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‘魯星’桃中10個(gè)MADS-box基因克隆和表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2017-09-25 11:28

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【摘要】:【目的】克隆‘魯星’桃(Prunus persica var.nectarina‘Luxing’)中參與調(diào)控營養(yǎng)和生殖生長的MADS-box(Pp MADS)基因,研究其在不同組織器官中的表達(dá)特性,為解析該基因在花發(fā)育和果實(shí)發(fā)育及成熟過程中的功能奠定基礎(chǔ)。【方法】利用同源比對(duì)和RT-PCR技術(shù),克隆獲得‘魯星’桃中10個(gè)Pp MADS全長c DNA序列,并進(jìn)行生物信息學(xué)相關(guān)分析;采用RT-PCR技術(shù)檢測PpMADSs在莖、葉、萼片、子房、雄蕊、花瓣等組織以及花發(fā)育7個(gè)階段和果實(shí)發(fā)育5個(gè)階段的表達(dá)特性!窘Y(jié)果】測序結(jié)果顯示,獲得10個(gè)PpMADSs(Pp MADS11、12、19、20、21、22、28、29、30和31;Gen Bank登錄號(hào)分別為KU559577、KU559578、KU559585、KU559586、KU559587、KU559588、KU559594、KU559595、KU559596和KU559597),其開放閱讀框(open reading frame,ORF)分別為522、279、1 065、828、723、600、636、534、750和480 bp。進(jìn)化分析表明,PpMADS11屬于AP3亞組,PpMADS12是AGL17亞組,Pp MADS19屬于MIKC*組,Pp MADS20、21和22同被分為Mα組,PpMADS28、29、30和31同屬于Mγ組。亞細(xì)胞定位預(yù)測結(jié)果顯示,10個(gè)PpMADS蛋白均定位于細(xì)胞核中。啟動(dòng)子分析顯示,PpMADSs啟動(dòng)子區(qū)域含有多個(gè)順式作用元件,包括光響應(yīng)元件、防御及逆境響應(yīng)元件、干旱誘導(dǎo)的MYB結(jié)合位點(diǎn)、熱激響應(yīng)元件、低溫響應(yīng)元件、真菌效應(yīng)子響應(yīng)元件、傷害響應(yīng)元件、厭氧響應(yīng)元件、GA響應(yīng)元件、Auxin響應(yīng)元件、Me JA響應(yīng)元件、ABA響應(yīng)元件、SA響應(yīng)元件和乙烯響應(yīng)元件。半定量RT-PCR和q RT-PCR結(jié)果顯示,PpMADS11在莖、葉、萼片、子房、雄蕊、花瓣、花發(fā)育和果實(shí)發(fā)育中表達(dá);PpMADS12在莖、葉、萼片、子房、雄蕊、花瓣和花發(fā)育中表達(dá);Pp MADS19在萼片、雄蕊、花瓣和花發(fā)育中(苗期除外)表達(dá);Mα組和Mγ組所有成員在莖、葉、萼片、子房、雄蕊、花瓣和花發(fā)育中均有表達(dá),部分成員在果實(shí)發(fā)育中表達(dá)!窘Y(jié)論】10個(gè)PpMADS在‘魯星’桃的營養(yǎng)生長以及花和果實(shí)發(fā)育過程中可能具有重要的調(diào)控作用。
【作者單位】: 山東省果樹研究所;西北農(nóng)林科技大學(xué)園藝學(xué)院/旱區(qū)作物逆境生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】‘魯星’桃 MADS-box 轉(zhuǎn)錄因子 基因克隆 表達(dá)分析
【基金】:山東省良種工程項(xiàng)目(2014)
【分類號(hào)】:Q943.2;S662.1
【正文快照】: 【研究意義】桃(Prunus persica L.)作為中國重要的落葉果樹樹種之一,栽培歷史悠久,因其果實(shí)營養(yǎng)豐富、風(fēng)味鮮美,深受人們的喜愛。分子生物學(xué)和生物信息學(xué)技術(shù)的發(fā)展以及桃基因組草圖的公布,為研究和揭示桃生長和發(fā)育的分子機(jī)理奠定了基礎(chǔ)。研究‘魯星’桃(Prunus persica var

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