本文關(guān)鍵詞：還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1基因重組真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建及其對血管平滑肌細胞凋亡的影響

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【摘要】：目的構(gòu)建含人還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1(NOX1)基因重組真核表達質(zhì)粒,探討其對血管平滑肌細胞(VSMC)凋亡的影響。方法通過美國國家生物技術(shù)信息中心(NCBI)數(shù)據(jù)庫查找NOX1基因的mRNA序列,針對蛋白質(zhì)編碼區(qū)(CDS)設(shè)計引物,以人c DNA為模板擴增出NOX1基因全長CDS序列,經(jīng)雙酶切鑒定后,將NOX1基因與真核表達載體pc DNA3.1(+)連接,再經(jīng)雙酶切、測序鑒定。運用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染重組體pc DNA3.1(+)-NOX1至VSMC中,觀察NOX1表達及VSMC凋亡情況。結(jié)果重組體中NOX1基因片段和載體DNA大小與預(yù)期一致。經(jīng)BLAST(the basic local alignment search tool)比對,與NCBI數(shù)據(jù)庫中的NOX1基因序列具有高度的同源性。pc DNA3.1(+)-NOX1能促進VSMC中NOX1蛋白高表達,并促使VSMC的凋亡。結(jié)論 NOX1基因重組真核表達質(zhì)粒能促使VSMC凋亡,為闡明NOX1在主動脈夾層中的作用及分子機制研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 武漢大學(xué)人民醫(yī)院心血管外科;
【關(guān)鍵詞】： 主動脈夾層 氧化應(yīng)激 還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶- 質(zhì)粒 血管平滑肌細胞 細胞凋亡
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(編號:81570428) 中央高校基本科研業(yè)務(wù)費專項資金項目(編號:2042014kf0117) 湖北省自然科學(xué)基金面上項目(編號:2015CFB169)
【分類號】：R543.1
【正文快照】： 主動脈夾層(aortic dissection,AD)是一種病情兇險、進展快、病死率高的急性主動脈疾病[1]。如果未得到及時治療,自夾層發(fā)生開始,病死率以每小時1%~3%遞增;雖經(jīng)藥物治療,24 h病死率仍高達20%,1周后病死率高達40%[2]。還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1(nicotinamide ade

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本文編號：906611