本文關(guān)鍵詞：幾種靈芝rDNA基因間隔序列分析與鑒定

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【摘要】：目的基于基因間隔序列(ITS)序列對(duì)靈芝進(jìn)行分類。方法培養(yǎng)靈芝、提取DNA、優(yōu)化聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)體系、純化與克隆、測(cè)序、構(gòu)建遺傳進(jìn)化樹、進(jìn)行遺傳分析。結(jié)果經(jīng)過一系列的梯度實(shí)驗(yàn)得知優(yōu)化的PCR體系為25μl反應(yīng)混合物中含模板DNA 25ng、Mg~(2+)為2.0 mmol/L、dNT Ps 200μmol/L、Taq 1.5 U、引物為20 pmol;最佳反應(yīng)程序?yàn)?3℃預(yù)變性4min,93℃變性40s,59℃退火40s,72℃延伸1 min,共35個(gè)循環(huán),72℃繼續(xù)延伸7min,4℃無限循環(huán)。所采用的HZ002、DZ003、NZ004和XC005在遺傳進(jìn)化樹上面十分接近,說明其可以劃分為同一菌屬,同屬于靈芝菌屬。結(jié)論基于ITS序列對(duì)靈芝進(jìn)行分類,與其他的分子標(biāo)記技術(shù)所取得的分類結(jié)果一致,證實(shí)依據(jù)ITS序列來對(duì)真菌菌屬進(jìn)行分類是十分合理的。
【作者單位】： 湖南工業(yè)大學(xué)包裝與材料工程學(xué)院;湖南中醫(yī)藥高等專科學(xué)校;
【關(guān)鍵詞】： 靈芝 聚合酶鏈反應(yīng) 基因間隔序列 遺傳進(jìn)化
【基金】：湖南省科技廳項(xiàng)目(No:2014sk3026)
【分類號(hào)】：S567.31
【正文快照】： 靈芝是一種名貴的藥用真菌,在我國(guó)有悠久的藥用歷史[1]�！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》將其列為上品[2]�，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)上也廣泛研究和使用[3-6]。靈芝生長(zhǎng)的適宜環(huán)境為:28~30℃溫度、空氣濕度70%~80%、二氧化碳CO2的比例0.1%、黑暗的外界生長(zhǎng)條件[7]。以靈芝的形態(tài)學(xué)特征作為分類標(biāo)準(zhǔn)是靈芝科傳，

本文編號(hào)：948152