發(fā)布時(shí)間：2017-10-05 05:25

  本文關(guān)鍵詞：家蠶let-7 microRNA靶基因Bmlin-41的克隆表達(dá)與調(diào)控

  更多相關(guān)文章： 家蠶 異時(shí)性基因 家蠶let- miRNA Bmlin- 表達(dá)模式 靶基因

【摘要】：異時(shí)性基因調(diào)控細(xì)胞增殖和個(gè)體發(fā)育階段的轉(zhuǎn)換。家蠶異時(shí)性基因在家蠶變態(tài)發(fā)育過程中也很可能具有重要的調(diào)控作用,但它們的表達(dá)模式、生物學(xué)功能以及與micro RNA之間的關(guān)系卻鮮有報(bào)道。本研究首先利用果蠅同源基因lin-41搜索家蠶基因組數(shù)據(jù)庫中相似序列,設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增Bmlin-41的編碼序列,克隆了家蠶Bmlin-41基因CDS,其長度為2 166 bp,編碼721個(gè)氨基酸,含有B-box和NHL結(jié)構(gòu)域;隨后,利用RT-PCR、q PCR技術(shù)并結(jié)合已有的家蠶全基因組芯片數(shù)據(jù)研究了Bmlin-41在家蠶中的時(shí)空表達(dá)模式,發(fā)現(xiàn)Bmlin-41在從家蠶胚胎到成蟲的發(fā)育過程中呈逐漸遞增的表達(dá)趨勢,在五齡3 d不同組織中,于卵巢里表達(dá)量最高,精巢和中腸次之,而其余組織中低量表達(dá)或不表達(dá);最后,利用3′RACE克隆了Bmlin-41基因的3′UTR,全長1 434 bp,用在線軟件RNAhybrid預(yù)測發(fā)現(xiàn)Bmlin-41的3′UTR上存在bmo-let-7靶位點(diǎn),構(gòu)建了含Bmlin-41 3′UTR的雙熒光素酶報(bào)告基因載體,在S2細(xì)胞上共轉(zhuǎn)染Bmlin-41 3′UTR和bmo-let-7的模擬物(Mimics)和拮抗劑(Antagomir),bmo-let-7 mimics顯著下調(diào)Bmlin-41,bmo-let-7 antagomir顯著上調(diào)Bmlin-41,證實(shí)了Bmlin-41是bmo-let-7的靶基因。以上研究結(jié)果為深入研究let-7 mi RNA和Bmlin-41的功能,揭示Bmlin-41和bmo-let-7在家蠶變態(tài)發(fā)育過程中的調(diào)控關(guān)系提供了新的線索。
【作者單位】： 西南大學(xué)家蠶基因組生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;湖北文理學(xué)院醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 家蠶 異時(shí)性基因 家蠶let- miRNA Bmlin- 表達(dá)模式 靶基因
【基金】：國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)(No.2012CB114602) 國家自然科學(xué)基金(Nos.31071136,31571334) 重慶市基礎(chǔ)與前沿研究計(jì)劃(No.cstc2014jcyjA00025)資助~~
【分類號(hào)】：Q78;S881.2
【正文快照】： Received:October 15,2015;Accepted:December 16,2015Supported by:National Basic Research Program of China(973 Program)(No.2012CB114602);National Natural Science Foundation ofChina(Nos.31071136,31571334),Fundamental and Advanced Research Projects of Chongqi

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉仕平;黃亞璽;尹紀(jì)云;吳小燕;周蘭庭;王偉;夏慶友;;家蠶Bmyan基因的克隆表達(dá)和作為microRNA7靶基因的驗(yàn)證[J];生物工程學(xué)報(bào);2015年11期

2 劉仕平;夏慶友;;Northern雜交檢測家蠶microRNA的技術(shù)流程[J];蠶業(yè)科學(xué);2014年04期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 周挺;家蠶let-7 miRNA的靶基因克隆和激素誘導(dǎo)[D];西南大學(xué);2009年

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 周蘭庭;周挺;高君凌;王偉;吳小燕;黃亞璽;夏慶友;劉仕平;;家蠶let-7 microRNA靶基因Bmlin-41的克隆表達(dá)與調(diào)控[J];生物工程學(xué)報(bào);2016年05期

2 何婷;尹權(quán);王偉;黃亞璽;吳小燕;夏慶友;劉仕平;;利用Bac-to-Bac桿狀病毒系統(tǒng)超量表達(dá)家蠶let-7簇microRNAs[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);2016年03期

3 劉仕平;吳小燕;張丹宇;黃亞璽;王偉;趙萍;夏慶友;;家蠶microRNA 7靶基因Bmhairy的鑒定和轉(zhuǎn)錄表達(dá)模式[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);2016年01期

4 熊黎;仝莉;王茂春;周宇荀;李凱;肖君華;;特異性逆轉(zhuǎn)錄microRNA-505的高效莖環(huán)引物的設(shè)計(jì)[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2015年27期

5 劉仕平;黃亞璽;尹紀(jì)云;吳小燕;周蘭庭;王偉;夏慶友;;家蠶Bmyan基因的克隆表達(dá)和作為microRNA7靶基因的驗(yàn)證[J];生物工程學(xué)報(bào);2015年11期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉仕平;夏慶友;;Northern雜交檢測家蠶microRNA的技術(shù)流程[J];蠶業(yè)科學(xué);2014年04期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王虹;滕鴻琦;施玨平;張彥定;張明鳳;;let-7 microRNA調(diào)控動(dòng)物器官發(fā)育的研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2011年04期

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本文編號(hào)：975038