本文關(guān)鍵詞：唾液腺特異表達(dá)植酸酶轉(zhuǎn)基因豬的制備及分析

  更多相關(guān)文章： 磷 植酸酶 轉(zhuǎn)基因豬 腮腺分泌蛋白基因(PSP)啟動子

【摘要】：豬(Sus scrofa)對飼料中植酸磷的消化利用效率很低,其糞便中排放大量未吸收的磷,對環(huán)境產(chǎn)生嚴(yán)重污染,在豬唾液腺中表達(dá)分泌植酸酶是解決豬糞磷污染的一條新途徑。為了制備唾液腺特異表達(dá)植酸酶的新型減磷排放轉(zhuǎn)基因豬,本研究構(gòu)建了一條由豬腮腺分泌蛋白基因(parotid secretory protein,PSP)啟動細(xì)菌源植酸酶基因app A(acid phosphoanhydride phosphohydrolase)表達(dá)的轉(zhuǎn)基因載體,并利用體細(xì)胞核移植技術(shù)獲得14頭原代(F0)轉(zhuǎn)基因克隆豬,經(jīng)PCR鑒定,其中8頭為陽性豬。PCR分析顯示,app A基因在轉(zhuǎn)基因豬的唾液腺組織特異表達(dá),但在腎臟、肝臟、心臟、十二指腸等組織中不表達(dá)。營養(yǎng)代謝分析證明,轉(zhuǎn)基因豬糞磷排放量比非轉(zhuǎn)基因豬顯著減少了16%(P0.05),而轉(zhuǎn)基因豬對干物質(zhì)和能量的表觀消化率以及對Ca、P的消化率均高于野生型豬,但未達(dá)到顯著水平。外源基因從F0轉(zhuǎn)基因豬穩(wěn)定遺傳至F1,并且Southern blot分析顯示,外源基因是以單拷貝形式整合至轉(zhuǎn)基因豬基因組。F1轉(zhuǎn)基因豬的app A表達(dá)模式與F0轉(zhuǎn)基因豬相似,其只在唾液腺中特異表達(dá),且以頜下腺表達(dá)最高,其次是腮腺和舌下腺,在腎臟、心臟、肝臟等組織不表達(dá)。本研究成功獲得唾液腺特異表達(dá)植酸酶轉(zhuǎn)基因豬,為培育新型減磷排放的環(huán)保轉(zhuǎn)基因豬新品種提供了科學(xué)依據(jù)。
【作者單位】： 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)國家生豬種業(yè)工程研究中心;中國農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)生物技術(shù)國家重點(diǎn)實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 磷 植酸酶 轉(zhuǎn)基因豬 腮腺分泌蛋白基因(PSP)啟動子
【基金】：轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專項(No.2014ZX08006004;No.2016ZX08006002) 廣東省科技計劃項目(No.2011A020102003)
【分類號】：S828
【正文快照】：

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