本文關(guān)鍵詞：單增李斯特菌三重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)的建立及其毒力基因在分離菌株中分布

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【摘要】：目的建立同時(shí)檢測(cè)單增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)溶血素基因hlyA、內(nèi)化素基因inlA和磷脂酶C基因plcB的TaqMan-MGB三重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法,并對(duì)101株單增李斯特菌的hlyA、inlA和plcB基因進(jìn)行了檢測(cè),分析3個(gè)毒力基因在多位點(diǎn)序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)聚類群組中的分布情況。方法根據(jù)單增李斯特菌毒力基因hlyA、inlA和plcB的保守序列設(shè)計(jì)引物和小溝結(jié)合物(minor groove binder,MGB)探針建立三重?zé)晒釶CR方法,對(duì)其特異性、靈敏度和可重復(fù)性進(jìn)行了測(cè)試,并對(duì)分離的101株單增李斯特菌進(jìn)行三重PCR檢測(cè)。結(jié)果建立的三重實(shí)時(shí)熒光PCR方法特異于單增李斯特菌的檢測(cè),重復(fù)性良好,組內(nèi)Ct值變異系數(shù)均小于1.5%,靈敏度可達(dá)100CFU/mL。對(duì)101株單增李斯特菌的hlyA、inlA和plcB的檢出率分別為98%、75%和98%。在可被MLST分型的89株菌株中,groupI的30株菌株有20株均缺失inlA基因;groupII的57株菌株中有56株三個(gè)基因均檢出;groupIII的菌株hlyA、inlA和plcB三個(gè)基因均未檢出。結(jié)論本文建立的三重實(shí)時(shí)熒光PCR方法能準(zhǔn)確、快速、穩(wěn)定的檢測(cè)單增李斯特菌,101株單增李斯特菌的hlyA、inlA、plcB三個(gè)毒力基因的檢出情況與單增李斯特菌的MLST分型聚類有較一致的關(guān)系,對(duì)分析單增李斯特菌毒力的強(qiáng)弱有重要參考意義。
【作者單位】： 黃埔出入境檢驗(yàn)檢疫局;廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局;中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院;
【關(guān)鍵詞】： 單增李斯特菌 TaqMan-MGB三重實(shí)時(shí)熒光PCR 毒力基因分布 多位點(diǎn)序列分型
【基金】：廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2013B040402004)資助~~
【分類號(hào)】：R440
【正文快照】： (1.Huangpu Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Guangzhou510730,China;2.Guangdong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Guangzhou510730,China;3.Chinese Academy of Inspection and Quarantine,Beijing100025,China)Supported by Science and Technol

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 高波;霍哲;安希龍;胡三梅;白書媛;;食源性單增李斯特菌監(jiān)測(cè)溯源技術(shù)研究[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2014年15期

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 熊國(guó)華;單增李斯特菌及溶血素O與葡萄球菌三種腸毒素免疫膠體金檢測(cè)技術(shù)研究[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

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本文編號(hào)：922248