本文關(guān)鍵詞：忽地笑γ-生育酚甲基轉(zhuǎn)移酶基因LaTMT的克隆與表達(dá)分析

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【摘要】：采用RACE技術(shù)從忽地笑〔Lycoris aurea(L’Hér.)Herb.〕葉片中克隆獲得γ-生育酚甲基轉(zhuǎn)移酶(γ-TMT)基因,命名為L(zhǎng)a TMT。序列分析結(jié)果顯示:該基因c DNA全長(zhǎng)1 458 bp,其中開(kāi)放閱讀框(ORF)長(zhǎng)1 017 bp,編碼338個(gè)氨基酸殘基。La TMT基因編碼蛋白質(zhì)的理論相對(duì)分子質(zhì)量37 560,理論等電點(diǎn)p I 8.70,為親水性蛋白,無(wú)跨膜結(jié)構(gòu)但具有信號(hào)肽結(jié)構(gòu);并具有S-腺苷甲硫氨酸(SAM)甲基轉(zhuǎn)移酶保守結(jié)構(gòu)域,包含3個(gè)SAM結(jié)合位點(diǎn);該蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)中包含44.08%的α-螺旋、32.84%的無(wú)規(guī)則卷曲、12.72%的延伸鏈和10.36%的β-轉(zhuǎn)角。序列比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析結(jié)果顯示:La TMT蛋白屬于S-腺苷甲硫氨酸-依賴性γ-生育酚甲基轉(zhuǎn)移酶家族,與其他植物γ-TMT蛋白的一致性為64%~75%;在NJ系統(tǒng)樹(shù)上,La TMT蛋白與單子葉植物γ-TMT蛋白聚為同一大類,并與油棕(Elaeis guineensis Jacq.)Eg TMT和美洲油棕〔Elaeis oleifera(Kunth)Cortés〕Eo TMT聚為同一類,親緣關(guān)系最近。基因表達(dá)分析結(jié)果顯示:La TMT基因可在大腸桿菌中成功表達(dá),且表達(dá)量隨異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)時(shí)間的延長(zhǎng)而增加;在忽地笑的根、葉片、花苞、子房、雄蕊、花瓣和鱗莖中La TMT基因均可表達(dá),其中在葉片中的相對(duì)表達(dá)量最高,在子房、雄蕊和鱗莖中的相對(duì)表達(dá)量相對(duì)較低,具有明顯的組織特異性。研究結(jié)果表明:忽地笑La TMT基因在進(jìn)化過(guò)程中具有很高的保守性;該基因主要定位于葉綠體中,并與忽地笑對(duì)非生物逆境脅迫的抗性相關(guān)。
【作者單位】： 江蘇省中國(guó)科學(xué)院植物研究所(南京中山植物園);
【關(guān)鍵詞】： 忽地笑 γ-生育酚甲基轉(zhuǎn)移酶基因 基因克隆 序列分析 表達(dá)分析
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31301798;31270339) 江蘇省科技計(jì)劃產(chǎn)學(xué)研聯(lián)合創(chuàng)新資金——前瞻性聯(lián)合研究項(xiàng)目(BY2014131);江蘇省科技計(jì)劃項(xiàng)目蘇北科技發(fā)展計(jì)劃——科技富民強(qiáng)縣項(xiàng)目(SBN201310073) 江蘇省植物遷地保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放基金項(xiàng)目(QD201302)
【分類號(hào)】：Q943.2
【正文快照】： Cloning and expression analysis onγ-tocopherol methyltransferase gene La TMT from Lycorisaurea CAI Lili1,2,XU Sheng1,MA Rui1,WANG Ren1,2,XIA Bing1,2,1(1.Institute of Botany,Jiangsu Province and Chinese Academy of Sciences,Nanjing 210014,China;2.The Jian

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 魯雪華,陳楊春;忽地笑鱗片的組織培養(yǎng)和植株再生[J];植物學(xué)通報(bào);1989年03期

2 別慶玲;徐晟;傅江燕;夏冰;汪仁;;一個(gè)新的忽地笑O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆與原核表達(dá)[J];植物生理學(xué)報(bào);2014年05期

3 ;[J];;年期

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本文編號(hào)：887679