本文關(guān)鍵詞：過表達Brahma-相關(guān)基因1腺病毒載體對氧化應激誘導心肌細胞凋亡的影響

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【摘要】：背景:Brahma-相關(guān)基因1是調(diào)節(jié)染色質(zhì)重構(gòu)的重要核蛋白,在糖尿病心肌病中表達降低。目的:構(gòu)建大鼠Brahma-相關(guān)基因1重組腺病毒載體,評價其在氧化應激誘導原代心肌細胞凋亡中的保護作用。方法:構(gòu)建Brahma-相關(guān)基因1重組腺病毒載體質(zhì)粒,經(jīng)人胚腎293T細胞包裝、擴增、計算滴度后,將Brahma-相關(guān)基因1重組腺病毒轉(zhuǎn)染入SD乳鼠原代培養(yǎng)心肌細胞,以空載體EGFP轉(zhuǎn)染細胞及正常細胞作為對照,24 h后,熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效率;熒光定量PCR、免疫印跡法檢測細胞Brahma-相關(guān)基因1mR NA、蛋白表達;24 h后,分別加入100μmol/L H2O2處理12 h,免疫印跡法檢測Brahma-相關(guān)基因1蛋白表達、凋亡標志物cleaved-Caspase3表達,流式細胞儀檢測細胞凋亡率。結(jié)果與結(jié)論:(1)構(gòu)建的重組腺病毒成功轉(zhuǎn)染至心肌細胞,轉(zhuǎn)染效率達90%以上,被轉(zhuǎn)染細胞的Brahma-相關(guān)基因1 mR NA、蛋白表達明顯增高;(2)H2O2可顯著抑制心肌細胞Brahma-相關(guān)基因1表達,誘導心肌細胞凋亡,刺激心肌細胞cleaved-Caspase3表達;Brahma-相關(guān)基因1重組腺病毒可減輕由H2O2導致的上述心肌細胞損傷;(3)結(jié)果表明,氧化應激能直接抑制心肌細胞Brahma-相關(guān)基因1表達,Brahma-相關(guān)基因1在氧化應激誘導的心肌細胞凋亡中發(fā)揮保護作用。
【作者單位】： 廣州醫(yī)科大學藥學院藥理學教研室;廣州心血管疾病研究所;解放軍蘭州軍區(qū)烏魯木齊總醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】： 基因 細胞 糖尿病心肌病 組織工程 實驗動物 心血管及肺損傷與修復動物模型 Brahma-相關(guān)基因 腺病毒載體 氧化應激 心肌細胞 轉(zhuǎn)染 基因治療 國家自然科學基金
【基金】：國家自然科學基金項目(81402928) 廣東省醫(yī)學科研基金項目(B2012167) 廣州市教育科研計劃項目(2012C199)~~
【分類號】：R450
【正文快照】： 文章快速閱讀: Brahma-相關(guān)基因1腺病毒載體抑制心肌細胞凋亡 將Brahma-相關(guān)基因124 h后,熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效率;熒光結(jié)果表明,氧化應激能 獲取SD乳鼠重組腺病毒轉(zhuǎn)染入SD定量PCR、免疫印跡法檢測細胞Brahma-直接抑制心肌細胞原代培養(yǎng)心乳鼠原代培養(yǎng)心肌細胞相關(guān)基因1mR NA

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1 葛晨;微小RNA-214對膿毒癥小鼠心肌損傷的作用[D];河北醫(yī)科大學;2015年

2 張洪明;X射線心臟局部照射致心肌細胞凋亡的分子機制[D];山西醫(yī)科大學;2016年

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本文編號：952357