發(fā)布時(shí)間：2017-09-27 14:35

  本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)杜仲幾丁質(zhì)酶基因EuCHIT1番茄提高對(duì)灰霉病的抗性

  更多相關(guān)文章： 杜仲 幾丁質(zhì)酶基因 番茄 灰霉菌 抗病性

【摘要】：通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將杜仲幾丁質(zhì)酶基因EuCHIT1遺傳轉(zhuǎn)化‘Micro-Tom’番茄,經(jīng)篩選和PCR鑒定獲得38株轉(zhuǎn)基因植株。對(duì)野生型和轉(zhuǎn)EuCHIT1番茄幾丁質(zhì)酶活性、灰霉病抗性、保護(hù)酶活性以及病程相關(guān)蛋白基因表達(dá)水平等進(jìn)行分析,結(jié)果表明,轉(zhuǎn)EuCHIT1番茄植株幾丁質(zhì)酶活性為2 059.48 U·g~(-1)(FW),較野生型高62.14%,差異達(dá)到極顯著水平。對(duì)野生型和轉(zhuǎn)EuCHIT1番茄植株接種灰霉菌后,轉(zhuǎn)EuCHIT1番茄發(fā)病時(shí)間比野生型推遲3 d。分別對(duì)未接種和接種灰霉菌6 d后的野生型和轉(zhuǎn)EuCHIT1番茄SOD、POD、CAT活性和MDA含量分析表明,接菌前,轉(zhuǎn)EuCHIT1番茄植株中POD活性為2 825.85 U·g~(-1)(FW),比野生型高48.63%;MDA含量為21.84 nmol·g~(-1)(FW),比野生型低28.25%;而SOD和CAT活性與野生型相比無顯著差異。接菌后,轉(zhuǎn)EuCHIT1番茄植株中SOD、POD和CAT活性分別為510.44、5 423.92和603.59 U·g~(-1)(FW),分別比野生型高19.48%、116.08%和53.80%;MDA含量為26.49 nmol·g~(-1)(FW),比野生型低37.65%。說明EuCHIT1基因表達(dá)增強(qiáng)了番茄植株的抗氧化能力,從而減少灰霉病對(duì)番茄的損傷。病程相關(guān)蛋白基因表達(dá)分析表明,接菌前,轉(zhuǎn)EuCHIT1番茄中PR~(-1)a、PR-2和PR-5基因表達(dá)量均高于野生型,分別為野生型的2.23、11.69和1.80倍,PR-NP24表達(dá)量與野生型無顯著差異;接菌后,轉(zhuǎn)EuCHIT1番茄的PR~(-1)a、PR-2、PR-NP24和PR-5表達(dá)量均極顯著高于野生型,分別是野生型的4.35、10.37、16.58和5.02倍。上述研究結(jié)果說明,轉(zhuǎn)EuCHIT1基因番茄提高對(duì)灰霉病抗性,與保護(hù)性酶活性提高以及病程相關(guān)蛋白基因表達(dá)上調(diào)有關(guān)。
【作者單位】： 貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院/農(nóng)業(yè)生物工程研究院山地植物資源保護(hù)與種質(zhì)創(chuàng)新省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院/農(nóng)業(yè)生物工程研究院貴州省山地生態(tài)與農(nóng)業(yè)生物工程2011協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 杜仲 幾丁質(zhì)酶基因 番茄 灰霉菌 抗病性
【基金】：國(guó)家“863”計(jì)劃項(xiàng)目(2013AA102605-05) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31360272) 國(guó)家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專項(xiàng)(2016ZX08010003-009)~~
【分類號(hào)】：S436.412.13
【正文快照】： 收稿2016-02-25修定2016-04-14資助國(guó)家“863”計(jì)劃項(xiàng)目(2013AA102605-05)、國(guó)家自然科學(xué)番茄灰霉病是造成番茄減產(chǎn)、品質(zhì)下降的一種世界性重要病害(Morgan 1984),一般危害造成減產(chǎn)20%~30%,嚴(yán)重時(shí)可高達(dá)50%以上,對(duì)番茄生產(chǎn)構(gòu)成極大威脅(紀(jì)軍建等2012)。自20世紀(jì)80年代開始,番

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本文編號(hào)：930214