因進(jìn)行定量分析的主要方法[1-2]。內(nèi)參基因是在不
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,本文編號:984197
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