幾種靈芝rDNA基因間隔序列分析與鑒定
發(fā)布時間:2017-09-30 12:17
本文關鍵詞:幾種靈芝rDNA基因間隔序列分析與鑒定
【摘要】:目的基于基因間隔序列(ITS)序列對靈芝進行分類。方法培養(yǎng)靈芝、提取DNA、優(yōu)化聚合酶鏈反應(PCR)體系、純化與克隆、測序、構建遺傳進化樹、進行遺傳分析。結果經過一系列的梯度實驗得知優(yōu)化的PCR體系為25μl反應混合物中含模板DNA 25ng、Mg~(2+)為2.0 mmol/L、dNT Ps 200μmol/L、Taq 1.5 U、引物為20 pmol;最佳反應程序為93℃預變性4min,93℃變性40s,59℃退火40s,72℃延伸1 min,共35個循環(huán),72℃繼續(xù)延伸7min,4℃無限循環(huán)。所采用的HZ002、DZ003、NZ004和XC005在遺傳進化樹上面十分接近,說明其可以劃分為同一菌屬,同屬于靈芝菌屬。結論基于ITS序列對靈芝進行分類,與其他的分子標記技術所取得的分類結果一致,證實依據ITS序列來對真菌菌屬進行分類是十分合理的。
【作者單位】: 湖南工業(yè)大學包裝與材料工程學院;湖南中醫(yī)藥高等?茖W校;
【關鍵詞】: 靈芝 聚合酶鏈反應 基因間隔序列 遺傳進化
【基金】:湖南省科技廳項目(No:2014sk3026)
【分類號】:S567.31
【正文快照】: 靈芝是一種名貴的藥用真菌,在我國有悠久的藥用歷史[1]!渡褶r本草經》將其列為上品[2]。現代醫(yī)學上也廣泛研究和使用[3-6]。靈芝生長的適宜環(huán)境為:28~30℃溫度、空氣濕度70%~80%、二氧化碳CO2的比例0.1%、黑暗的外界生長條件[7]。以靈芝的形態(tài)學特征作為分類標準是靈芝科傳,
本文編號:948152
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