本文關(guān)鍵詞：魯氏耶爾森氏菌外膜蛋白ompF基因的分子克隆、生物信息學與免疫原性分析

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【摘要】：為篩選潛在的保護性抗原基因研制魯氏耶爾森氏菌(Yersinia ruckeri)基因工程疫苗,實驗利用特異性引物擴增分離自斑點叉尾銿(Ictalurus punctatus)的Y.ruckeri外膜蛋白omp F基因并對其進行分子克隆,應用相關(guān)軟件和程序?qū)ζ浜塑账峒鞍被嵝蛄羞M行生物信息學分析,并進行了omp F蛋白的表達和免疫原性檢測。結(jié)果顯示,omp F基因全長1 095 bp(Gen Bank登錄號KP159420),包含一個編碼364個氨基酸的完整開放閱讀框,其氨基酸序列具有極高保守性,與Y.ruckeri外膜穿孔蛋白omp F(Gen Bank登錄號ADK27779.1)親緣關(guān)系最近,序列一致性為99.2%,進化樹聚為一支;具有1個革蘭氏陰性菌穿孔蛋白保守結(jié)構(gòu)域,存在1個信號肽和1個跨膜區(qū),是一種跨膜蛋白;具有12個與免疫相關(guān)的抗原決定簇區(qū)域。SDS-PAGE分析發(fā)現(xiàn)該蛋白主要以包涵體形式表達在沉淀,經(jīng)Western-bolt顯示omp F蛋白具有較好的免疫原性。以上結(jié)果表明omp F基因可作為Y.ruckeri基因工程疫苗的候選抗原基因。
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院;四川農(nóng)業(yè)大學動物疫病與人類健康四川省重點實驗室;四川農(nóng)業(yè)大學動物科技學院;
【關(guān)鍵詞】： 魯氏耶爾森氏菌 外膜蛋白 ompF基因 分子克隆 生物信息學 免疫原性
【基金】：教育部“長江學者和創(chuàng)新團隊發(fā)展計劃”創(chuàng)新團隊項目(IRT0848) 四川省科技支撐計劃項目(2014NZ0003)
【分類號】：S941.4
【正文快照】： 魯氏耶爾森氏菌(Yersinia ruckeri),隸屬腸桿菌科、耶爾森氏菌屬,呈革蘭氏陰性短桿狀,是冷水性鮭科魚類紅嘴病(Enteric redmouth disease,ERM)的主要病原菌[1]。早在1952年美國首次發(fā)生虹鱒(Salmo garirdneri)紅嘴病,1966年RUCKER等[2]從患病虹鱒體內(nèi)首次分離得到該病原菌。自

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本文編號：967338